| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 图目录 | 第13-15页 |
| 表目录 | 第15-16页 |
| 英文缩略表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-32页 |
| ·σ因子概述 | 第17-20页 |
| ·σ因子分类 | 第17-20页 |
| ·ECF 家族 | 第20-26页 |
| ·ECF 家族的发现及分类 | 第20-22页 |
| ·ECF 家族的作用机制 | 第22-25页 |
| ·ECF 家族的功能 | 第25页 |
| ·ECF 家族与细胞信号转导系统 | 第25-26页 |
| ·细菌中 ECF 家族σ因子研究进展 | 第26-29页 |
| ·大肠杆菌中 ECF 家族σ因子 | 第26-28页 |
| ·结核分枝杆菌中 ECF 家族σ因子 | 第28页 |
| ·枯草芽孢杆菌中 ECF 家族σ因子 | 第28-29页 |
| ·耐辐射异常球菌中σ因子的研究进展 | 第29页 |
| ·立题依据 | 第29-31页 |
| ·技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 Δsig1 突变株构建及逆境胁迫抗性分析 | 第32-68页 |
| ·材料与方法 | 第32-48页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第32页 |
| ·实验试剂盒、酶类及生化试剂 | 第32-33页 |
| ·培养基、抗生素及溶液配方 | 第33-34页 |
| ·实验仪器及设备 | 第34页 |
| ·Sig1 生物信息学分析 | 第34页 |
| ·细菌基因组及质粒的提取 | 第34页 |
| ·引物设计及 PCR 反应 | 第34-36页 |
| ·DNA 片段切胶回收与产物纯化 | 第36页 |
| ·PCR 产物末端加 A | 第36-37页 |
| ·酶切与连接 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌感受态热激转化 | 第38页 |
| ·耐辐射异常球菌感受态的制备及线性转化 | 第38-39页 |
| ·D.radiodurans 突变株感受态的制备及质粒转化 | 第39页 |
| ·细菌 RNA 的提取及 DNA 的消化 | 第39-40页 |
| ·反转录 | 第40页 |
| ·操纵单元验证 | 第40-42页 |
| ·Δsig1 回补株构建 | 第42页 |
| ·菌株正常培养条件下生长曲线测定 | 第42页 |
| ·48℃热激处理下菌株的生长 | 第42-43页 |
| ·过氧化氢冲击下菌株的生长 | 第43页 |
| ·过氧化氢冲击下菌株的存活情况 | 第43-44页 |
| ·乙醇冲击下菌株的生长 | 第44页 |
| ·酸冲击下菌株的生长 | 第44页 |
| ·山梨糖醇冲击下菌株的生长 | 第44-45页 |
| ·干燥处理下菌株的生长情况 | 第45页 |
| ·Biolog 实验 | 第45页 |
| ·RNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·cDNA 的合成 | 第46页 |
| ·荧光实时定量 PCR | 第46-48页 |
| ·实验结果 | 第48-66页 |
| ·Sig1 结构分析 | 第48-49页 |
| ·Sig1 进化分析 | 第49-51页 |
| ·Δsig1 突变株的构建 | 第51-54页 |
| ·转录单元验证 | 第54-55页 |
| ·Δsig1 回补株的构建与验证 | 第55-56页 |
| ·正常培养条件下Δsig1 突变株对菌株生长的影响 | 第56-57页 |
| ·sig1 基因突变对菌株在热激胁迫下的影响 | 第57-58页 |
| ·sig1 基因突变对菌株在氧化抗性上的影响 | 第58页 |
| ·氧化胁迫下的菌株存活情况 | 第58-59页 |
| ·乙醇胁迫下突变株Δsig1 的生长 | 第59页 |
| ·酸胁迫下突变株Δsig1 的生长 | 第59页 |
| ·其他逆境处理下的表型 | 第59-60页 |
| ·Δsig1 突变株对不同碳源的利用情况 | 第60-62页 |
| ·sig1 基因在菌株生长不同时期的表达情况 | 第62页 |
| ·野生型 R1 中 sig1 基因在高温下的表达分析 | 第62-63页 |
| ·热激胁迫相关基因的表达量 | 第63-64页 |
| ·氧化胁迫相关基因的表达情况 | 第64-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·Sig1 生物信息学分析 | 第66页 |
| ·Sig1 在高温胁迫中的作用 | 第66-67页 |
| ·Sig1 在氧化胁迫中的作用 | 第67-68页 |
| 第三章 sig1 基因依赖型启动子活性分析 | 第68-82页 |
| ·材料与方法 | 第68-74页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第68页 |
| ·实验试剂盒、酶类及生化试剂 | 第68页 |
| ·培养基、抗生素及溶液配方 | 第68-69页 |
| ·实验仪器及设备 | 第69页 |
| ·细菌基因组及质粒的提取 | 第69-70页 |
| ·PCR 引物设计及 PCR 反应 | 第70-71页 |
| ·PCR 产物末端加 A | 第71页 |
| ·酶切与连接 | 第71页 |
| ·大肠杆菌感受态热激转化 | 第71页 |
| ·耐辐射异常球菌感受态的制备及线性转化 | 第71页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性测定 | 第71-72页 |
| ·Sig1 蛋白诱导与纯化 | 第72-73页 |
| ·Sig1 蛋白的纯化 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-80页 |
| ·pspA 启动子-lacZ 融合子的构建 | 第74-75页 |
| ·启动子活性分析 | 第75-76页 |
| ·Sig1 蛋白表达载体的构建 | 第76-78页 |
| ·融合蛋白 pTWIN1-Sig1 的表达与纯化 | 第78-80页 |
| ·讨论 | 第80-82页 |
| 第四章 全文结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 作者简历 | 第91页 |
