| 目录 | 第1-9页 |
| 縮略词 | 第9-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-26页 |
| 1 叶子花属植物的研究进展 | 第15-18页 |
| ·叶子花形态学和生态学特征 | 第15页 |
| ·叶子花引种栽培及分类学研究 | 第15-16页 |
| ·叶子花的繁殖与品种培育研究 | 第16-17页 |
| ·叶子花的栽培养护和促花 | 第17-18页 |
| ·叶子花应用价值研究 | 第18页 |
| 2 甜菜色素研究进展 | 第18-25页 |
| ·甜菜色素提取方法 | 第19-20页 |
| ·甜菜色素的种类和结构 | 第20-21页 |
| ·甜菜色素的代谢途径 | 第21-23页 |
| ·甜菜色素代谢过程中关键酶 | 第23-25页 |
| ·酪氨酸酶 | 第23-24页 |
| ·多巴双加氧酶 | 第24页 |
| ·葡糖基转移酶 | 第24-25页 |
| 3 本研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 叶子花多巴加氧酶(DOD)基因的克隆与分析 | 第26-49页 |
| 1 试验样品 | 第26-27页 |
| ·试验样品 | 第26页 |
| ·试验试剂 | 第26页 |
| ·试验仪器 | 第26-27页 |
| 2 试验方法 | 第27-34页 |
| ·叶子花苞片总RNA提取 | 第27页 |
| ·RNA检测 | 第27页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA保守区克隆 | 第27-31页 |
| ·逆转录反应 | 第27-28页 |
| ·保守区引物设计 | 第28页 |
| ·保守区PCR反应 | 第28-29页 |
| ·片段回收 | 第29-30页 |
| ·目的片段连接 | 第30页 |
| ·感受态细胞制备及转化 | 第30-31页 |
| ·制备DH5α感受态细胞 | 第30页 |
| ·目的片段转化 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的PCR检测 | 第31页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA 3’端克隆 | 第31-33页 |
| ·3’端引物设计 | 第31页 |
| ·3’端PCR反应 | 第31-33页 |
| ·第一轮PCR反应 | 第32页 |
| ·第二轮PCR反应 | 第32-33页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA 5’端克隆 | 第33页 |
| ·5’端引物设计 | 第33页 |
| ·5’端PCR反应 | 第33页 |
| ·叶子花DOD基因开放阅读框(ORF)克隆 | 第33-34页 |
| ·ORF引物设计 | 第33页 |
| ·ORF区域PCR反应 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-39页 |
| ·叶子花总RNA检测 | 第34页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA保守区克隆与序列分析 | 第34-35页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA 3’端克隆 | 第35-36页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA 5’端克隆 | 第36-37页 |
| ·叶子花DOD基因全长序列拼接 | 第37-38页 |
| ·叶子花DOD基因开放阅读框(ORF)的克隆和分析 | 第38-39页 |
| 4 叶子花DOD基因cDNA序列生物信息学分析 | 第39-48页 |
| ·叶子花DOD基因cDNA核苷酸序列分析 | 第39-41页 |
| ·叶子花DOD基因编码的氨基酸序列分析 | 第41-42页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白保守区预测和分析 | 第42页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白亲水性分析 | 第42-43页 |
| ·叶子花DOD基因编码氨基酸序列同源性比对分析与构建系统进化树 | 第43-44页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白亚细胞定位预测 | 第44-45页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白信号肽预测 | 第45页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白磷酸化位点预测 | 第45-46页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白跨膜信号预测 | 第46-47页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白二级结构预测 | 第47页 |
| ·叶子花DOD基因编码蛋白三级结构预测 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-49页 |
| 第三章 叶子花葡糖基转移酶(UDP)基因的克隆与分析 | 第49-70页 |
| 1 主要试验材料 | 第49页 |
| 2 试验方法 | 第49-53页 |
| ·叶子花苞片总RNA提取 | 第49页 |
| ·RNA检测 | 第49页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA保守区克隆 | 第49-50页 |
| ·逆转录反应 | 第49页 |
| ·保守区引物设计 | 第49页 |
| ·保守区PCR反应 | 第49-50页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA 3’端克隆 | 第50页 |
| ·3’端引物设计 | 第50页 |
| ·3’端PCR反应 | 第50页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA 5’端克隆 | 第50-52页 |
| ·5’端引物设计 | 第50页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA第一链合成 | 第50-51页 |
| ·逆转录产物纯化 | 第51页 |
| ·加尾反应 | 第51-52页 |
| ·加尾产物纯化 | 第52页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA第二链合成 | 第52页 |
| ·5’端PCR反应 | 第52页 |
| ·叶子花UDP基因开放阅读框(ORF)克隆 | 第52-53页 |
| ·ORF引物设计 | 第52-53页 |
| ·ORF PCR反应 | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-60页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA保守区克隆与序列分析 | 第53-54页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA 3’端克隆 | 第54-56页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA 5’端克隆 | 第56-57页 |
| ·叶子花UDP基因全长序列拼接 | 第57-59页 |
| ·叶子花UDP基因开放阅读框(ORF)的克隆和分析 | 第59-60页 |
| 4 叶子花UDP基因cDNA序列生物信息学分析 | 第60-69页 |
| ·叶子花UDP基因cDNA核苷酸序列分析 | 第60-61页 |
| ·叶子花UDP基因编码的氨基酸序列分析 | 第61-62页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白保守区预测和分析 | 第62-63页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白亲水性分析 | 第63页 |
| ·叶子花UDP基因编码氨基酸序列同源性比对分析与构建系统进化树 | 第63-65页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白亚细胞定位预测 | 第65-66页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白信号肽预测 | 第66页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白磷酸化位点预测 | 第66-67页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白跨膜信号预测 | 第67-68页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白二级结构预测 | 第68页 |
| ·叶子花UDP基因编码蛋白三级结构预测 | 第68-69页 |
| 5 讨论 | 第69-70页 |
| 第四章 DOD基因和UDP基因的实时荧光定量表达分析 | 第70-78页 |
| 1 试验材料 | 第70页 |
| ·试验样品 | 第70页 |
| ·试验仪器和试剂 | 第70页 |
| 2 试验方法 | 第70-73页 |
| ·内参基因的筛选 | 第70页 |
| ·荧光定量引物设计 | 第70-71页 |
| ·叶子花苞片各个不同时期RNA提取 | 第71页 |
| ·逆转录反应 | 第71页 |
| ·内参基因筛选和特异引物的检测 | 第71-72页 |
| ·荧光定量PCR反应 | 第72页 |
| ·制定标准曲线 | 第72页 |
| ·荧光定量PCR检测与计算 | 第72-73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-77页 |
| ·叶子花总RNA提取与检测 | 第73页 |
| ·内参基因的筛选和特异引物的检测 | 第73页 |
| ·荧光定量PCR扩增 | 第73-75页 |
| ·不同时期叶子花DOD基因的相对表达量分析 | 第75-76页 |
| ·不同时期叶子花UDP基因的相对表达量分析 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录Ⅰ | 第86-87页 |
| 附录Ⅱ | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
