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保靖黄金茶资源多样性分析及CsICE1基因转化烟草研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩写词(Abbreviation)第8-9页
目录第9-18页
第一章 绪论第18-31页
 1 遗传多样性研究综述第18页
   ·遗传多样性的含义第18页
   ·遗传多样性的研究意义第18页
 2 茶树种质资源遗传多样性研究进展第18-22页
   ·基于形态学和生物学的茶树遗传多样性研究第19页
   ·基于生理生化的茶树遗传多样性研究第19-20页
   ·基于细胞水平的茶树遗传多样性研究第20页
   ·基于DNA分子标记的茶树遗传多样性研究第20-22页
 3 湖南茶叶概况第22-25页
   ·湖南省茶业发展概况第22-23页
   ·湖南省茶树资源概况第23-25页
     ·湖南省茶树资源现状第23页
     ·保靖黄金茶茶树资源现状第23-25页
 4 茶树基因功能研究进展第25-28页
   ·农杆菌介导茶树遗传转化体系的探索第25页
   ·基因枪技术应用于茶树遗传转化第25-26页
   ·验证茶树目的基因的功能第26-28页
   ·茶树转基因技术展望第28页
     ·存在问题第28页
     ·应用前景第28页
 5 本研究的目的与意义第28-29页
 6 研究内容第29-30页
 7 技术路线第30-31页
第二章 保靖黄金茶早发株系春茶生产期间主要化学成分动态变化研究第31-41页
 1 材料与方法第31-34页
   ·试验材料、主要仪器与试剂第31-33页
     ·试验材料第31-32页
     ·主要仪器第32页
     ·主要试剂第32-33页
   ·试验方法第33-34页
     ·样品前处理第33页
     ·茶多酚总量测定第33页
     ·总氨基酸测定第33页
     ·茶氨酸测定第33-34页
 2 结果与分析第34-39页
   ·春茶生产期间茶多酚含量的动态变化第34-35页
   ·春茶生产期间总氨基酸含量的动态变化第35-36页
   ·春茶生产期间茶氨酸含量的动态变化第36-38页
   ·春茶生产期间酚氨比的动态变化第38-39页
 3 讨论第39-40页
   ·选育适制名优绿茶茶树新品种的意义第39页
   ·保靖黄金茶群体品种中适制名优绿茶茶树资源的初步筛选第39-40页
 4 本章小结第40-41页
第三章 保靖黄金茶种质资源遗传多样性的AFLP分析第41-52页
 1 材料与方法第41-44页
   ·试验材料、主要仪器与试剂第41-43页
     ·试验材料第41页
     ·主要仪器第41-42页
     ·主要试剂第42-43页
   ·试验方法第43-44页
     ·样品基因组DNA提取第43页
     ·AFLP分析第43页
     ·数据处理及分析第43-44页
 2 结果与分析第44-48页
   ·111个样品的AFLP扩增结果第44页
   ·黄金茶群体的遗传多样性第44-48页
   ·黄金茶群体各株系间的亲缘关系第48页
 3 讨论第48-50页
   ·AFLP-银染技术在茶树种质资源遗传多样性与亲缘关系研究中的高效性第48页
   ·统计分析结果与前人的比较第48-50页
 4 本章小结第50-52页
第四章 保靖黄金茶低温诱导抗寒相关基因的表达研究第52-64页
 1 材料与方法第52-54页
   ·试验材料、主要仪器与试剂第52-53页
     ·试验材料第52页
     ·主要仪器第52-53页
     ·主要试剂第53页
   ·试验方法第53-54页
     ·总RNA提取、纯化及检测第53页
     ·RT-qPCR验证基因表达水平第53-54页
     ·目的基因扩增效率分析第54页
 2 结果与分析第54-59页
   ·样品总RNA完整性及纯度第54-55页
   ·目的基因扩增效率分析第55页
   ·CsICE1、CsCBF1基因的表达变化第55-56页
   ·CsERF基因的表达变化第56-57页
   ·CsRAV基因的表达变化第57-58页
   ·CsRbcS基因的表达变化第58页
   ·CsDHN1、CsDHN2基因的表达变化第58-59页
 3 讨论第59-63页
   ·低温对CsICE1、CsCBF1基因表达的影响第59-61页
   ·低温对CsERF基因表达的影响第61-62页
   ·低温对CsRAV基因表达的影响第62页
   ·低温对CsRbcS基因表达的影响第62页
   ·低温对CsDHN1、CsDHN2基因表达的影响第62-63页
 4 本章小结第63-64页
第五章 茶树CsICE1基因过表达载体构建第64-76页
 1 材料与方法第64-70页
   ·试验材料、仪器与试剂第64-65页
     ·菌种与质粒第64-65页
     ·主要试剂第65页
   ·试验方法第65-70页
     ·总RNA的提取及cDNA第一链合成第65-66页
     ·CsICE1基因的PCR扩增第66页
     ·CsICE1基因的片段回收第66-67页
     ·CsICE1基因的回收产物加A尾第67页
     ·pCX-DG载体酶切及片段回收第67-68页
     ·CsICE1过表达载体构建第68-69页
     ·植物过表达载体pCX-DG-CsICE1导入农杆菌第69-70页
 2 结果与分析第70-72页
   ·黄金茶CsICE1基因的ORF序列克隆第70-71页
   ·pCX-DG载体的酶切回收第71页
   ·转化子验证第71-72页
 3 讨论第72-75页
   ·抗寒目的基因的选择第72-73页
   ·表达载体的构建第73-75页
     ·过表达载体pCX-DG的优点第73-74页
     ·影响限制性内切酶酶切效果的因素第74页
     ·连接片段的浓度比以及酶的选择第74-75页
 4 本章小结第75-76页
第六章 根癌农杆菌介导CsICE1基因过表达载体转化烟草研究第76-86页
 1 材料与方法第76-79页
   ·试验材料、仪器与试剂第76页
     ·植物材料第76页
     ·主要试剂第76页
     ·主要培养基第76页
   ·试验方法第76-79页
     ·烟草材料的准备第77页
     ·工程菌转化烟草第77-78页
     ·抗性植株的分子生物学检测第78页
     ·T1代转基因烟草耐低温检测第78-79页
 2 结果与分析第79-84页
   ·农杆菌介导的遗传转化及植株再生第79-80页
   ·转化材料中的GFP表达第80-81页
   ·抗性植株的分子生物学检测第81-84页
     ·转pCX-DG-CsICEl的PCR检测第81-82页
     ·转基因植株的半定量RT-PCR分析第82页
     ·T1代转基因烟草的耐低温检测第82-84页
 3 讨论第84-85页
   ·农杆菌第84页
   ·试验操作第84页
   ·GFP在遗传转化中的应用前景第84-85页
     ·优越性第84-85页
     ·注意事项第85页
     ·存在的问题第85页
 4 本章小结第85-86页
全文总结第86-88页
 1 主要研究结果第86-87页
 2 主要创新点第87页
 3 展望第87-88页
参考文献第88-102页
致谢第102-103页
作者简历第103页
参与课题第103页
获奖第103-104页
发表的文章第104页

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