摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
论文缩略词表 | 第9-14页 |
第一部分 综述:无脊椎动物病原特征及先天免疫 | 第14-28页 |
1 病原特征及识别模式 | 第15-19页 |
·主要病原及其特征简介 | 第15-16页 |
·主要病原菌及其特征 | 第15-16页 |
·主要病毒及其特征 | 第16页 |
·病原相关模式分子 | 第16-18页 |
·病原相关模式分子的识别模式受体 | 第18-19页 |
2 先天免疫系统 | 第19-28页 |
·物理屏障 | 第19-20页 |
·体表 | 第19-20页 |
·消化道管壁 | 第20页 |
·细胞免疫 | 第20-22页 |
·血细胞的吞噬和包裹作用 | 第20-21页 |
·血细胞粘连和结节形成 | 第21-22页 |
·体液免疫 | 第22-28页 |
·血淋巴的凝结与黑化作用 | 第22-23页 |
·抗菌肽 | 第23页 |
·体液免疫过程中的信号转导途径 | 第23-28页 |
第二部分 拟穴青蟹(SCYLLA PARAMAMOSAIN)免疫相关基因P38、PIAS和HSP90的克隆与表达分析 | 第28-72页 |
第一章 拟穴青蟹P38基因和PIAS基因的克隆及表达模式分析 | 第28-53页 |
1 材料和方法 | 第29-37页 |
·材料 | 第29-30页 |
·试剂与仪器 | 第29页 |
·病原微生物 | 第29-30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·方法 | 第30-37页 |
·免疫刺激及样品采集 | 第30页 |
·总RNA提取 | 第30-31页 |
·总RNA质量检测 | 第31页 |
·第一链cDNA合成 | 第31-32页 |
·SpP38和SpPIAS全长cDNA序列克隆 | 第32-36页 |
·序列分析 | 第36页 |
·SpP38和SpPIAS表达分析 | 第36-37页 |
2 结果 | 第37-49页 |
·总RNA质量检测 | 第37-38页 |
·拟穴青蟹SPP38和SPPIAS基因cDNA序列全长克隆及序列预测分析 | 第38-41页 |
·编码蛋白的组成与结构预测分析 | 第41-42页 |
·SPP38和SPPIAS基因编码氨基酸的多序列比对及进化树的构建 | 第42-48页 |
·拟穴青蟹HSP90基因的组织分布与病原刺激后表达模式分析 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-51页 |
4 结论 | 第51-53页 |
第二章 拟穴青蟹HSP90基因的克隆、表达分析及微生物结合活性研究 | 第53-72页 |
1 材料和方法 | 第53-62页 |
·材料 | 第53-54页 |
·试剂与仪器 | 第53-54页 |
·实验用微生物 | 第54页 |
·实验动物 | 第54页 |
·方法 | 第54-62页 |
·免疫刺激、样品采集、总RNA提取和第一链cDNA合成 | 第54页 |
·HSP90全长cDNA序列克隆与序列分析 | 第54-55页 |
·SpHSP90表达模式分析 | 第55页 |
·原核表达 | 第55-59页 |
·蛋白纯化 | 第59-60页 |
·Western blot验证 | 第60-61页 |
·微生物结合实验 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-69页 |
·拟穴青蟹HSP90基因CDNA序列全长克隆及序列预测分析 | 第62-64页 |
·编码蛋白的组成与结构预测分析 | 第64-65页 |
·氨基酸多序列比对及进化树的构建 | 第65-67页 |
·拟穴青蟹HSP90基因的组织分布与病原刺激后表达模式分析 | 第67-68页 |
·诱导融合蛋白的表达纯化及WESTERN BLOT验证 | 第68页 |
·微生物结合活性 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
4 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
在读硕士期间发表论文情况 | 第84页 |