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拟穴青蟹(Scylla paramamosain)免疫相关基因P38、PIAS和HSP90的克隆与表达分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
论文缩略词表第9-14页
第一部分 综述:无脊椎动物病原特征及先天免疫第14-28页
 1 病原特征及识别模式第15-19页
   ·主要病原及其特征简介第15-16页
     ·主要病原菌及其特征第15-16页
     ·主要病毒及其特征第16页
   ·病原相关模式分子第16-18页
   ·病原相关模式分子的识别模式受体第18-19页
 2 先天免疫系统第19-28页
   ·物理屏障第19-20页
     ·体表第19-20页
     ·消化道管壁第20页
   ·细胞免疫第20-22页
     ·血细胞的吞噬和包裹作用第20-21页
     ·血细胞粘连和结节形成第21-22页
   ·体液免疫第22-28页
     ·血淋巴的凝结与黑化作用第22-23页
     ·抗菌肽第23页
     ·体液免疫过程中的信号转导途径第23-28页
第二部分 拟穴青蟹(SCYLLA PARAMAMOSAIN)免疫相关基因P38、PIAS和HSP90的克隆与表达分析第28-72页
 第一章 拟穴青蟹P38基因和PIAS基因的克隆及表达模式分析第28-53页
  1 材料和方法第29-37页
   ·材料第29-30页
     ·试剂与仪器第29页
     ·病原微生物第29-30页
     ·实验动物第30页
   ·方法第30-37页
     ·免疫刺激及样品采集第30页
     ·总RNA提取第30-31页
     ·总RNA质量检测第31页
     ·第一链cDNA合成第31-32页
     ·SpP38和SpPIAS全长cDNA序列克隆第32-36页
     ·序列分析第36页
     ·SpP38和SpPIAS表达分析第36-37页
  2 结果第37-49页
   ·总RNA质量检测第37-38页
   ·拟穴青蟹SPP38和SPPIAS基因cDNA序列全长克隆及序列预测分析第38-41页
   ·编码蛋白的组成与结构预测分析第41-42页
   ·SPP38和SPPIAS基因编码氨基酸的多序列比对及进化树的构建第42-48页
   ·拟穴青蟹HSP90基因的组织分布与病原刺激后表达模式分析第48-49页
  3 讨论第49-51页
  4 结论第51-53页
 第二章 拟穴青蟹HSP90基因的克隆、表达分析及微生物结合活性研究第53-72页
  1 材料和方法第53-62页
   ·材料第53-54页
     ·试剂与仪器第53-54页
     ·实验用微生物第54页
     ·实验动物第54页
   ·方法第54-62页
     ·免疫刺激、样品采集、总RNA提取和第一链cDNA合成第54页
     ·HSP90全长cDNA序列克隆与序列分析第54-55页
     ·SpHSP90表达模式分析第55页
     ·原核表达第55-59页
     ·蛋白纯化第59-60页
     ·Western blot验证第60-61页
     ·微生物结合实验第61-62页
  2 结果第62-69页
   ·拟穴青蟹HSP90基因CDNA序列全长克隆及序列预测分析第62-64页
   ·编码蛋白的组成与结构预测分析第64-65页
   ·氨基酸多序列比对及进化树的构建第65-67页
   ·拟穴青蟹HSP90基因的组织分布与病原刺激后表达模式分析第67-68页
   ·诱导融合蛋白的表达纯化及WESTERN BLOT验证第68页
   ·微生物结合活性第68-69页
  3 讨论第69-71页
  4 结论第71-72页
参考文献第72-83页
致谢第83-84页
在读硕士期间发表论文情况第84页

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