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牛巴贝斯虫病ELISA检测方法的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 引言第11-18页
   ·病原学特征第11页
   ·生活史第11页
   ·病理学和致病机制第11-12页
   ·超微结构第12页
   ·牛巴贝斯虫的入侵机制第12-13页
   ·牛巴贝斯虫的血清学诊断进展第13-16页
     ·间接荧光抗体试验(INDIRECT FLUORESCENT ANTIBODY TEST,IFAT)第13页
     ·免疫印迹法(WESTERN BLOTTING)第13-14页
     ·酶联免疫吸附试验(ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY,ELISA)第14-16页
   ·研究内容第16-18页
第二章 牛巴贝斯虫 RAP-1 C 端基因的克隆、表达与鉴定第18-26页
   ·材料第18页
     ·主要仪器第18页
     ·主要试剂第18页
     ·虫体与血清第18页
     ·实验动物第18页
   ·方法第18-21页
     ·RAP-1 基因的生物信息学分析第18-19页
     ·引物的设计与合成第19页
     ·RAP -1 基因的 PCR 扩增第19页
     ·RAP-1 基因与 pGEM-T Easy 载体的连接与转化第19-20页
     ·表达质粒 pBORCT 的构建第20页
     ·BORCT 的诱导表达第20-21页
     ·重组蛋白的可溶性分析第21页
     ·重组蛋白的纯化第21页
     ·重组蛋白的反应原性的检测第21页
   ·结果第21-25页
     ·蛋白区段的生物信息学分析第21-22页
     ·目的基因的克隆第22-23页
     ·重组表达菌的诱导表达第23-24页
     ·重组蛋白的 Western blot 鉴定第24-25页
   ·讨论第25-26页
第三章 重组蛋白 BORCT 的间接 ELISA 方法的建立第26-36页
   ·材料第26-27页
     ·主要仪器第26页
     ·主要试剂第26页
     ·抗原的制备第26-27页
     ·血清的采集第27页
   ·方法第27-30页
     ·间接 ELISA 试验程序第27-28页
     ·ELISA 最佳反应条件的选择第28-29页
     ·ELISA 阳性阈值和特异性、敏感性的确定第29页
     ·特异性实验(交叉实验)第29页
     ·抗体动态曲线的评价第29-30页
     ·野外样品 ELISA 方法的评价第30页
   ·结果第30-34页
     ·ELISA 最佳反应条件的选择第30-32页
     ·ELISA 阳性阈值和异性、敏感性的确定第32-33页
     ·特异性实验(交叉实验)第33页
     ·抗体动态曲线的评价第33-34页
     ·野外样品对 ELISA 方法的评价第34页
   ·讨论第34-36页
第四章 中国部分地区牛巴贝斯虫的血清流行病学调查第36-40页
   ·材料第36-37页
     ·主要器材第36页
     ·主要试剂第36页
     ·抗原的制备第36页
     ·血清的采集第36-37页
   ·方法第37页
   ·结果第37-38页
   ·讨论第38-40页
第五章 全文结论第40-41页
参考文献第41-48页
致谢第48-49页
作者简介第49页

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