摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-18页 |
·病原学特征 | 第11页 |
·生活史 | 第11页 |
·病理学和致病机制 | 第11-12页 |
·超微结构 | 第12页 |
·牛巴贝斯虫的入侵机制 | 第12-13页 |
·牛巴贝斯虫的血清学诊断进展 | 第13-16页 |
·间接荧光抗体试验(INDIRECT FLUORESCENT ANTIBODY TEST,IFAT) | 第13页 |
·免疫印迹法(WESTERN BLOTTING) | 第13-14页 |
·酶联免疫吸附试验(ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY,ELISA) | 第14-16页 |
·研究内容 | 第16-18页 |
第二章 牛巴贝斯虫 RAP-1 C 端基因的克隆、表达与鉴定 | 第18-26页 |
·材料 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·虫体与血清 | 第18页 |
·实验动物 | 第18页 |
·方法 | 第18-21页 |
·RAP-1 基因的生物信息学分析 | 第18-19页 |
·引物的设计与合成 | 第19页 |
·RAP -1 基因的 PCR 扩增 | 第19页 |
·RAP-1 基因与 pGEM-T Easy 载体的连接与转化 | 第19-20页 |
·表达质粒 pBORCT 的构建 | 第20页 |
·BORCT 的诱导表达 | 第20-21页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第21页 |
·重组蛋白的纯化 | 第21页 |
·重组蛋白的反应原性的检测 | 第21页 |
·结果 | 第21-25页 |
·蛋白区段的生物信息学分析 | 第21-22页 |
·目的基因的克隆 | 第22-23页 |
·重组表达菌的诱导表达 | 第23-24页 |
·重组蛋白的 Western blot 鉴定 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-26页 |
第三章 重组蛋白 BORCT 的间接 ELISA 方法的建立 | 第26-36页 |
·材料 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·抗原的制备 | 第26-27页 |
·血清的采集 | 第27页 |
·方法 | 第27-30页 |
·间接 ELISA 试验程序 | 第27-28页 |
·ELISA 最佳反应条件的选择 | 第28-29页 |
·ELISA 阳性阈值和特异性、敏感性的确定 | 第29页 |
·特异性实验(交叉实验) | 第29页 |
·抗体动态曲线的评价 | 第29-30页 |
·野外样品 ELISA 方法的评价 | 第30页 |
·结果 | 第30-34页 |
·ELISA 最佳反应条件的选择 | 第30-32页 |
·ELISA 阳性阈值和异性、敏感性的确定 | 第32-33页 |
·特异性实验(交叉实验) | 第33页 |
·抗体动态曲线的评价 | 第33-34页 |
·野外样品对 ELISA 方法的评价 | 第34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第四章 中国部分地区牛巴贝斯虫的血清流行病学调查 | 第36-40页 |
·材料 | 第36-37页 |
·主要器材 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36页 |
·抗原的制备 | 第36页 |
·血清的采集 | 第36-37页 |
·方法 | 第37页 |
·结果 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第五章 全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |