| 致谢 | 第1-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-20页 |
| 前言 | 第20-25页 |
| 第一章 文献综述 | 第25-37页 |
| 1 寄生蜂毒液蛋白组分的研究进展 | 第25-30页 |
| ·毒液理化性质 | 第25-26页 |
| ·毒液蛋白组分 | 第26-30页 |
| 2 寄生蜂毒液蛋白功能的研究进展 | 第30-35页 |
| ·对寄主免疫的抑制 | 第30-33页 |
| ·对寄主生长发育的调控 | 第33-35页 |
| ·对寄主的麻痹作用 | 第35页 |
| ·其它 | 第35页 |
| 3 毒液应用的展望 | 第35-37页 |
| 第二章 丽蝇蛹集金小蜂毒液对寄主家蝇蛹血细胞基因转录的调控 | 第37-63页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·供试昆虫 | 第38页 |
| ·毒腺的解剖及粗毒液的制备 | 第38页 |
| ·血细胞存活率的测定 | 第38-39页 |
| ·血细胞的体外包囊反应 | 第39页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·抑制性消减杂交文库的构建 | 第40-41页 |
| ·文库ESTs序列测定 | 第41-42页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第42-44页 |
| ·酶活检测 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-60页 |
| ·毒液对家蝇蛹血细胞存活率的影响 | 第44-45页 |
| ·毒液对家蝇蛹血细胞包囊力的影响 | 第45-46页 |
| ·ESTs序列分析 | 第46-57页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第57-59页 |
| ·酶活分析 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 第三章 丽蝇蛹集金小蜂毒腺转录组的测定与分析 | 第63-74页 |
| 1 材料与方法 | 第64-68页 |
| ·供试昆虫 | 第64页 |
| ·毒腺的解剖 | 第64页 |
| ·总RNA的提取 | 第64-65页 |
| ·RNA-Seq测序文库的构建 | 第65页 |
| ·RNA-Seq文库的测序 | 第65-66页 |
| ·De novo组装 | 第66页 |
| ·基因的注释 | 第66-67页 |
| ·Unigene的表达差异分析 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-73页 |
| 3 讨论 | 第73-74页 |
| 第四章 丽蝇蛹集金小蜂毒液蛋白质组的测定与分析 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第75-77页 |
| ·毒液蛋白的制备 | 第75页 |
| ·毒液蛋白的SDS-PAGE电泳及分级 | 第75-76页 |
| ·蛋白条带的胶内酶解 | 第76页 |
| ·毒液蛋白的毛细管高效液相色谱分析 | 第76页 |
| ·质谱鉴定及数据分析 | 第76-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-82页 |
| 3 讨论 | 第82-84页 |
| 第五章 丽蝇蛹集金小蜂毒液PACIFASTIN类基因的表达及功能研究 | 第84-105页 |
| 1 材料与方法 | 第87-91页 |
| ·供试昆虫 | 第87页 |
| ·样品的制备 | 第87页 |
| ·RNA的提取及cDNA的制备 | 第87页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第87-88页 |
| ·序列分析 | 第88页 |
| ·重组质粒的构建 | 第88-89页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第89页 |
| ·SDS-PAGE电泳及抗体制备 | 第89页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第89-90页 |
| ·免疫印迹检测(Western blot) | 第90页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第90页 |
| ·重组蛋白对丝氨酸蛋白酶活性的影响 | 第90-91页 |
| ·重组蛋白对家蝇蛹血淋巴PO活性及PPO激活的影响 | 第91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-102页 |
| ·nvpp-1和nvpp-2的RT-PCR扩增及其序列分析 | 第91-96页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第96-97页 |
| ·基因nvpp-1和nvpp-2转录及其蛋白产物表达的组织特异性 | 第97-99页 |
| ·nvpp-1和nvpp-2在毒器官中转录及其表达产物在毒液蛋白中含量随发育动态的变化 | 第99-101页 |
| ·重组蛋白对丝氨酸蛋白酶活性的影响 | 第101页 |
| ·重组蛋白对家蝇蛹血淋巴PO活性及PPO激活的影响 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-105页 |
| 第六章 丽蝇蛹集金小蜂毒液KAZAL类基因的表达及功能研究 | 第105-119页 |
| 1 材料与方法 | 第107-110页 |
| ·供试昆虫 | 第107页 |
| ·样品的制备 | 第107页 |
| ·RNA的提取及cDNA的制备 | 第107页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第107-108页 |
| ·序列分析 | 第108页 |
| ·重组质粒的构建 | 第108页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第108-109页 |
| ·SDS-PAGE电泳及抗体制备 | 第109页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第109页 |
| ·免疫印迹检测(Western blot) | 第109页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第109-110页 |
| ·重组蛋白对丝氨酸蛋白酶活性的影响 | 第110页 |
| ·重组蛋白对家蝇蛹血淋巴PO活性及PPO激活的影响 | 第110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-117页 |
| ·nvkvp-1和nvkvp-2的RT-PCR扩增及其序列分析 | 第110-113页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第113-114页 |
| ·nvkvp-1和nvkvp-2在不同组织中的转录分析 | 第114-115页 |
| ·nvkvp-1和nvkvp-p-2在毒腺中不同时期的转录分析 | 第115-116页 |
| ·重组蛋白对丝氨酸蛋白酶活性的影响 | 第116页 |
| ·重组蛋白对家蝇蛹血淋巴PO活性及PPO激活的影响 | 第116-117页 |
| 3 讨论 | 第117-119页 |
| 总讨论 | 第119-122页 |
| 参考文献 | 第122-152页 |
| 作者简历 | 第152页 |
