| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 0 引言 | 第12-13页 |
| 1 冠状病毒 | 第13-26页 |
| ·冠状病毒的分类与危害 | 第13-18页 |
| ·冠状病毒的分类 | 第14-15页 |
| ·冠状病毒引起的疾病与危害 | 第15-18页 |
| ·冠状病毒的研究概况 | 第18-24页 |
| ·冠状病毒的研究历史 | 第18-19页 |
| ·冠状病毒的复制周期 | 第19-20页 |
| ·冠状病毒的复制转录机制 | 第20-21页 |
| ·复制转录相关蛋白 | 第21-24页 |
| ·冠状病毒的防治 | 第24-26页 |
| 2 冠状病毒RNA的加帽机制研究进展 | 第26-38页 |
| ·RNA帽子结构的功能和加工过程 | 第26-27页 |
| ·冠状病毒加帽机制预测 | 第27-29页 |
| ·冠状病毒非结构蛋白NSP14及其N7-甲基转移酶活性研究 | 第29-32页 |
| ·冠状病毒非结构蛋白NSP16及其核糖2’-O-甲基转移酶活性研究 | 第32-38页 |
| 3 冠状病毒核糖核酸外切酶的研究进展 | 第38-48页 |
| ·核糖核酸外切酶的分类 | 第38-44页 |
| ·冠状病毒NSP14的核酸外切酶活性 | 第44-48页 |
| 4 冠状病毒非结构蛋白NSP14的结构功能关系研究 | 第48-96页 |
| ·研究项目概述 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-55页 |
| ·实验仪器 | 第48-49页 |
| ·菌种及质粒 | 第49页 |
| ·实验中需要配置的培养基和溶液 | 第49-54页 |
| ·工具酶、试剂盒及试剂 | 第54-55页 |
| ·实验方法及原理 | 第55-80页 |
| ·点突变/截短突变引物设计 | 第55-66页 |
| ·突变蛋白表达质粒的构建 | 第66-69页 |
| ·酵母菌的转化和筛选 | 第69-71页 |
| ·突变蛋白的表达纯化 | 第71-73页 |
| ·RNA底物的合成 | 第73-75页 |
| ·RNA帽子结构前体的合成 | 第75-76页 |
| ·N7-甲基转移酶生化活性检测 | 第76-78页 |
| ·外切核酸酶生化活性检测 | 第78-79页 |
| ·SAM结合实验 | 第79页 |
| ·3D结构同源模建 | 第79-80页 |
| ·实验结果及讨论 | 第80-96页 |
| ·N7-甲基转移酶和外切核酸酶的活性依赖于非结构蛋白nsp14结构的完整性 | 第80-83页 |
| ·N7-甲基转移酶关键氨基酸位点的全基因筛查 | 第83-86页 |
| ·N7-甲基转移酶关键氨基酸的体外生化活性分析 | 第86-91页 |
| ·非结构蛋白nsp14的SAM结合/催化功能域结构功能研究 | 第91-93页 |
| ·非结构蛋白nsp14的N7-甲基转移酶3D建模及其结构功能关系分析 | 第93-96页 |
| 5 研究总结与讨论 | 第96-100页 |
| 参考文献 | 第100-105页 |
| 博士期间发表论文 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106页 |
