| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-42页 |
| ·高等植物胚胎发生 | 第19-25页 |
| ·胚胎的模式建成 | 第19-22页 |
| ·胚柄的进化与功能 | 第22-25页 |
| ·印迹基因与植物胚胎发生 | 第25-32页 |
| ·基因组印迹以及亲本冲突学说 | 第26-27页 |
| ·印迹基因的评判标准 | 第27页 |
| ·印迹基因在种子发育中的分子和细胞学功能 | 第27-29页 |
| ·基因组印迹的调控 | 第29-32页 |
| ·杂种优势及其调控机制 | 第32-40页 |
| ·植物中的杂种优势及应用 | 第32-34页 |
| ·杂种优势的调控机制 | 第34-40页 |
| ·本论文研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 2 远缘杂种中亲本起源基因在早期胚胎发生中的表达 | 第42-65页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第43-44页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·实验方法与步骤 | 第44-48页 |
| ·胚珠培养 | 第44页 |
| ·杂种的获得 | 第44页 |
| ·透明观察 | 第44-45页 |
| ·花粉管生长过程的观察 | 第45页 |
| ·精细胞,合子和8胞胚的收集 | 第45-46页 |
| ·精细胞,合子和8胞胚的cDNA的扩增 | 第46页 |
| ·带有SSR位点的EST的收集 | 第46页 |
| ·SR1和蛤蟆烟之间多态性的检测 | 第46-48页 |
| ·实验结果 | 第48-62页 |
| ·杂交亲本的筛选 | 第48-50页 |
| ·SR1与蛤蟆烟杂交实验 | 第50-54页 |
| ·蛤蟆烟与SR1杂交实验 | 第54-58页 |
| ·SR1、蛤蟆烟和杂种精子,合子和8胞胚的分离、收集与cDNA Pool的制备 | 第58-59页 |
| ·烟草EST序列的获得及其PCR鉴定 | 第59-60页 |
| ·杂种胚胎发育早期存在的转录本的亲本来源的鉴定 | 第60-61页 |
| ·父本基因参与远缘杂种早期胚胎发育的细胞学证据 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| ·父本转录本参与了远缘杂种的合子发育 | 第62-63页 |
| ·父母本来源的转录本在早期胚胎发生中的不同贡献 | 第63-65页 |
| 3 烟草潜在父本印迹基因的克隆和初步分析 | 第65-92页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第65-67页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·主要仪器 | 第66-67页 |
| ·实验方法与步骤 | 第67-76页 |
| ·EB30基因CDS区段的验证 | 第67-69页 |
| ·烟草Genome walking文库的构建 | 第69-70页 |
| ·EB30基因启动子序列的获得 | 第70页 |
| ·RNAi载体、GFP融合蛋白载体的构建 | 第70-72页 |
| ·转基因烟草的获得及其鉴定 | 第72-73页 |
| ·RNA的提取 | 第73-75页 |
| ·定量PCR | 第75页 |
| ·数据处理 | 第75-76页 |
| ·实验结果 | 第76-90页 |
| ·EB30基因在烟草SR1中的验证 | 第76页 |
| ·烟草Genome Wlaking文库的构建 | 第76页 |
| ·转录调控区和CDS的克隆及其验证 | 第76-78页 |
| ·EB30基因的生物信息学分析 | 第78-80页 |
| ·定量PCR分析EB30基因表达模式 | 第80页 |
| ·EB30蛋白亚细胞定位分析 | 第80-82页 |
| ·EB30基因早期胚胎发生时期父母本等位基因的表达检测 | 第82-83页 |
| ·RNAi转基因植株表型分析 | 第83-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 4 母本起源基因在烟草胚柄发育中的作用 | 第92-111页 |
| ·材料,试剂及仪器 | 第93-95页 |
| ·材料 | 第93页 |
| ·试剂 | 第93页 |
| ·主要仪器 | 第93-95页 |
| ·实验方法与步骤 | 第95-96页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第95页 |
| ·NtCYS基因同源序列的获得及其鉴定 | 第95页 |
| ·胚柄TUNEL信号的检测和DAPI染色 | 第95-96页 |
| ·半定量PCR和定量PCR | 第96页 |
| ·实验结果 | 第96-109页 |
| ·SR1雌雄配子和合子中NtCYS基因的表达模式 | 第96-97页 |
| ·红花烟草中NtCYS同源基因的搜寻 | 第97-98页 |
| ·KY14与SR1正反交杂种2胞原胚cDNAPool的构建及其均一化 | 第98-100页 |
| ·NtCYS基因在种内杂种的早期胚胎发生中的相对表达 | 第100-101页 |
| ·蛤蟆烟中NtCYS同源基因的搜寻 | 第101-102页 |
| ·NtCYS等位基因在远缘杂种早期胚胎发生中的表达模式 | 第102-103页 |
| ·亲本和远缘杂种胚柄的细胞程序性死亡的细胞学比较 | 第103-108页 |
| ·远缘杂种中母本转录本对胚柄细胞增殖的调控 | 第108-109页 |
| ·讨论 | 第109-111页 |
| ·NtCYS的母本转录本调控着杂种胚柄的细胞程序性死亡 | 第109-110页 |
| ·母本遗传信息在远缘杂种胚柄发育中的作用 | 第110-111页 |
| 5 总结 | 第111-114页 |
| ·父母本转录本在远缘杂种早期胚胎发生中的角色 | 第111-112页 |
| ·远缘杂种早期胚胎发生中母本起源基因对胚柄发育的影响 | 第112-113页 |
| ·印迹基因研究中的得失与经验 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-129页 |
| 在读期间发表的论文 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
