摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第9-15页 |
·立题意义 | 第9-10页 |
·国内外研究进展 | 第10-14页 |
·根霉脂肪酶简介 | 第10-11页 |
·外源基因在巴斯德毕赤酵母中的表达及所出现的关键问题 | 第11-12页 |
·共表达伴侣蛋白对外源蛋白表达的影响 | 第12页 |
·基因拷贝数对外源蛋白表达的影响 | 第12-13页 |
·氮源对外源蛋白表达的影响 | 第13页 |
·碳源对外源蛋白表达的影响 | 第13-14页 |
·酶的稳定性研究进展 | 第14页 |
·课题研究思路和内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
·菌种 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·主要试剂与仪器 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-23页 |
·培养方法 | 第16-17页 |
·甲醇浓度检测 | 第17页 |
·生物量测定 | 第17页 |
·脂肪酶水解活力的测定 | 第17-18页 |
·总蛋白含量的测定 | 第18页 |
·蛋白酶活力测定 | 第18页 |
·游离氨离子浓度的测定 | 第18-19页 |
·ATP 能量物质测定 | 第19-20页 |
·醇氧化酶、甲醛脱氢酶、甲酸脱氢酶的活性测定 | 第20-21页 |
·表达产物 SDS-PAGE 分析 | 第21页 |
·半衰期 t1/2 的测定 | 第21-22页 |
·相对酶活的测定 | 第22页 |
·固体酶粉的制备 | 第22-23页 |
第三章 结果与讨论 | 第23-48页 |
·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对米根霉脂肪酶表达的影响 | 第23-28页 |
·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对产酶和菌体生长的影响 | 第23-25页 |
·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对发酵过程的影响分析 | 第25-26页 |
·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白影响外源蛋白表达的机理分析 | 第26-28页 |
·拷贝数对米根霉脂肪酶表达的影响 | 第28-32页 |
·拷贝数对产酶和细胞生长的影响 | 第28-30页 |
·拷贝数对发酵过程的影响分析 | 第30-32页 |
·氮源对米根霉脂肪酶表达的影响 | 第32-37页 |
·氮源对产酶和菌体生长的影响 | 第32-34页 |
·氮源对发酵过程的影响分析 | 第34-36页 |
·氮源对胞内关键酶活性的影响与分析 | 第36-37页 |
·碳源对米根霉脂肪酶表达的影响 | 第37-41页 |
·碳源对产酶和菌体生长的影响 | 第37-39页 |
·碳源对发酵过程的影响分析 | 第39-40页 |
·碳源对胞内关键酶活性的影响与分析 | 第40-41页 |
·小分子添加剂对米根霉脂肪酶酶稳定性的影响 | 第41-48页 |
·液体酶稳定性研究 | 第41-44页 |
·固体酶稳定性研究 | 第44-48页 |
主要结论及展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |