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重组毕赤酵母表达米根霉(Rhizopus oryzae)脂肪酶的发酵调控及酶稳定性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-9页
第一章 绪论第9-15页
   ·立题意义第9-10页
   ·国内外研究进展第10-14页
     ·根霉脂肪酶简介第10-11页
     ·外源基因在巴斯德毕赤酵母中的表达及所出现的关键问题第11-12页
     ·共表达伴侣蛋白对外源蛋白表达的影响第12页
     ·基因拷贝数对外源蛋白表达的影响第12-13页
     ·氮源对外源蛋白表达的影响第13页
     ·碳源对外源蛋白表达的影响第13-14页
     ·酶的稳定性研究进展第14页
   ·课题研究思路和内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-23页
   ·菌种第15页
   ·培养基第15页
   ·主要试剂与仪器第15-16页
   ·实验方法第16-23页
     ·培养方法第16-17页
     ·甲醇浓度检测第17页
     ·生物量测定第17页
     ·脂肪酶水解活力的测定第17-18页
     ·总蛋白含量的测定第18页
     ·蛋白酶活力测定第18页
     ·游离氨离子浓度的测定第18-19页
     ·ATP 能量物质测定第19-20页
     ·醇氧化酶、甲醛脱氢酶、甲酸脱氢酶的活性测定第20-21页
     ·表达产物 SDS-PAGE 分析第21页
     ·半衰期 t1/2 的测定第21-22页
     ·相对酶活的测定第22页
     ·固体酶粉的制备第22-23页
第三章 结果与讨论第23-48页
   ·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对米根霉脂肪酶表达的影响第23-28页
     ·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对产酶和菌体生长的影响第23-25页
     ·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白对发酵过程的影响分析第25-26页
     ·巴斯德毕赤酵母共表达伴侣蛋白影响外源蛋白表达的机理分析第26-28页
   ·拷贝数对米根霉脂肪酶表达的影响第28-32页
     ·拷贝数对产酶和细胞生长的影响第28-30页
     ·拷贝数对发酵过程的影响分析第30-32页
   ·氮源对米根霉脂肪酶表达的影响第32-37页
     ·氮源对产酶和菌体生长的影响第32-34页
     ·氮源对发酵过程的影响分析第34-36页
     ·氮源对胞内关键酶活性的影响与分析第36-37页
   ·碳源对米根霉脂肪酶表达的影响第37-41页
     ·碳源对产酶和菌体生长的影响第37-39页
     ·碳源对发酵过程的影响分析第39-40页
     ·碳源对胞内关键酶活性的影响与分析第40-41页
   ·小分子添加剂对米根霉脂肪酶酶稳定性的影响第41-48页
     ·液体酶稳定性研究第41-44页
     ·固体酶稳定性研究第44-48页
主要结论及展望第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-55页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第55页

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