| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 转基因猪的主要生产方法 | 第14-16页 |
| 2 细胞分离培养技术简介 | 第16-17页 |
| 3 体细胞转染方法简介 | 第17-19页 |
| 4 常用的标记基因——绿色荧光蛋白 | 第19-20页 |
| 5 结语 | 第20-21页 |
| 引言 | 第21-23页 |
| 1 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·溶液配制与分子试剂 | 第23-24页 |
| ·引物合成和 DN A 测序 | 第24页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-39页 |
| ·梅山猪胎儿成纤维细胞和六白猪耳缘成纤维细胞原代培养 | 第25页 |
| ·六白猪耳缘成纤维细胞原代培养先胰蛋白酶消化组织块培养后再冻存 | 第25-26页 |
| ·成纤维细胞传代培养 | 第26页 |
| ·成纤维细胞冷冻保存 | 第26页 |
| ·成纤维细胞解冻复苏 | 第26页 |
| ·利用血球计数板和细胞计数器进行细胞计数 | 第26-27页 |
| ·生长曲线绘制 | 第27页 |
| ·质粒的制备 | 第27-30页 |
| ·梅山猪成纤维细胞 G418 耐受分析实验步骤 | 第30页 |
| ·脂质体转染梅山猪成纤维细胞 | 第30-34页 |
| ·电击转染条件的优化 | 第34-35页 |
| ·成纤维细胞转染后筛选 | 第35-36页 |
| ·转基因猪成纤维细胞系 P CR 鉴定 | 第36-37页 |
| ·转基因克隆猪的检测 | 第37-39页 |
| 2 结果 | 第39-47页 |
| ·六白猪成纤维细胞观察结果 | 第39-40页 |
| ·梅山猪成纤维细胞观察结果 | 第40-41页 |
| ·细胞生长曲线 | 第41-42页 |
| ·pEGFP-N1 质粒图和菌液PCR结果鉴定图 | 第42页 |
| ·分光光度计检测质粒浓度和OD值 | 第42页 |
| ·G418耐受分析实验 | 第42页 |
| ·LipefectamineTM2000转染猪成纤维细胞条件的探索 | 第42-44页 |
| ·不同梅山猪转基因情况的研究 | 第44-45页 |
| ·梅山猪成纤维细胞质粒pEGFP-N1和DsRed共转 | 第45页 |
| ·电击转染梅山猪成纤维细胞 | 第45-46页 |
| ·转基因猪成纤维细胞系P CR 鉴定 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-51页 |
| ·关于组织块培养法和胰蛋白酶消化再培养法 | 第47页 |
| ·关于组织块培养法和组织块冻存再培养法 | 第47页 |
| ·关于胰蛋白酶冷消化和胰蛋白酶热消化法 | 第47-48页 |
| ·关于梅山猪和六白猪体外增殖能力 | 第48页 |
| ·梅山猪成纤维细胞对G418的耐受分析 | 第48页 |
| ·梅山猪成纤维细胞脂质体转染条件的优化 | 第48-49页 |
| ·克隆猪转基因检测结果分析 | 第49页 |
| ·电穿孔转染细胞的条件研究 | 第49-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 个人简介 | 第58页 |
