| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第12-27页 |
| ·超氧化物歧化酶的研究进展 | 第12-23页 |
| ·超氧化物歧化酶的发现与分类 | 第12-14页 |
| ·超氧化物歧化酶的结构和理化特性 | 第14-17页 |
| ·超氧化物歧化酶的结构 | 第14-16页 |
| ·超氧化物歧化酶的理化特性 | 第16-17页 |
| ·超氧化物歧化酶是亲水性的蛋白质 | 第16页 |
| ·超氧化物歧化酶的吸收光谱特性 | 第16页 |
| ·超氧化物歧化酶对氰化物和H_2O_2的敏感性 | 第16页 |
| ·超氧化物歧化酶稳定性及影响因素 | 第16-17页 |
| ·超氧化物歧化酶基因的克隆和表达 | 第17-21页 |
| ·超氧化物歧化酶的应用 | 第21-23页 |
| ·超氧化物歧化酶在医学中的应用 | 第21页 |
| ·超氧化物歧化酶在食品工业中的应用 | 第21-22页 |
| ·超氧化物歧化酶在化妆品领域中的应用 | 第22页 |
| ·超氧化物歧化酶与转基因植物 | 第22-23页 |
| ·水稻转基因研究进展 | 第23-25页 |
| ·选题的目的意义、研究内容和技术路线 | 第25-27页 |
| ·目的意义 | 第25-26页 |
| ·研究内容 | 第26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-57页 |
| ·材料与方法 | 第27-34页 |
| ·材料 | 第27-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·酶和生化试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·溶液配制 | 第29-34页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)zjmnsod及嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascusaurantiacus var.levisporus) esjmnsod基因的克隆 | 第34-38页 |
| ·PCR引物设计 | 第34页 |
| ·总RNA的提取(Trizol法) | 第34-35页 |
| ·紫外检测RNA产率和纯度 | 第35页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第35页 |
| ·PCR扩增Mnsod基因 | 第35-36页 |
| ·琼脂糖凝胶纯化特异DNA片断 | 第36页 |
| ·与载体连接 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第37页 |
| ·大肠杆菌感受态的转化 | 第37-38页 |
| ·菌落PCR检测 | 第38页 |
| ·序列测定 | 第38页 |
| ·sod基因在烟草中的转化及抗盐性研究 | 第38-50页 |
| ·转烟草表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·提取质粒 | 第39-40页 |
| ·质粒DNA的双酶切鉴定 | 第40页 |
| ·转化农杆菌(LBA4404) | 第40-42页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·DNA直接转化农杆菌 | 第41-42页 |
| ·重组农杆菌鉴定 | 第42页 |
| ·农杆菌介导的烟草基因转化 | 第42-43页 |
| ·外植体的侵染及共培养 | 第42-43页 |
| ·选择培养 | 第43页 |
| ·继代培养 | 第43页 |
| ·生根培养 | 第43页 |
| ·移栽 | 第43页 |
| ·转基因烟草植株的分子生物学检测 | 第43-50页 |
| ·烟草基因组提取 | 第43-44页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第44-45页 |
| ·转基因植株的Southern杂交分析 | 第45-48页 |
| ·转基因烟草植株RT-PCR检测 | 第48页 |
| ·SOD活性的测定 | 第48-49页 |
| ·转基因烟草的抗病性检测 | 第49页 |
| ·转基因烟草的抗盐性分析 | 第49-50页 |
| ·高盐处理下转基因烟草种子萌发实验 | 第49页 |
| ·高盐处理下转基因烟草的根伸长抑制实验 | 第49-50页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌和嗜热子囊菌光孢变种SOD基因在水稻的转化 | 第50-57页 |
| ·目的基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌目的基因的克隆 | 第50页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种目的基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·水稻表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·转化农杆菌(EHA105) | 第52-53页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第52页 |
| ·DNA直接转化农杆菌 | 第52-53页 |
| ·重组农杆菌鉴定 | 第53-54页 |
| ·农杆菌侵染植株 | 第54-57页 |
| ·愈伤诱导 | 第54页 |
| ·愈伤继代 | 第54页 |
| ·预培养 | 第54页 |
| ·农杆菌准备 | 第54页 |
| ·农杆菌悬浮培养准备 | 第54-55页 |
| ·农杆菌侵染(共培养) | 第55页 |
| ·水洗和筛选 | 第55页 |
| ·预分化与分化 | 第55页 |
| ·生根 | 第55-56页 |
| ·移栽 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-94页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod和嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod基因的克隆 | 第57-68页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod的克隆 | 第57-64页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌总RNA的提取 | 第57页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌MnSOD基因(zjmnsod)的克隆 | 第57-59页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌MnSOD基因的核苷酸和氨基酸序列分析 | 第59-64页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod的克隆 | 第64-68页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种总RNA的提取 | 第64页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种Mn-SOD基因(esjmnsod)的克隆 | 第64-66页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种SOD基因(esjmnsod)的核苷酸和氨基酸序列分析 | 第66-68页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod和嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod基因在烟草中的转化及抗盐性分析 | 第68-87页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod基因在烟草中的转化及抗盐性分析 | 第69-78页 |
| ·烟草表达载体(pROK Ⅱ/zjmnsod)的构建 | 第69-70页 |
| ·转化农杆菌 | 第70-71页 |
| ·LBA4404(pROK Ⅱ/zjmnsod)介导的转化烟草 | 第71-72页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第72-74页 |
| ·PCR检测与测序 | 第72-73页 |
| ·转zjmnsod基因烟草植株RT-PCR检测 | 第73-74页 |
| ·转zjmnsod基因烟草与非转基因烟草SOD含量的测定 | 第74-75页 |
| ·转zjmnsod基因烟草的抗性分析 | 第75-76页 |
| ·转zjmnsod基因烟草对盐胁迫的抗性 | 第76-78页 |
| ·盐胁迫对转zjmnsod基因烟草种子萌发的影响 | 第76页 |
| ·盐胁迫对转zjmnsod基因烟草根伸长的影响 | 第76-77页 |
| ·盐胁迫下转zjmnsod基因烟草SOD活性测定 | 第77-78页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod基因在烟草中的转化及抗盐性分析 | 第78-87页 |
| ·烟草表达载体(pROK Ⅱ/esjmnsod)的构建 | 第78-80页 |
| ·转化农杆菌 | 第80页 |
| ·LBA4404(pROK Ⅱ/esjmnsod)介导的转化烟草 | 第80-81页 |
| ·转基因烟草的分子检测 | 第81-83页 |
| ·PCR检测与测序 | 第81-82页 |
| ·转esjmnsod基因烟草植株RT-PCR检测 | 第82-83页 |
| ·转esjmnsod基因烟草与非转基因烟草SOD含量的测定 | 第83-84页 |
| ·转esjmnsod基因烟草的抗性分析 | 第84页 |
| ·转esjmnsod基因烟草对盐胁迫的抗性 | 第84-87页 |
| ·盐胁迫对转esjmnsod基因烟草种子萌发的影响 | 第84-85页 |
| ·盐胁迫对转esjmnsod基因烟草根伸长的影响 | 第85-86页 |
| ·盐胁迫下转esjmnsod基因烟草SOD活性测定 | 第86-87页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod基因在水稻中的转化 | 第87-94页 |
| ·疏绵状嗜热丝孢菌zjmnsod基因在水稻中的转化 | 第87-90页 |
| ·水稻表达载体(pU1301/zjmnsod)的构建 | 第87-89页 |
| ·转化农杆菌(EHA105) | 第89页 |
| ·EHA105(pU1301/zjmnsod)转化水稻 | 第89-90页 |
| ·嗜热子囊菌光孢变种esjmnsod基因在水稻中的转化 | 第90-94页 |
| ·水稻表达载体(pU1301/esjmnsod)的构建 | 第90-92页 |
| ·转化农杆菌(EHA105) | 第92页 |
| ·EHA105(pU1301/esjmnsod)转化水稻 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-98页 |
| ·自由基、活性氧对植物的伤害 | 第94-95页 |
| ·野生型与转嗜热真菌sod基因烟草对盐胁迫抗性的比较 | 第95-96页 |
| ·野生型与转sod基因烟草抗病性比较 | 第96页 |
| ·转基因烟草的研究方法 | 第96-97页 |
| ·嗜热真菌sod基因在水稻中的转化 | 第97-98页 |
| 5 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
