干扰素α-2b的氮端聚乙二醇选择性修饰方法研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-24页 |
| ·聚乙二醇(PEG)性质 | 第12页 |
| ·聚乙二醇化应用 | 第12-14页 |
| ·聚乙二醇化修饰技术 | 第14-17页 |
| ·对氨基的修饰 | 第15-16页 |
| ·对巯基的修饰 | 第16页 |
| ·对羧基的修饰 | 第16-17页 |
| ·聚乙二醇修饰技术进展 | 第17-18页 |
| ·聚乙二醇修饰策略 | 第18-19页 |
| ·干扰素性质 | 第19-20页 |
| ·干扰素的作用机理 | 第20-21页 |
| ·抗病毒作用 | 第20-21页 |
| ·抑制细胞生长作用 | 第21页 |
| ·对免疫系统的调节作用 | 第21页 |
| ·干扰素应用 | 第21-22页 |
| ·病毒性疾病的治疗 | 第21页 |
| ·恶性血液病的治疗 | 第21页 |
| ·恶性肿瘤病的治疗 | 第21页 |
| ·控制炎症反应 | 第21-22页 |
| ·干扰素的应用局限性 | 第22页 |
| ·长效干扰素研究情况 | 第22-23页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 实验材料 | 第24-28页 |
| ·实验主要材料 | 第24页 |
| ·实验主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验主要试剂配制 | 第25-28页 |
| 第3章 修饰反应条件研究 | 第28-38页 |
| ·mPEG醛基修饰原理 | 第28页 |
| ·mPEG-IFN修饰分离纯化工艺 | 第28-29页 |
| ·修饰反应影响因素考察 | 第29-31页 |
| ·pH值影响考察方法 | 第29-30页 |
| ·摩尔比影响考察方法 | 第30页 |
| ·温度影响考察方法 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析方法 | 第31-33页 |
| ·制胶电泳 | 第31-32页 |
| ·电泳 | 第32页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第32页 |
| ·碘染色 | 第32-33页 |
| ·蛋白质的BCA含量检测方法 | 第33页 |
| ·待检样品 | 第33页 |
| ·标准曲线 | 第33页 |
| ·结果计算 | 第33页 |
| ·SEC分析方法 | 第33-34页 |
| ·修饰条件筛选结果 | 第34-36页 |
| ·不同pH值影响结果 | 第34页 |
| ·不同摩尔比影响结果 | 第34-35页 |
| ·反应温度影响结果 | 第35-36页 |
| ·反应条件选择结论 | 第36-37页 |
| ·SEC分析方法筛选结果 | 第37-38页 |
| 第4章 单修饰物分离纯化 | 第38-46页 |
| ·mPEG-ALD-IFN单修饰物的分离纯化方法 | 第38-39页 |
| ·离子交换填料选择 | 第38页 |
| ·缓冲液pH值考察 | 第38-39页 |
| ·洗脱梯度考察 | 第39页 |
| ·流速影响考察 | 第39页 |
| ·分离制备单修饰物结果 | 第39-45页 |
| ·离子填料考察结果 | 第39-43页 |
| ·平衡液的pH值对分离效果的影响结果 | 第43-44页 |
| ·盐离子洗脱梯度对分离效果影响结果 | 第44页 |
| ·洗脱流速影响结果 | 第44-45页 |
| ·mPEG-SC-IFN单修饰物的制备 | 第45页 |
| ·单修饰物异构体的制备方法 | 第45-46页 |
| 第5章 异构体分析方法研究 | 第46-49页 |
| ·单修饰物异构体的IEC分析方法 | 第46页 |
| ·考察盐离子梯度洗脱方法 | 第46页 |
| ·考察pH梯度洗脱方法 | 第46页 |
| ·考察盐离子和pH梯度混合洗脱方法 | 第46页 |
| ·考察流动相中有机相影响 | 第46页 |
| ·IEC分析方法结果 | 第46-49页 |
| 第6章 修饰位点结构确定 | 第49-55页 |
| ·N端修饰物的结构确定 | 第49-50页 |
| ·蛋白酶选择 | 第49-50页 |
| ·ALDI-TOF MS方法 | 第50-52页 |
| ·修饰位点结构分析结果 | 第52-55页 |
| 第7章 结果与讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
