| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-23页 |
| ·关节软骨组织损伤 | 第10-11页 |
| ·软骨组织损伤的原因 | 第10页 |
| ·软骨组织的结构 | 第10页 |
| ·软骨组织损伤的类型 | 第10-11页 |
| ·关节软骨组织损伤的临床修复 | 第11-13页 |
| ·关节镜下的修复技术 | 第11页 |
| ·骨膜/软骨膜的移植 | 第11页 |
| ·骨软骨移植 | 第11-12页 |
| ·ACI及MACI | 第12-13页 |
| ·软骨组织工程 | 第13-18页 |
| ·软骨组织工程三要素 | 第13-15页 |
| ·软骨细胞的去分化现象 | 第15-17页 |
| ·MSCs在软骨组织工程中的应用 | 第17-18页 |
| ·共培养在软骨组织工程中的应用 | 第18-21页 |
| ·共培养中软骨细胞对MSCs的诱导分化作用 | 第19-20页 |
| ·共培养中MSCs对软骨表型的维持 | 第20-21页 |
| ·本课题的提出 | 第21-23页 |
| 第2章 材料和方法 | 第23-31页 |
| ·实验设备和仪器 | 第23页 |
| ·实验材料和方法 | 第23-31页 |
| ·细胞的分离和获取 | 第23-24页 |
| ·软骨细胞传代 | 第24页 |
| ·共培养实验 | 第24-26页 |
| ·条件培养基共培养实验 | 第26页 |
| ·细胞包裹 | 第26页 |
| ·组织学染色 | 第26-27页 |
| ·Ⅱ型胶原免疫荧光染色 | 第27页 |
| ·细胞骨架染色 | 第27页 |
| ·海藻酸包裹的细胞的回收 | 第27页 |
| ·胞外基质DNA和GAG测定 | 第27-28页 |
| ·逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第28页 |
| ·死活染色 | 第28-29页 |
| ·MTT检测 | 第29页 |
| ·定量PCR(qRT-PCR) | 第29-30页 |
| ·统计学分析 | 第30-31页 |
| 第3章 兔关节软骨细胞的分离和体外传代培养 | 第31-39页 |
| ·概述 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-37页 |
| ·软骨组织的组织学鉴定 | 第31-32页 |
| ·酶消化法分离软骨细胞 | 第32页 |
| ·PO代rACs贴壁培养形态 | 第32-33页 |
| ·不同代次软骨细胞的生长曲线和PD数 | 第33-34页 |
| ·传代过程中细胞形态的变化 | 第34-35页 |
| ·软骨细胞传代过程中GAG的分泌 | 第35-36页 |
| ·rACs传代过程中基因表达 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第4章 MSCs与rACs共培养研究 | 第39-71页 |
| ·概述 | 第39-40页 |
| ·rACs(二维)与MSCs(三维)共培养(模式Ⅰ) | 第40-47页 |
| ·rACs的形态 | 第40-41页 |
| ·rACs的ECM分泌 | 第41-43页 |
| ·rACs的消化计数 | 第43-44页 |
| ·rACs的基因表达 | 第44-45页 |
| ·MSCs的GAG和DNA测定 | 第45-46页 |
| ·MSCs的MTT检测 | 第46-47页 |
| ·rACs(二维)与MSCs(二维)共培养(模式Ⅱ) | 第47-53页 |
| ·rACs的形态 | 第47-48页 |
| ·rACs的ECM分泌 | 第48-51页 |
| ·rACs的消化计数 | 第51-52页 |
| ·rACs的基因表达 | 第52-53页 |
| ·rACs的免疫荧光染色 | 第53页 |
| ·rACs(三维)与MSCs(三维)共培养(模式Ⅲ) | 第53-63页 |
| ·载rACs海藻酸凝胶微球的死活染色 | 第54-55页 |
| ·载rACs凝胶微球的组织学染色 | 第55-58页 |
| ·rACs的GAG和DNA定量测定 | 第58-59页 |
| ·微球中rACs的活性检测 | 第59页 |
| ·rACs基因表达的定量分析 | 第59-60页 |
| ·载rACs海藻酸凝胶微球切片的免疫荧光染色 | 第60-61页 |
| ·MSCs的GAG和DNA定量测定 | 第61-62页 |
| ·MSCs的细胞活性检测 | 第62页 |
| ·MSCs的定量基因表达情况 | 第62-63页 |
| ·rACs(三维)与MSCs(二维)共培养(模式Ⅳ) | 第63-67页 |
| ·载rACs海藻酸凝胶微球的死活染色 | 第63-64页 |
| ·rACs的GAG和DNA定量测定 | 第64-65页 |
| ·rACs的MTT检测 | 第65页 |
| ·rACs基因表达的定量分析 | 第65-66页 |
| ·MSCs的基因表达分析 | 第66-67页 |
| ·条件培养基共培养实验 | 第67-69页 |
| ·条件培养基培养1d的rACs鬼笔环肽染色 | 第67-68页 |
| ·条件培养基培养6d的rACs鬼笔环肽染色 | 第68-69页 |
| ·MSCs条件培养基与rACs共培养6d番红-O染色 | 第69页 |
| ·本章小结 | 第69-71页 |
| 第5章 全文总结和展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
