| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-22页 |
| ·FXR的分布和结构 | 第11页 |
| ·FXR调节剂 | 第11-12页 |
| ·FXR激动剂 | 第11-12页 |
| ·FXR拮抗剂 | 第12页 |
| ·FXR参与胆汁酸、胆固醇、甘油三酯以及葡萄糖的稳态调节 | 第12-16页 |
| ·FXR与胆汁酸稳态调节 | 第12-13页 |
| ·FXR与胆固醇稳态调节 | 第13-14页 |
| ·FXR与甘油三酯代谢 | 第14-15页 |
| ·FXR与葡萄糖代谢 | 第15-16页 |
| ·FXR与肝糖异生调节 | 第15页 |
| ·FXR与肝糖原合成调节 | 第15-16页 |
| ·FXR对胰岛素敏感性的调节 | 第16页 |
| ·FXR与代谢性疾病 | 第16-18页 |
| ·FXR与胆汁酸淤积 | 第16页 |
| ·FXR与动脉粥样硬化 | 第16-17页 |
| ·FXR与胆固醇结石 | 第17页 |
| ·FXR与糖尿病 | 第17页 |
| ·FXR与肠道疾病 | 第17-18页 |
| ·FXR配体筛选方法 | 第18-21页 |
| ·虚拟筛选 | 第18页 |
| ·分子水平筛选 | 第18-20页 |
| ·表面等离子共振技术(surface plasmon resonance) | 第18-19页 |
| ·荧光淬灭分析 | 第19页 |
| ·均相时间分辨荧光(homogeneous time-resolved fluorescence) | 第19页 |
| ·荧光偏振技术 | 第19-20页 |
| ·细胞水平筛选 | 第20-21页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第20页 |
| ·哺乳动物转录激活 | 第20页 |
| ·哺乳动物单杂交 | 第20-21页 |
| ·FXR核受体研究前景 | 第21-22页 |
| 第2章 FXR拮抗剂12u的发现及其功能研究 | 第22-40页 |
| ·引言 | 第22页 |
| ·材料和方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·GST-FXRa-LBD蛋白的表达和纯化 | 第23页 |
| ·FXRa-LBD蛋白的表达和纯化 | 第23页 |
| ·均相时间分辨荧光分析 | 第23-24页 |
| ·荧光淬灭分析 | 第24页 |
| ·差示扫描量热技术(DSC)分析 | 第24页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·哺乳动物转录激活实验 | 第24-25页 |
| ·哺乳动物单杂交实验 | 第25页 |
| ·HepG2细胞中甘油三酯和胆固醇含量的测定 | 第25页 |
| ·细胞样品中RNA的抽提和反转录 | 第25-26页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| ·实验结果 | 第26-38页 |
| ·FXR拮抗剂12u的发现 | 第26-29页 |
| ·化合物12u在细胞水平为FXR拮抗剂 | 第29-31页 |
| ·化合物12u为FXRa-LBD的配体 | 第31-32页 |
| ·化合物12u对其他核受体的选择性 | 第32-35页 |
| ·化合物12u抑制FXR下游基因的转录 | 第35-36页 |
| ·化合物12u能够拮抗CDCA诱导的SHP和BSEP的启动子活性 | 第36-37页 |
| ·化合物12u能够有效降低HepG2细胞中甘油三酯和胆固醇的含量 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第3章 化合物12u增加BAT细胞产热的机制探讨 | 第40-47页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·材料与试剂 | 第40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·BAT细胞的分化 | 第40-41页 |
| ·油红染色法检测BAT细胞的分化 | 第41页 |
| ·细胞样品中RNA的抽提和反转录 | 第41页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
| ·数据分析 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-45页 |
| ·化合物12u促进BAT细胞中产热基因mRNA的表达 | 第42-43页 |
| ·化合物12u促进BAT细胞线粒体生物合成相关基因mRNA的表达 | 第43-44页 |
| ·化合物12u促进BAT细胞的分化 | 第44页 |
| ·化合物12u增加BAT细胞产热的分子机制 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 FXR部分激动剂PD0384的发现及功能研究 | 第47-62页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·材料与试剂 | 第47页 |
| ·GST-FXRa-LBD蛋白的表达和纯化 | 第47-48页 |
| ·FXRa-LBD蛋白的表达和纯化 | 第48页 |
| ·均相时间分辨荧光分析 | 第48-49页 |
| ·荧光淬灭分析 | 第49页 |
| ·细胞培养 | 第49页 |
| ·哺乳动物转录激活实验 | 第49页 |
| ·哺乳动物单杂交实验 | 第49页 |
| ·BAT细胞的分化 | 第49-50页 |
| ·细胞样品中RNA的抽提和反转录 | 第50页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第50页 |
| ·数据分析 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-60页 |
| ·PD0384为FXRα-LBD的配体 | 第50-51页 |
| ·化合物PD0384为FXR拮抗剂 | 第51-52页 |
| ·PD0384在细胞水平上表现为FXR的激动剂 | 第52-53页 |
| ·化合物PD0384对其他核受体的选择性 | 第53-56页 |
| ·化合物PD0384对FXR下游基因的影响 | 第56-57页 |
| ·化合物PD0384对SHP和BSEP启动子的影响 | 第57-58页 |
| ·化合物PD0384可以增强分化的BAT细胞中相关产热基因的表达 | 第58-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第5章 总结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 发表论文情况 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
