| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第11-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-38页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的概述 | 第12-21页 |
| ·病原学 | 第12-14页 |
| ·流行病学 | 第14页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的诊断 | 第14-20页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的防制 | 第20-21页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子的研究进展 | 第21-27页 |
| ·外毒素 | 第21-23页 |
| ·荚膜 | 第23-24页 |
| ·脂多糖 | 第24页 |
| ·外膜蛋白 | 第24-25页 |
| ·转铁结合蛋白 | 第25页 |
| ·脲酶 | 第25-26页 |
| ·蛋白酶 | 第26页 |
| ·黏附因子 | 第26-27页 |
| ·病原菌基因功能研究方法进展 | 第27-38页 |
| ·自然突变 | 第27页 |
| ·化学诱变技术 | 第27-28页 |
| ·转座子突变 | 第28-29页 |
| ·同源重组 | 第29-30页 |
| ·STM | 第30-31页 |
| ·SCOTS | 第31-32页 |
| ·DFI | 第32-33页 |
| ·IVET | 第33-34页 |
| ·IVIAT | 第34-38页 |
| 第2章 胸膜肺炎放线杆菌血清3型JL03株全基因组测序与初步拼接 | 第38-46页 |
| ·研究目的及意义 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第39-41页 |
| ·菌株 | 第39-40页 |
| ·寡核甘酸引物 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·细菌的增殖 | 第41页 |
| ·琼脂糖扩散实验 | 第41页 |
| ·细菌基因组提取及测序文库构建 | 第41-42页 |
| ·文库测序 | 第42页 |
| ·序列初步拼接 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·测序用基因组鉴定 | 第42-43页 |
| ·文库构建、质量评估及大规模测序 | 第43-44页 |
| ·序列初步拼接 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| 第3章 胸膜肺炎放线杆菌flp操纵子的结构分析 | 第46-57页 |
| ·研究目的及意义 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·菌株 | 第46-47页 |
| ·寡核甘酸引物 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·细菌的增殖 | 第48页 |
| ·细菌PCR模板制备 | 第48页 |
| ·PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·flp操纵子结构分析 | 第49页 |
| ·细菌RNA提取 | 第49-50页 |
| ·反转录PCR | 第50页 |
| ·透射电镜实验 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·flp操纵子结构分析及序列比较 | 第50-53页 |
| ·flp操纵子完整性的验证(DNA和RNA水平) | 第53-55页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌Flp菌毛检测 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第56-57页 |
| 第4章 胸膜肺炎放线杆菌血清1型4074株tadA缺失突变体构建 | 第57-72页 |
| ·研究目的及意义 | 第57页 |
| ·实验材料 | 第57-60页 |
| ·菌株和质粒 | 第57-58页 |
| ·寡核甘酸引物 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58-59页 |
| ·主要试剂 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·细菌的增殖 | 第60页 |
| ·细菌PCR模板制备 | 第60页 |
| ·PCR扩增 | 第60-61页 |
| ·限制性酶切 | 第61页 |
| ·从凝胶中回收目的片段 | 第61页 |
| ·DNA片断的连接 | 第61页 |
| ·感受态的制备及转化 | 第61-62页 |
| ·碱裂解法小量制备质粒DNA | 第62页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌电转感受态细胞的制备及转化 | 第62-63页 |
| ·接合转移与胸膜肺炎放线杆菌缺失株的构建 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-70页 |
| ·重组自杀质粒pBIISK(+)LRscm构建 | 第63-66页 |
| ·重组自杀质粒pBIISK(+)LRscm电转化APP及缺失菌株筛选 | 第66-67页 |
| ·重组自杀质粒pEMOC2LR构建 | 第67-68页 |
| ·重组自杀质粒pEMOC2LR电转化APP及缺失菌株筛选 | 第68-69页 |
| ·结合转移转化pEMOC2LR进入APP及缺失菌株筛选 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-71页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87页 |
