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胸膜肺炎放线杆菌的STM突变体库的构建及luxS基因的结构与功能研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 文献综述第12-28页
   ·猪传染性胸膜肺炎概述第12-16页
     ·猪传染性胸膜肺炎的危害第12页
     ·猪传染性胸膜肺炎的病原学第12-13页
     ·胸膜肺炎放线杆菌的致病机理研究进展第13-16页
   ·STM技术概述第16-19页
     ·STM技术原理第16-18页
     ·STM技术的应用第18-19页
   ·luxS基因的功能概述第19-28页
     ·细菌的群体感应机制第19-20页
     ·AI-2型群体感应机制第20-22页
     ·LuxS在AI-2生物合成中的作用第22-24页
     ·AI-2分子的结构第24页
     ·LuxS的功能基序第24-25页
     ·LuxS/AI-2的功能研究进展第25-28页
第二章 膜肺炎放线杆菌STM突变体库的构建第28-38页
   ·目的及意义第28页
   ·材料与方法第28-32页
     ·菌株、质粒及培养条件第28页
     ·酶和试剂第28-30页
     ·PCR引物第30页
     ·含有Tag的质粒的提取和转化第30-31页
     ·Mating法筛选突变体第31-32页
     ·突变体的鉴定第32页
     ·突变体库的保存第32页
   ·结果与分析第32-34页
     ·含有Tag质粒的提取和转化鉴定第32-33页
     ·突变体的构建和筛选鉴定第33页
     ·分别含有四个Tag的突变体库的构建和保存结果第33-34页
     ·突变体库的质量分析第34页
   ·讨论第34-36页
   ·结论第36-38页
第三章 胸膜肺炎放线杆菌luxS基因的结构与功能研究第38-66页
   ·目的与意义第38-39页
   ·材料和方法第39-48页
     ·菌株、质粒、培养条件及PCR引物第39页
     ·酶和试剂第39-42页
     ·luxS基因的分析与克隆第42-44页
     ·AI-2活性试验第44页
     ·RNA的提取及RT-PCR方法第44-46页
     ·荧光定量PCR方法第46页
     ·luxS基因缺失突变体的构建第46-47页
     ·luxS基因互补菌株的构建第47页
     ·细菌生长特性检测第47页
     ·细菌生物被膜定性检测第47页
     ·细菌生物被膜定量检测第47-48页
     ·细菌对小鼠的LD_(50)检测第48页
     ·细菌对小鼠的体内定植检测第48页
     ·细菌体外溶血活性检测第48页
   ·结果与分析第48-55页
     ·luxS基因在APP4074基因组中的分析第48-49页
     ·APP4074的luxS基因克隆鉴定第49-50页
     ·APP4074及克隆菌株DH5α的AI-2分子活性测定第50页
     ·luxS基因缺失突变体的构建及鉴定第50-52页
     ·luxS基因互补菌株的构建及鉴定第52页
     ·luxS基因缺失对APP4074的AI-2分子活性的影响第52页
     ·luxS基因缺失对APP4074生长的影响第52-53页
     ·luxS基因缺失对APP4074生物被膜形成的影响第53-54页
     ·luxS基因缺失对APP4074毒力的影响第54-55页
   ·讨论第55-65页
   ·结论第65-66页
参考文献第66-80页
致谢第80页

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