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不同传毒能力灰飞虱群体的mRNA差异分析

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
1 前言第8-21页
   ·水稻条纹叶枯病的研究状况第8-12页
     ·水稻条纹病毒的形态特征第8页
     ·水稻条纹叶枯病的流行及其造成的损失第8-10页
     ·寄主范围第10页
     ·病毒对介体昆虫的影响第10页
     ·RSV的传播介体及其传毒特性第10-11页
     ·水稻条纹叶枯病的防治第11-12页
   ·植物病毒及其介体的互作机制第12-14页
   ·mRNA差异显示技术及其应用第14-19页
     ·mRNA技术的原理和试验程序第14-16页
     ·mRNA差异显示技术的优点第16页
     ·mRNA差异显示技术的缺点第16页
     ·mRNA差异显示技术的改进第16-17页
     ·mRNA差异显示技术的应用第17-19页
   ·本研究的意义第19-21页
2 材料和方法第21-29页
   ·试验材料第21页
     ·毒源第21页
     ·供试昆虫第21页
     ·水稻和小麦品种第21页
     ·试剂第21页
     ·引物第21页
     ·菌株第21页
   ·方法第21-29页
     ·高低亲和性灰飞虱群体的构建第21-22页
     ·间接ELISA检测单头灰飞虱携带RSV第22页
     ·经典法抽提灰飞虱总RNA第22-23页
     ·差异显示PCR第23-24页
       ·第一条链cDNA的合成第23页
       ·正交法优化DDRT-PCR的反应体系第23-24页
     ·PCR扩增产物的检测第24-25页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第24-25页
       ·银染第25页
     ·差异片断的回收和重扩增第25-26页
       ·差异片断的回收第25页
       ·差异片断的重扩增第25-26页
       ·重扩增产物的回收第26页
     ·斑点杂交验证差异片断真实性第26-27页
     ·差异片断的克隆第27-28页
       ·感受态细胞的制备第27页
       ·连接反应第27页
       ·转化第27-28页
       ·碱裂解法小量提取质粒及酶切鉴定第28页
     ·质粒PCR扩增第28页
     ·测序第28页
     ·序列分析第28-29页
3 结果与分析第29-48页
   ·高低亲和性灰飞虱群体的选育第29-30页
   ·RNA的提取结果与分析第30-31页
   ·正交试验结果第31-32页
   ·随机引物第32-33页
   ·反转录和差异显示第33页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染第33-35页
   ·差异片断的回收与重扩增第35页
   ·差异片断的克隆第35-37页
   ·RNA斑点杂交验证差异片断第37-38页
   ·测序结果与分析第38-43页
     ·DD2片断Blastn分析比对结果第38-39页
     ·DD3片断Blastn分析比对结果第39-40页
     ·DD4片断Blastn分析比对结果第40-41页
     ·DD5片断Blastn分析比对结果第41-43页
   ·编码蛋白结果与分析第43-48页
     ·搜索工具:BLASTx;数据库:NR库第43-45页
     ·搜索工具:TBLASTx;数据库:nr库第45-46页
     ·DD5可能编码的肽段分析第46-48页
4 讨论第48-52页
   ·RSV毒源的保存与高亲和性传毒灰飞虱的选育方法及群体建立的意义第48-49页
   ·差异片段的分析第49-50页
   ·供试材料的选择与实验技术第50-52页
     ·供试材料的选择第50页
     ·总RNA的提取第50-51页
     ·随机引物第51页
     ·反转录和PCR第51页
     ·基因全长的获得第51-52页
小结第52-53页
参考文献第53-61页
致谢第61页

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