摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 前言 | 第8-21页 |
·水稻条纹叶枯病的研究状况 | 第8-12页 |
·水稻条纹病毒的形态特征 | 第8页 |
·水稻条纹叶枯病的流行及其造成的损失 | 第8-10页 |
·寄主范围 | 第10页 |
·病毒对介体昆虫的影响 | 第10页 |
·RSV的传播介体及其传毒特性 | 第10-11页 |
·水稻条纹叶枯病的防治 | 第11-12页 |
·植物病毒及其介体的互作机制 | 第12-14页 |
·mRNA差异显示技术及其应用 | 第14-19页 |
·mRNA技术的原理和试验程序 | 第14-16页 |
·mRNA差异显示技术的优点 | 第16页 |
·mRNA差异显示技术的缺点 | 第16页 |
·mRNA差异显示技术的改进 | 第16-17页 |
·mRNA差异显示技术的应用 | 第17-19页 |
·本研究的意义 | 第19-21页 |
2 材料和方法 | 第21-29页 |
·试验材料 | 第21页 |
·毒源 | 第21页 |
·供试昆虫 | 第21页 |
·水稻和小麦品种 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·引物 | 第21页 |
·菌株 | 第21页 |
·方法 | 第21-29页 |
·高低亲和性灰飞虱群体的构建 | 第21-22页 |
·间接ELISA检测单头灰飞虱携带RSV | 第22页 |
·经典法抽提灰飞虱总RNA | 第22-23页 |
·差异显示PCR | 第23-24页 |
·第一条链cDNA的合成 | 第23页 |
·正交法优化DDRT-PCR的反应体系 | 第23-24页 |
·PCR扩增产物的检测 | 第24-25页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第24-25页 |
·银染 | 第25页 |
·差异片断的回收和重扩增 | 第25-26页 |
·差异片断的回收 | 第25页 |
·差异片断的重扩增 | 第25-26页 |
·重扩增产物的回收 | 第26页 |
·斑点杂交验证差异片断真实性 | 第26-27页 |
·差异片断的克隆 | 第27-28页 |
·感受态细胞的制备 | 第27页 |
·连接反应 | 第27页 |
·转化 | 第27-28页 |
·碱裂解法小量提取质粒及酶切鉴定 | 第28页 |
·质粒PCR扩增 | 第28页 |
·测序 | 第28页 |
·序列分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-48页 |
·高低亲和性灰飞虱群体的选育 | 第29-30页 |
·RNA的提取结果与分析 | 第30-31页 |
·正交试验结果 | 第31-32页 |
·随机引物 | 第32-33页 |
·反转录和差异显示 | 第33页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染 | 第33-35页 |
·差异片断的回收与重扩增 | 第35页 |
·差异片断的克隆 | 第35-37页 |
·RNA斑点杂交验证差异片断 | 第37-38页 |
·测序结果与分析 | 第38-43页 |
·DD2片断Blastn分析比对结果 | 第38-39页 |
·DD3片断Blastn分析比对结果 | 第39-40页 |
·DD4片断Blastn分析比对结果 | 第40-41页 |
·DD5片断Blastn分析比对结果 | 第41-43页 |
·编码蛋白结果与分析 | 第43-48页 |
·搜索工具:BLASTx;数据库:NR库 | 第43-45页 |
·搜索工具:TBLASTx;数据库:nr库 | 第45-46页 |
·DD5可能编码的肽段分析 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-52页 |
·RSV毒源的保存与高亲和性传毒灰飞虱的选育方法及群体建立的意义 | 第48-49页 |
·差异片段的分析 | 第49-50页 |
·供试材料的选择与实验技术 | 第50-52页 |
·供试材料的选择 | 第50页 |
·总RNA的提取 | 第50-51页 |
·随机引物 | 第51页 |
·反转录和PCR | 第51页 |
·基因全长的获得 | 第51-52页 |
小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61页 |