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新城疫山东分离株的分离鉴定及F、HN基因的克隆与序列分析

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-15页
英文缩略第15-16页
引言第16-37页
 1 NDV的一般生物学特性第16-18页
   ·病毒的分类与理化性质第16页
   ·NDV 的生物学活性第16-17页
   ·NDV的培养特性第17页
   ·NDV 的致病特性第17-18页
 2 NDV的基因组与结构蛋白特征第18-27页
   ·NDV 的基因组结构第18-20页
   ·NDV 的结构蛋白特征第20-27页
     ·F蛋白第20-22页
     ·HN蛋白第22-25页
     ·M蛋白第25页
     ·NP蛋白、P 蛋白和L 蛋白第25-27页
 3 NDV致病的分子基础第27-29页
 4 NDV的分子生物学诊断技术第29-32页
   ·单克隆抗体技术第29-31页
   ·核酸探针技术第31页
   ·RNA 指纹图谱第31-32页
   ·RT-PCR 技术第32页
 5 NDV的基因分型与分子流行病学第32-37页
试验一 NDV 野毒株的分离鉴定第37-43页
 1 材料与方法第37-39页
   ·材料与试剂第37页
   ·病料处理第37页
   ·空斑纯化试验第37-38页
   ·纯化病毒的扩增第38页
   ·血凝及血凝抑制试验第38页
   ·各项毒力指标的测定第38-39页
   ·外源病毒检测第39页
   ·动物回归试验第39页
 2 结果第39-41页
   ·蚀斑纯化第39-40页
   ·病毒扩增第40页
   ·血凝及血凝抑制试验第40页
   ·各项毒力指标的测定第40-41页
   ·外源病毒检测第41页
   ·动物回归试验第41页
 3 讨论第41-43页
试验二 NDV ShD-5-04 株F 基因的克隆与序列分析第43-60页
 1 材料与方法第43-51页
   ·材料第43-45页
   ·方法第45-51页
     ·NDV ShD-5-04 株病毒的扩增及浓缩第45页
     ·NDV ShD-5-04 株病毒核酸RNA 的提取(Trizol 法)第45-46页
     ·NDV F 基因的RT-PCR 扩增第46-47页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第47页
     ·PCR 产物的回收第47-48页
     ·NDV F 基因的克隆与鉴定第48-50页
     ·重组质粒的提取与鉴定第50-51页
     ·阳性质粒测序与序列分析第51页
 2 结果第51-56页
   ·F基因的RT-PCR 扩增结果第51页
   ·F基因的克隆及阳性克隆的鉴定第51-53页
   ·F基因的克隆测序及序列分析比较第53-55页
   ·同源性分析比较第55-56页
   ·对新城疫山东分离株F蛋白裂解位点区的研究第56页
   ·系统发育进化树第56页
 3 讨论第56-60页
试验三 NDV ShD-5-04 株HN 基因的克隆与序列分析第60-68页
 1 材料与方法第60-61页
   ·材料第60页
   ·方法第60-61页
     ·NDV ShD-5-04 株病毒的扩增及浓缩第60页
     ·NDV ShD-5-04 株病毒核酸RNA 的提取(Trizol 法)第60页
     ·NDV HN 基因的RT-PCR 扩增第60页
     ·PCR 产物的克隆和转化第60-61页
     ·阳性克隆的鉴定第61页
     ·核苷酸全序列的测定及分析第61页
 2 结果第61-66页
   ·HN 基因的 RT-PCR 扩增结果第61页
   ·HN 基因的克隆及阳性克隆的鉴定第61-63页
   ·HN 基因的克隆测序及序列分析比较第63-65页
   ·同源性分析比较第65-66页
   ·系统发育进化树第66页
 3 讨论第66-68页
试验四 近五年间6 株NDV 山东分离株HN 基因的克隆与序列分析第68-77页
 1 材料与方法第68-69页
   ·材料第68页
   ·方法第68-69页
     ·NDV 山东分离株病毒的扩增及浓缩第68页
     ·NDV 山东分离株病毒核酸RNA 的提取(Trizol 法)第68页
     ·NDV HN 基因的RT-PCR 扩增第68页
     ·PCR 产物的克隆和转化第68-69页
     ·阳性克隆的鉴定第69页
     ·核苷酸全序列的测定及分析第69页
 2 结果第69-75页
   ·HN 基因的 RT-PCR 扩增结果第69-70页
   ·HN 基因的克隆及阳性克隆的鉴定第70页
   ·HN 基因的克隆测序第70-72页
   ·同源性分析比较第72-75页
   ·系统发育进化树第75页
 3 讨论第75-77页
结论第77-78页
参考文献第78-89页
致谢第89-91页
攻读学位期间发表论文情况第91页

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