| 第一部分 文献综述 | 第1-23页 |
| 第一章 植物耐盐性研究进展 | 第11-16页 |
| ·盐胁迫对植物的伤害 | 第11-12页 |
| ·植物对盐胁迫的适应 | 第12-13页 |
| ·盐胁迫和细胞凋亡 | 第13页 |
| ·活性氧的来源 | 第13-14页 |
| ·活性氧信号转导途径 | 第14-16页 |
| 第二章 NADPH氧化酶研究进展 | 第16-23页 |
| ·NADPH氧化酶的结构 | 第16页 |
| ·NADPH氧化酶的功能 | 第16-19页 |
| ·在植物抗病反应中 | 第17-18页 |
| ·激活基因和依赖转录的防卫反应 | 第18页 |
| ·在植物生长中的作用 | 第18页 |
| ·传递细胞间信号的作用 | 第18-19页 |
| ·NADPH氧化酶的活性调节 | 第19-21页 |
| ·磷酸化调节 | 第19页 |
| ·ABA的调节作用 | 第19-20页 |
| ·NO的调节作用 | 第20页 |
| ·金属离子的调控作用 | 第20-21页 |
| ·G蛋白Rac的调节作用 | 第21页 |
| ·渗透调节作用 | 第21页 |
| ·乙烯和pH值的调节作用 | 第21页 |
| ·NADPH氧化酶的诱导表达 | 第21-22页 |
| ·NADPH氧化酶的抑制剂 | 第22页 |
| 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二部分 研究报告 | 第23-56页 |
| 第一章 细胞耐盐性分析及盐胁迫诱导烟草悬浮细胞活性氧的产生 | 第23-42页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·烟草(Nicotiana tabacum)悬浮细胞BY-2(Bright Yellow-2) | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| ·常用培养基和溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·MS培养基 | 第23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·悬浮细胞的培养 | 第24页 |
| ·细胞活力鉴定 | 第24页 |
| ·细胞胁迫处理 | 第24页 |
| ·细胞苔盼蓝染色 | 第24-25页 |
| ·细胞死亡计数 | 第25页 |
| ·细胞基因组提取 | 第25页 |
| ·细胞基因组电泳分析 | 第25页 |
| ·细胞鲜重和干重测量 | 第25页 |
| ·细胞DAB染色 | 第25页 |
| ·H_2O_2的测定 | 第25-26页 |
| ·细胞色素C法测NADPH氧化酶的活性 | 第26页 |
| ·RNA提取(Trizol法) | 第26-27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第27页 |
| ·RT-PCR | 第27页 |
| ·细胞DCFH-DA染色 | 第27页 |
| ·原生质体制备 | 第27-28页 |
| ·实验结果 | 第28-38页 |
| ·细胞活力鉴定 | 第28页 |
| ·盐胁迫细胞苔盼蓝染色 | 第28-29页 |
| ·盐胁迫引起细胞基因组降解 | 第29页 |
| ·盐胁迫对细胞生长的影响 | 第29-30页 |
| ·盐胁迫对细胞死亡率的影响 | 第30-31页 |
| ·盐胁迫诱导悬浮细胞H_2O_2产生的DAB染色 | 第31-32页 |
| ·显微镜观察细胞DAB染色 | 第32-33页 |
| ·抑制剂DPI对盐胁迫下H_2O_2产生的影响 | 第33页 |
| ·TRISZOL法提取细胞总RNA | 第33页 |
| ·盐胁迫下细胞NADPH氧化酶基因的表达 | 第33-34页 |
| ·盐胁迫诱导H_2O_2产生的测定 | 第34页 |
| ·细胞色素C法测NADPH氧化酶的活性 | 第34-35页 |
| ·ABA诱导悬浮细胞产生H_2O_2的DC-FH染色 | 第35页 |
| ·FDA染色鉴定原生质体活性 | 第35-36页 |
| ·ABA诱导原生质体产生H_2O_2的DC-FH染色 | 第36-37页 |
| ·ABA处理细胞死亡计数 | 第37-38页 |
| 结果： | 第38-39页 |
| 讨论： | 第39-42页 |
| 第四章 超表达NADPH氧化酶基因的烟草悬浮细胞耐盐性分析 | 第42-56页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·常用溶液配置 | 第42-44页 |
| ·碱裂解法质粒提取溶液的配制 | 第42页 |
| ·YEB培养基 | 第42页 |
| ·提膜溶液 | 第42-43页 |
| ·蛋白含量测定溶液 | 第43页 |
| ·Western所需试剂 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-48页 |
| ·含有pBI-NAO质粒的农杆菌获得 | 第44页 |
| ·农杆菌质粒提取(碱裂解法) | 第44-45页 |
| ·农杆菌质粒PCR鉴定和酶切鉴定 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的转基因 | 第45页 |
| ·转基因细胞的鉴定 | 第45页 |
| ·细胞质膜蛋白粗提 | 第45-46页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第46页 |
| ·Western-blot | 第46-47页 |
| ·细胞鲜重和干重测量 | 第47页 |
| ·MDA含量测定 | 第47页 |
| ·脯氨酸含量测定 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-54页 |
| ·含有pBI-NAO质粒的农杆菌的说明 | 第48-49页 |
| ·农杆菌质粒PCR鉴定 | 第49页 |
| ·农杆菌质粒酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·卡那板筛选抗性愈伤 | 第50页 |
| ·抗性愈伤的继代 | 第50页 |
| ·基因组DNA鉴定转基因愈伤 | 第50-51页 |
| ·Western-blot | 第51页 |
| ·细胞鲜重和干重测量 | 第51-52页 |
| ·细胞死亡计数 | 第52-53页 |
| ·转基因细胞MDA含量测定 | 第53页 |
| ·转基因细胞脯氨酸含量测定 | 第53-54页 |
| 结果 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64页 |
