摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
縮略语中英文对照表 | 第8-9页 |
插图及附表清单 | 第9-11页 |
第一章 引言 | 第11-20页 |
·概述 | 第11页 |
·布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展 | 第11-18页 |
·布鲁氏菌病病原学检测 | 第11-14页 |
·布鲁氏菌抗体检测 | 第14-18页 |
·布鲁氏菌疫苗的研究进展 | 第18-19页 |
·布鲁氏菌疫苗的应用现状 | 第18页 |
·布鲁氏菌疫苗的研究现状 | 第18-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二章 布鲁氏菌抗原的制备 | 第20-28页 |
·材料 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-23页 |
·布鲁氏菌的培养 | 第21页 |
·LPS抗原的粗提取及鉴定 | 第21-22页 |
·LPS的纯化及鉴定 | 第22-23页 |
·LPS纯化工艺重复性及质量标准的确定 | 第23页 |
·提纯的LPS的浓度测定 | 第23页 |
·结果 | 第23-27页 |
·布鲁氏菌LPS抗原的粗提取及鉴定 | 第23-24页 |
·LPS不同纯化方法的纯化效果比较 | 第24-26页 |
·LPS提纯工艺的重复性试验及质量标准的确定 | 第26页 |
·最终确定的LPS纯化工艺 | 第26页 |
·提纯LPS抗原的浓度测定 | 第26-27页 |
·讨论与小结 | 第27-28页 |
第三章 羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的建立 | 第28-46页 |
·材料 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-31页 |
·抗原最佳包被浓度和待检血清最佳稀释度的确定 | 第29页 |
·羊布鲁氏菌病iELISA相关反应条件的优化 | 第29-30页 |
·临界值的确定 | 第30页 |
·对照血清的制备 | 第30-31页 |
·结果 | 第31-44页 |
·抗原最佳包被浓度和待检血清最佳稀释度的确定 | 第31-32页 |
·羊布鲁氏菌病iELISA相关反应条件的优化 | 第32-34页 |
·临界值的确定 | 第34-43页 |
·对照血清的制备 | 第43-44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
小结 | 第45-46页 |
第四章 羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的评价 | 第46-60页 |
·材料 | 第46页 |
·试验方法 | 第46-48页 |
·敏感性试验 | 第46-47页 |
·特异性试验 | 第47页 |
·重复性试验 | 第47页 |
·稳定性试验 | 第47页 |
·符合率试验 | 第47-48页 |
·临床样品的检测 | 第48页 |
·结果 | 第48-57页 |
·敏感性试验 | 第48-50页 |
·特异性试验 | 第50-51页 |
·重复性试验 | 第51-52页 |
·稳定性试验 | 第52-55页 |
·符合率检验 | 第55-57页 |
·临床样品的检测 | 第57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
小结 | 第59-60页 |
第五章 布鲁氏菌omp28基因的克隆、表达及表达产物的鉴定 | 第60-80页 |
·材料 | 第60-61页 |
·试验方法 | 第61-67页 |
·不同种布鲁氏菌基因组的提取 | 第61页 |
·目的基因的扩增 | 第61-63页 |
·omp28基因的克隆及核酸序列/氨基酸序列比对 | 第63-65页 |
·pET32a-omp28表达载体的构建及鉴定 | 第65页 |
·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定 | 第65-66页 |
·重组蛋白的纯化 | 第66-67页 |
·结果 | 第67-78页 |
·不同种布鲁氏菌omp28基因扩增结果 | 第67页 |
·不同种布鲁氏菌重组质粒的PCR鉴定 | 第67-68页 |
·不同种布鲁氏菌的omp28基因序列、氨基酸序列比对及亲水性分析 | 第68-74页 |
·重组表达载体pET32a-omp28的构建及鉴定 | 第74-76页 |
·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定 | 第76-77页 |
·重组蛋白的纯化 | 第77-78页 |
·讨论与小结 | 第78-79页 |
小结 | 第79-80页 |
第六章 结论、创新及对下一步工作的设想 | 第80-81页 |
·结论 | 第80页 |
·创新点 | 第80页 |
·对下一步工作的设想 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
附:试验用主要溶液及培养基的配制 | 第87-92页 |
作者简历 | 第92页 |