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羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的建立及布鲁氏菌omp28基因的克隆与表达

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
縮略语中英文对照表第8-9页
插图及附表清单第9-11页
第一章 引言第11-20页
   ·概述第11页
   ·布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展第11-18页
     ·布鲁氏菌病病原学检测第11-14页
     ·布鲁氏菌抗体检测第14-18页
   ·布鲁氏菌疫苗的研究进展第18-19页
     ·布鲁氏菌疫苗的应用现状第18页
     ·布鲁氏菌疫苗的研究现状第18-19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
第二章 布鲁氏菌抗原的制备第20-28页
   ·材料第20-21页
   ·试验方法第21-23页
     ·布鲁氏菌的培养第21页
     ·LPS抗原的粗提取及鉴定第21-22页
     ·LPS的纯化及鉴定第22-23页
     ·LPS纯化工艺重复性及质量标准的确定第23页
     ·提纯的LPS的浓度测定第23页
   ·结果第23-27页
     ·布鲁氏菌LPS抗原的粗提取及鉴定第23-24页
     ·LPS不同纯化方法的纯化效果比较第24-26页
     ·LPS提纯工艺的重复性试验及质量标准的确定第26页
     ·最终确定的LPS纯化工艺第26页
     ·提纯LPS抗原的浓度测定第26-27页
   ·讨论与小结第27-28页
第三章 羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的建立第28-46页
   ·材料第28-29页
   ·试验方法第29-31页
     ·抗原最佳包被浓度和待检血清最佳稀释度的确定第29页
     ·羊布鲁氏菌病iELISA相关反应条件的优化第29-30页
     ·临界值的确定第30页
     ·对照血清的制备第30-31页
   ·结果第31-44页
     ·抗原最佳包被浓度和待检血清最佳稀释度的确定第31-32页
     ·羊布鲁氏菌病iELISA相关反应条件的优化第32-34页
     ·临界值的确定第34-43页
     ·对照血清的制备第43-44页
   ·讨论第44-45页
 小结第45-46页
第四章 羊布鲁氏菌病iELISA抗体检测方法的评价第46-60页
   ·材料第46页
   ·试验方法第46-48页
     ·敏感性试验第46-47页
     ·特异性试验第47页
     ·重复性试验第47页
     ·稳定性试验第47页
     ·符合率试验第47-48页
     ·临床样品的检测第48页
   ·结果第48-57页
     ·敏感性试验第48-50页
     ·特异性试验第50-51页
     ·重复性试验第51-52页
     ·稳定性试验第52-55页
     ·符合率检验第55-57页
     ·临床样品的检测第57页
   ·讨论第57-59页
 小结第59-60页
第五章 布鲁氏菌omp28基因的克隆、表达及表达产物的鉴定第60-80页
   ·材料第60-61页
   ·试验方法第61-67页
     ·不同种布鲁氏菌基因组的提取第61页
     ·目的基因的扩增第61-63页
     ·omp28基因的克隆及核酸序列/氨基酸序列比对第63-65页
     ·pET32a-omp28表达载体的构建及鉴定第65页
     ·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定第65-66页
     ·重组蛋白的纯化第66-67页
   ·结果第67-78页
     ·不同种布鲁氏菌omp28基因扩增结果第67页
     ·不同种布鲁氏菌重组质粒的PCR鉴定第67-68页
     ·不同种布鲁氏菌的omp28基因序列、氨基酸序列比对及亲水性分析第68-74页
     ·重组表达载体pET32a-omp28的构建及鉴定第74-76页
     ·重组菌的诱导表达及表达产物的鉴定第76-77页
     ·重组蛋白的纯化第77-78页
   ·讨论与小结第78-79页
 小结第79-80页
第六章 结论、创新及对下一步工作的设想第80-81页
   ·结论第80页
   ·创新点第80页
   ·对下一步工作的设想第80-81页
参考文献第81-86页
致谢第86-87页
附:试验用主要溶液及培养基的配制第87-92页
作者简历第92页

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