摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-16页 |
·引言 | 第9页 |
·1, 3-丙二醇的性质及应用领域 | 第9页 |
·1, 3-丙二醇的生产及市场情况 | 第9-10页 |
·1, 3-丙二醇的生产方法 | 第10页 |
·微生物发酵法生产1, 3-丙二醇的研究进展 | 第10-14页 |
·生产菌种 | 第10页 |
·1, 3-丙二醇生物合成途径 | 第10-12页 |
·基因工程研究 | 第12页 |
·国内外微生物法合成1, 3-丙二醇研究现状 | 第12-14页 |
·展望 | 第14页 |
·立题意义和本论文的研究内容 | 第14-16页 |
·立题意义 | 第14-15页 |
·研究内容 | 第15-16页 |
第二章 大肠杆菌JM109(PETAC-DHAB-TAC-YQHD)的构建及其表达 | 第16-26页 |
·引言 | 第16-17页 |
·材料与方法 | 第17-20页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-20页 |
·结果与讨论 | 第20-25页 |
·1, 3-丙二醇氧化还原酶同功酶yqhD 的克隆及核苷酸序列分析 | 第20页 |
·甘油脱水酶基因dhaB 的克隆及核苷酸序列分析 | 第20页 |
·重组大肠杆菌表达载体pEtac-dhaB-tac-yqhD 的构建 | 第20-23页 |
·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD)全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第23-24页 |
·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD)质粒稳定性 | 第24页 |
·转化子发酵产1, 3-丙二醇的能力 | 第24页 |
·酶活力分析 | 第24-25页 |
·本章小结 | 第25-26页 |
第三章 重组质粒PUC-TAC-DHAT 的构建及其与PETAC-DHAB-TAC-YQHD 在大肠杆菌JM109 中共表达 | 第26-33页 |
·引言 | 第26页 |
·材料与方法 | 第26-27页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-27页 |
·结果与讨论 | 第27-31页 |
·1, 3-丙二醇氧化还原酶dhaT 的克隆及核苷酸序列分析 | 第27页 |
·大肠杆菌表达载体pUC19-tac-dhaT 的构建 | 第27-29页 |
·质粒pEtac-dhaB-tac-yqhD 和pUC-tac-dhaT 共转化大肠杆菌JM109 | 第29页 |
·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD,pUC-tac-dhaT)全细胞蛋白SDS-PAG 电泳分析 | 第29-30页 |
·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD,pUC-tac-dhaT)质粒稳定性 | 第30页 |
·酶活力分析 | 第30-31页 |
·对1, 3-丙二醇累积及生物量的影响 | 第31页 |
·本章小结 | 第31-33页 |
第四章 重组菌E. COLI JM109(PETAC-DHAB-TAC-YQHD,PUC-TAC-DHAT)发酵培养基优化 | 第33-44页 |
·引言 | 第33页 |
·材料与方法 | 第33-34页 |
·菌株 | 第33页 |
·培养基和培养条件 | 第33-34页 |
·结果与讨论 | 第34-43页 |
·初始葡萄糖浓度对重组菌发酵的影响 | 第34页 |
·初始甘油浓度对重组菌发酵的影响 | 第34-35页 |
·酵母膏浓度对重组菌发酵的影响 | 第35页 |
·磷酸二氢钾浓度对重组菌发酵的影响 | 第35-36页 |
·Mg~(2+)浓度对重组菌发酵的影响 | 第36-37页 |
·维生素B_(12) 浓度对重组菌发酵的影响 | 第37页 |
·摇床转速与装液量 | 第37-38页 |
·接种量 | 第38-39页 |
·IPTG 加入时间与加入量 | 第39-40页 |
·正交实验设计优化重组菌的发酵培养基 | 第40-43页 |
·本章小结 | 第43-44页 |
主要结论与展望 | 第44-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附录:作者在攻读硕士期间发表的论文 | 第52页 |