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产1,3-丙二醇新型基因工程菌的构建

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 绪论第9-16页
   ·引言第9页
   ·1, 3-丙二醇的性质及应用领域第9页
   ·1, 3-丙二醇的生产及市场情况第9-10页
   ·1, 3-丙二醇的生产方法第10页
   ·微生物发酵法生产1, 3-丙二醇的研究进展第10-14页
     ·生产菌种第10页
     ·1, 3-丙二醇生物合成途径第10-12页
     ·基因工程研究第12页
     ·国内外微生物法合成1, 3-丙二醇研究现状第12-14页
   ·展望第14页
   ·立题意义和本论文的研究内容第14-16页
     ·立题意义第14-15页
     ·研究内容第15-16页
第二章 大肠杆菌JM109(PETAC-DHAB-TAC-YQHD)的构建及其表达第16-26页
   ·引言第16-17页
   ·材料与方法第17-20页
     ·实验材料第17-18页
     ·实验方法第18-20页
   ·结果与讨论第20-25页
     ·1, 3-丙二醇氧化还原酶同功酶yqhD 的克隆及核苷酸序列分析第20页
     ·甘油脱水酶基因dhaB 的克隆及核苷酸序列分析第20页
     ·重组大肠杆菌表达载体pEtac-dhaB-tac-yqhD 的构建第20-23页
     ·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD)全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析第23-24页
     ·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD)质粒稳定性第24页
     ·转化子发酵产1, 3-丙二醇的能力第24页
     ·酶活力分析第24-25页
   ·本章小结第25-26页
第三章 重组质粒PUC-TAC-DHAT 的构建及其与PETAC-DHAB-TAC-YQHD 在大肠杆菌JM109 中共表达第26-33页
   ·引言第26页
   ·材料与方法第26-27页
     ·实验材料第26页
     ·实验方法第26-27页
   ·结果与讨论第27-31页
     ·1, 3-丙二醇氧化还原酶dhaT 的克隆及核苷酸序列分析第27页
     ·大肠杆菌表达载体pUC19-tac-dhaT 的构建第27-29页
     ·质粒pEtac-dhaB-tac-yqhD 和pUC-tac-dhaT 共转化大肠杆菌JM109第29页
     ·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD,pUC-tac-dhaT)全细胞蛋白SDS-PAG 电泳分析第29-30页
     ·重组菌(pEtac-dhaB-tac-yqhD,pUC-tac-dhaT)质粒稳定性第30页
     ·酶活力分析第30-31页
     ·对1, 3-丙二醇累积及生物量的影响第31页
   ·本章小结第31-33页
第四章 重组菌E. COLI JM109(PETAC-DHAB-TAC-YQHD,PUC-TAC-DHAT)发酵培养基优化第33-44页
   ·引言第33页
   ·材料与方法第33-34页
     ·菌株第33页
     ·培养基和培养条件第33-34页
   ·结果与讨论第34-43页
     ·初始葡萄糖浓度对重组菌发酵的影响第34页
     ·初始甘油浓度对重组菌发酵的影响第34-35页
     ·酵母膏浓度对重组菌发酵的影响第35页
     ·磷酸二氢钾浓度对重组菌发酵的影响第35-36页
     ·Mg~(2+)浓度对重组菌发酵的影响第36-37页
     ·维生素B_(12) 浓度对重组菌发酵的影响第37页
     ·摇床转速与装液量第37-38页
     ·接种量第38-39页
     ·IPTG 加入时间与加入量第39-40页
     ·正交实验设计优化重组菌的发酵培养基第40-43页
   ·本章小结第43-44页
主要结论与展望第44-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-52页
附录:作者在攻读硕士期间发表的论文第52页

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