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酿酒酵母AFR1过量表达与MPK1及MIH1缺失导致的合成致死

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-8页
前言第8-9页
第一章 文献综述第9-22页
   ·概述第9-11页
     ·酿酒酵母是一种模式生物第9-10页
     ·细胞信号转导第10-11页
   ·MAPKs 信号转导途径第11-17页
     ·酿酒酵母信息素信号通路第12-13页
     ·细胞壁完整性信号通路第13-14页
     ·酿酒酵母高渗透压信号通路第14-15页
     ·细胞壁完整性通路与信息素信号通路间的联系第15-16页
     ·细胞壁完整性通路与高渗透压通路之间的联系第16-17页
   ·细胞极化生长与细胞周期第17-18页
     ·细胞周期依耐蛋白激酶第17-18页
     ·细胞形态检验点第18页
   ·AFR1、MIH1、MPK1 概述第18-21页
     ·AFR1 概述第18-19页
     ·MIH1 概述第19-20页
     ·MPK1 基因及其在 CWI 通路和细胞形态检验点中的作用第20-21页
   ·合成致死现象第21页
   ·本文的主要研究内容第21-22页
第二章 实验材料与方法第22-38页
   ·实验材料第22-28页
     ·质粒、菌株与引物第22-23页
     ·主要实验设备第23-24页
     ·试剂第24-26页
     ·培养基第26-28页
   ·实验方法第28-38页
     ·菌种的培养与保藏第28页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第28-29页
     ·质粒的提取(CTAB 法)第29-30页
     ·酵母染色体的快速分离第30页
     ·酵母细胞的转化第30-31页
     ·PCR 扩增第31-32页
     ·DNA 的限制性内切酶消化第32-33页
     ·凝胶电泳法检测 DNA第33页
     ·DNA 的纯化第33-34页
     ·DNA 连接反应第34-35页
     ·酵母交配型的验证第35-36页
     ·二倍体细胞的孢子形成以及四分体拆分第36页
     ·酵母基因一步置换法第36-37页
     ·细胞壁蜗牛酶敏感性实验方法第37-38页
第三章 结果与讨论第38-59页
   ·研究背景第38页
   ·pUC18-RYu-E-Gal1p-Afr1p-Afr1 质粒构建第38-43页
     ·出发质粒的选取第38-39页
     ·三步克隆法构建pUC18-RYu-E-Gal1p-Afr1p-Afr1 质粒第39-43页
   ·Gal1p-Afr1 菌株的表型第43-45页
     ·Gal1p-Afr1 菌株的构建第43-44页
     ·Gal1p-Afr1 菌株的表型鉴定第44-45页
   ·Gal1p-Afr1-mpk1 的表型第45-48页
     ·菌株 Gal1p-Afr1-mpk1 的构建第45-46页
     ·Gal1p-Afr1-mpk1 的合成致死性现象第46-48页
   ·Gal1p-AFR1-mih1 菌株的表型第48-52页
     ·Gal1p-AFR1-mih1 菌株的构建第48-49页
     ·Gal1p-Afr1-mih1 菌株的长芽现象第49-51页
     ·Gal1p-Afr1-mih1 的合成致死性现象第51-52页
   ·对 Gal1p-AFR1-mih1 及 Gal1p-AFR1-mpk1 菌株合成致死机理的 探讨第52-59页
     ·酶裂解浓度测验第53-54页
     ·对 Gal1p-AFR1-mih1 菌株致死机理研究第54-56页
     ·对 Gal1p-AFR1- mpk1 菌株致死机理研究第56-59页
第四章 结论与展望第59-61页
   ·结论第59页
   ·展望第59-61页
参考文献第61-65页
发表论文和参加科研情况说明第65-66页
致谢第66页

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