摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
·概述 | 第9-11页 |
·酿酒酵母是一种模式生物 | 第9-10页 |
·细胞信号转导 | 第10-11页 |
·MAPKs 信号转导途径 | 第11-17页 |
·酿酒酵母信息素信号通路 | 第12-13页 |
·细胞壁完整性信号通路 | 第13-14页 |
·酿酒酵母高渗透压信号通路 | 第14-15页 |
·细胞壁完整性通路与信息素信号通路间的联系 | 第15-16页 |
·细胞壁完整性通路与高渗透压通路之间的联系 | 第16-17页 |
·细胞极化生长与细胞周期 | 第17-18页 |
·细胞周期依耐蛋白激酶 | 第17-18页 |
·细胞形态检验点 | 第18页 |
·AFR1、MIH1、MPK1 概述 | 第18-21页 |
·AFR1 概述 | 第18-19页 |
·MIH1 概述 | 第19-20页 |
·MPK1 基因及其在 CWI 通路和细胞形态检验点中的作用 | 第20-21页 |
·合成致死现象 | 第21页 |
·本文的主要研究内容 | 第21-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-38页 |
·实验材料 | 第22-28页 |
·质粒、菌株与引物 | 第22-23页 |
·主要实验设备 | 第23-24页 |
·试剂 | 第24-26页 |
·培养基 | 第26-28页 |
·实验方法 | 第28-38页 |
·菌种的培养与保藏 | 第28页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第28-29页 |
·质粒的提取(CTAB 法) | 第29-30页 |
·酵母染色体的快速分离 | 第30页 |
·酵母细胞的转化 | 第30-31页 |
·PCR 扩增 | 第31-32页 |
·DNA 的限制性内切酶消化 | 第32-33页 |
·凝胶电泳法检测 DNA | 第33页 |
·DNA 的纯化 | 第33-34页 |
·DNA 连接反应 | 第34-35页 |
·酵母交配型的验证 | 第35-36页 |
·二倍体细胞的孢子形成以及四分体拆分 | 第36页 |
·酵母基因一步置换法 | 第36-37页 |
·细胞壁蜗牛酶敏感性实验方法 | 第37-38页 |
第三章 结果与讨论 | 第38-59页 |
·研究背景 | 第38页 |
·pUC18-RYu-E-Gal1p-Afr1p-Afr1 质粒构建 | 第38-43页 |
·出发质粒的选取 | 第38-39页 |
·三步克隆法构建pUC18-RYu-E-Gal1p-Afr1p-Afr1 质粒 | 第39-43页 |
·Gal1p-Afr1 菌株的表型 | 第43-45页 |
·Gal1p-Afr1 菌株的构建 | 第43-44页 |
·Gal1p-Afr1 菌株的表型鉴定 | 第44-45页 |
·Gal1p-Afr1-mpk1 的表型 | 第45-48页 |
·菌株 Gal1p-Afr1-mpk1 的构建 | 第45-46页 |
·Gal1p-Afr1-mpk1 的合成致死性现象 | 第46-48页 |
·Gal1p-AFR1-mih1 菌株的表型 | 第48-52页 |
·Gal1p-AFR1-mih1 菌株的构建 | 第48-49页 |
·Gal1p-Afr1-mih1 菌株的长芽现象 | 第49-51页 |
·Gal1p-Afr1-mih1 的合成致死性现象 | 第51-52页 |
·对 Gal1p-AFR1-mih1 及 Gal1p-AFR1-mpk1 菌株合成致死机理的 探讨 | 第52-59页 |
·酶裂解浓度测验 | 第53-54页 |
·对 Gal1p-AFR1-mih1 菌株致死机理研究 | 第54-56页 |
·对 Gal1p-AFR1- mpk1 菌株致死机理研究 | 第56-59页 |
第四章 结论与展望 | 第59-61页 |
·结论 | 第59页 |
·展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |