摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-15页 |
1 引言 | 第15-39页 |
·研究的目的和意义 | 第15-16页 |
·国内外研究现状 | 第16-32页 |
·植物氮素营养的相关研究 | 第16-18页 |
·植物氮素的吸收和代谢研究 | 第18-22页 |
·关于植物氮素同化机理的研究 | 第22-24页 |
·关于植物氮素同化相关酶的研究 | 第24-26页 |
·植物氮代谢相关酶基因的研究 | 第26-30页 |
·亚硝酸还原酶的相关研究 | 第30-32页 |
·实时荧光定量PCR 的研究 | 第32-37页 |
·荧光探针和荧光染料 | 第33-35页 |
·实时荧光定量 PCR 技术的应用 | 第35-37页 |
·基因克隆的方法 | 第37页 |
·本研究课题的来源及主要研究内容 | 第37-39页 |
·本研究课题的来源 | 第37页 |
·本研究的主要内容 | 第37-39页 |
2 材料与方法 | 第39-67页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·供试品种 | 第39页 |
·供试菌种及质粒 | 第39页 |
·主要酶、试剂盒及生化试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器设备 | 第40页 |
·试验设计 | 第40-46页 |
·引物设计 | 第40-42页 |
·试验研究方法 | 第42-46页 |
·甜菜亚硝酸还原酶CDNA 的克隆 | 第46-59页 |
·甜菜叶片总RNA 的提取 | 第46-47页 |
·反转录合成cDNA 的第一链 | 第47-48页 |
·cDNA 3′端的克隆 | 第48-51页 |
·cDNA 5′端的克隆 | 第51-56页 |
·中间片段P0 的克隆 | 第56页 |
·cDNA 全长的克隆 | 第56-59页 |
·甜菜亚硝酸还原酶基因组DNA 的克隆 | 第59-60页 |
·试验材料甜菜的用前准备 | 第59页 |
·gDNA 的提取 | 第59页 |
·gDNA 的完整性分析 | 第59页 |
·gDNA 全长的克隆 | 第59-60页 |
·甜菜亚硝酸还原酶的生物信息学分析 | 第60-62页 |
·生物信息学软件和网络服务器 | 第60-61页 |
·甜菜NiR 基因编码蛋白的结构分析 | 第61页 |
·甜菜NiR 基因编码蛋白的功能分析 | 第61-62页 |
·环境因子对甜菜亚硝酸还原酶活力的影响及基因表达研究 | 第62-67页 |
·铵态氮不同处理条件下的NiR 活力测定及基因表达 | 第62-65页 |
·硝态氮不同处理条件下的NiR 活力测定及基因表达 | 第65页 |
·氮素的不同形态配比处理条件下的NiR 活力测定及基因表达 | 第65页 |
·NaCl 对甜菜NiR 活力及基因表达的影响 | 第65-66页 |
·N02-对甜菜NiR 活力及基因表达的影响 | 第66页 |
·放线菌酮对甜菜NiR 活力及基因表达的影响 | 第66-67页 |
3 结果与分析 | 第67-111页 |
·甜菜亚硝酸还原酶(NIR)全长CDNA 的克隆 | 第67-74页 |
·甜菜总RNA 的提取及检测 | 第67页 |
·cDNA 3′端的克隆 | 第67-69页 |
·cDNA 5′端的克隆 | 第69-71页 |
·中间片段P0 的克隆 | 第71-72页 |
·cDNA 全长的克隆 | 第72-74页 |
·甜菜亚硝酸还原酶基因组DNA(GDNA)的克隆 | 第74-77页 |
·甜菜gDNA 的提取和检测 | 第74-75页 |
·gDNA 全长的克隆 | 第75页 |
·扩增产物的克隆、测序 | 第75-77页 |
·甜菜亚硝酸还原酶的生物信息学分析 | 第77-96页 |
·甜菜NiR 基因编码蛋白的结构分析 | 第77-94页 |
·甜菜NiR 基因编码蛋白的功能分析 | 第94-96页 |
·环境因子对甜菜亚硝酸还原酶活力的影响及基因表达的影响 | 第96-111页 |
·铵态氮处理下对甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第97-100页 |
·硝态氮处理下对甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第100-102页 |
·不同氮素形态配比处理下对甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第102-104页 |
·氮素诱导后NaCl 处理甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第104-106页 |
·氮素诱导后N02-处理甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第106-108页 |
·氮素诱导后放线菌酮处理甜菜NiR 活力和基因表达的影响 | 第108-111页 |
4 讨论 | 第111-117页 |
·甜菜品种的选定 | 第111页 |
·甜菜叶片总RNA 的提取 | 第111页 |
·RACE 扩增方法的可行性 | 第111-112页 |
·甜菜亚硝酸还原酶的生物信息学分析 | 第112页 |
·甜菜NIR 基因的内含子分析 | 第112-113页 |
·甜菜NIR 的3D 结构分析 | 第113页 |
·实时荧光定量PCR 方法的采用 | 第113-115页 |
·环境因子对亚硝酸还原酶(NIR)的影响 | 第115-116页 |
·NIR 分子机制的初步探讨 | 第116-117页 |
5 结论 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
参考文献 | 第120-132页 |
附录 | 第132-142页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第142页 |