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网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-15页
1 引言第15-26页
   ·网状内皮组织增生症病毒分子生物学研究进展第15-20页
     ·病原学第15-17页
     ·流行病学第17-18页
     ·REV 的危害第18-20页
   ·网状内皮组织增生症病毒检测技术研究进展第20-21页
     ·传统的检测方法第20-21页
     ·分子生物学检测方法第21页
   ·LAMP 检测方法第21-23页
     ·引物的设计第21页
     ·扩增原理第21-22页
     ·LAMP 扩增产物的检测第22页
     ·LAMP 的优点第22-23页
   ·反向遗传操作第23-25页
     ·反向遗传操作第23-24页
     ·反转录病毒感染性分子克隆第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-36页
   ·材料第26-27页
     ·病料、病毒和细胞第26页
     ·菌株、载体第26页
     ·主要试剂及试剂盒第26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·试验方法第27-36页
     ·引物设计与合成第27页
     ·REV LAMP 快速检测方法的建立第27-29页
     ·REV gp90 蛋白的表达及多克隆抗体的制备第29-31页
     ·REV 的流行病学研究第31-32页
     ·HLJR0901 全基因组克隆、序列测定及分析第32页
     ·REV 感染性分子克隆的建立及应用第32-34页
     ·拯救病毒rHLJR0901 动物感染实验第34-36页
3 结果与分析第36-65页
   ·REV LAMP 快速检测方法的建立第36-39页
     ·确定最佳的LAMP 反应条件第36页
     ·LAMP 敏感性试验第36-37页
     ·LAMP 特异性试验第37页
     ·LAMP 对临床样品的检测第37-39页
   ·REV gp90 蛋白的表达及多克隆抗体的制备第39-41页
     ·表达质粒Bacmidgp90 和pET28-gp90 的构建和鉴定第39页
     ·gp90 蛋白的真核表达及生物活性分析第39-40页
     ·重组gp90 蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备第40-41页
   ·RE 血清学检测结果第41页
   ·REV 的分离鉴定第41-48页
     ·间接免疫荧光结果第41-43页
     ·电镜观察结果第43-44页
     ·基于IFA 的毒价滴定第44页
     ·复制动力学研究第44页
     ·东北分离株gp90 基因的克隆与序列分析第44-48页
   ·HLJR0901 的全基因组序列测定及分析第48-51页
     ·HLJR0901 全基因组克隆第48页
     ·HLJR0901 全基因组序列分析第48-50页
     ·全基因组遗传演化分析第50-51页
   ·HLJR0901 感染性分子克隆的建立及应用第51-56页
     ·HLJR0901 感染性分子克隆的构建第51-52页
     ·病毒的拯救与鉴定第52-54页
     ·拯救的REV 复制动力学第54页
     ·EGFP 正确插入到REV 基因组中第54-56页
   ·动物感染实验结果第56-65页
     ·rHLJR0901 感染对SPF 鸡生长性能的影响第56页
     ·rHLJR0901 感染对SPF 鸡免疫器官的影响第56-57页
     ·rHLJR0901 感染对SPF 鸡免疫器官的病理损伤第57-64页
     ·病毒血症的检测第64页
     ·REV 血清抗体检测第64-65页
4 讨论第65-70页
   ·LAMP 快速检测方法的建立第65页
   ·gp90 蛋白表达第65-66页
   ·REV 东北分离群gp90 及HLJR0901 全基因组序列分析第66-68页
   ·HLJR0901 感染性分子克隆的建立及初步应用第68-69页
   ·REV 动物感染实验第69-70页
5 结论第70-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-80页
附录第80-82页
攻读博士学位期间发表的论文第82页

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