中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-8页 |
缩略词 | 第8-9页 |
1 绪论 | 第9-18页 |
·研究的背景与意义 | 第9-10页 |
·绿僵菌的研究进展 | 第10页 |
·绿僵菌的致病机理研究进展 | 第10-12页 |
·病原真菌侵染寄主昆虫的过程 | 第10-11页 |
·绿僵菌对寄主的识别与粘附 | 第11页 |
·绿僵菌侵染寄主过程中附着胞形成 | 第11-12页 |
·蛋白酶类 | 第12页 |
·绿僵菌进入寄主血淋巴后的适应 | 第12页 |
·胺氧化酶的研究进展 | 第12-14页 |
·哺乳动物体内胺氧化酶 | 第13-14页 |
·植物体内胺氧化酶 | 第14页 |
·微生物胺氧化酶 | 第14页 |
·RNAi 研究进展 | 第14-16页 |
·RNAi 作用的机制 | 第15页 |
·RNAi 的特点 | 第15页 |
·RNA i 的应用 | 第15-16页 |
·立题依据和研究目标 | 第16页 |
·研究内容和技术路线 | 第16-17页 |
·研究内容 | 第16-17页 |
·技术路线 | 第17页 |
·本研究创新之处 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
·材料 | 第18页 |
·供试菌株和昆虫 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要溶液配制 | 第18页 |
·金龟子绿僵菌CQMa102CuAO 基因的DNA 全长和cDNA 全长的获取 | 第18-22页 |
·全长基因组DNA 序列的获取 | 第18页 |
·引物的设计 | 第18-19页 |
·金龟子绿僵菌CQMa102 致病时期总mRNA 的制备 | 第19-20页 |
·金龟子绿僵菌CQMa102 CuAO 基因cDNA 序列的扩增和克隆 | 第20-22页 |
·生物信息学分析 | 第22-23页 |
·CuAO 基因的干扰 | 第23-27页 |
·干扰片段的扩增 | 第23-24页 |
·干扰载体(pbar-RNAi-gpd-trp)的双酶切 | 第24页 |
·干扰载体与CuAO 基因干扰片段的连接 | 第24页 |
·连接后的载体pbar-RNAi-gpd-trp-CuAO 的克隆 | 第24页 |
·转化金龟子绿僵菌CQMa102 | 第24-25页 |
·干扰突变株性状分析 | 第25-27页 |
3 结果和分析 | 第27-41页 |
·CuAO 基因的cDNA 全长和DNA 全长的获取 | 第27-35页 |
·CuAO 基因DNA 序列的获取 | 第27页 |
·金龟子绿僵菌CQMa102 致病时期总RNA 的提取 | 第27页 |
·CuAO 基因的cDNA 序列扩增 | 第27-28页 |
·生物信息学分析结果 | 第28-35页 |
·RNA 干扰结果 | 第35-41页 |
·RNA 干扰突变株PCR 验证 | 第35-36页 |
·RNA 干扰突变株表型分析 | 第36-37页 |
·干扰突变株和野生株产生附着胞数量的分析 | 第37-38页 |
·干扰突变株和野生株的室内毒力测定 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
·获取金龟子绿僵菌CQMa102 CuAO 基因的全长 | 第41页 |
·丝状真菌基因功能研究的方法 | 第41-43页 |
·基因敲除( gene knockout) | 第41-42页 |
·RNAi 技术 | 第42页 |
·超表达(over expression) | 第42-43页 |
·CuAO 基因影响金龟子绿僵菌CQMa102 毒力 | 第43-44页 |
5 结论与后续工作建议 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录 | 第53页 |