| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-33页 |
| 一、组蛋白 | 第9-10页 |
| 二、非组蛋白 | 第10-28页 |
| （一）染色体轴蛋白(CXPs) | 第11页 |
| （二）核基质蛋白(NMPs) | 第11-12页 |
| （三）染色体结合蛋白 | 第12-28页 |
| 1. 拓扑异构酶Ⅱ | 第12-18页 |
| （1）细菌拓扑异构酶 | 第14-15页 |
| （2）酵母拓扑异构酶 | 第15-16页 |
| （3）人类拓扑异构酶 | 第16-18页 |
| 2. 染色体结构维持蛋白 | 第18-27页 |
| （1）SMC蛋白家族成员 | 第19-20页 |
| （2）SMC蛋白的结构 | 第20-23页 |
| （3）SMC-Kleisin蛋白复合物 | 第23-27页 |
| 3. 高速移动蛋白 | 第27-28页 |
| 三、集缩素与染色体结构 | 第28-29页 |
| 四、集缩素与染色体分离 | 第29-30页 |
| 五、集缩素的作用机制 | 第30-31页 |
| 六、本研究的目的意义 | 第31-33页 |
| 实验材料 | 第33-34页 |
| （一）细胞与动物材料 | 第33页 |
| （二）培养基与血清 | 第33页 |
| （三）质粒与试剂 | 第33页 |
| （四）菌株 | 第33页 |
| （五）生物酶类 | 第33页 |
| （六）主要仪器 | 第33-34页 |
| 实验方法 | 第34-41页 |
| 一、HeLa细胞培养 | 第34页 |
| 二、真核表达质粒的构建 | 第34-35页 |
| （一）pcDNA3.1+KNE的构建 | 第34页 |
| （二）pcDNA3.1+KNC的构建 | 第34-35页 |
| （三）pcDNA3.1+KG的制备 | 第35页 |
| 三、人集缩素SMC亚基干涉质粒制备 | 第35页 |
| （一）hCAP-E干涉质粒RHE的制备 | 第35页 |
| （二）hCAP-C干涉质粒RHC的制备 | 第35页 |
| 四、细胞共转染实验 | 第35-36页 |
| 五、HeLa细胞周期同步化 | 第36页 |
| 六、免疫荧光标记实验 | 第36-37页 |
| 七、集缩素蛋白与拓扑异构酶Ⅱα免疫共沉淀分析 | 第37页 |
| 八、爪蟾卵非细胞体系的制备与染色体体外重构 | 第37-41页 |
| （一）诱导及产卵 | 第37-38页 |
| （二）精细胞核的制备 | 第38页 |
| （三）细胞周期提取物制备 | 第38-40页 |
| （四）染色体体外重构 | 第40-41页 |
| 实验结果 | 第41-51页 |
| 一、HeLa细胞共转染实验体系的建立 | 第41-42页 |
| 二、集缩素SMC亚基集缩活性影响染色体集缩水平 | 第42-43页 |
| 三、集缩素表达水平影响高等哺乳动物细胞染色体的集缩 | 第43-47页 |
| 四、集缩素与拓扑异构酶Ⅱα在细胞内共定位与功能性协同 | 第47-49页 |
| 五、利用爪蟾卵非细胞体系重构细胞染色体结构 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-55页 |
| 一、集缩素蛋白突变体会干扰正常集缩素蛋白对染色质的集缩 | 第51-52页 |
| 二、集缩素表达水平是影响染色体正常集缩的一个主要因素 | 第52-53页 |
| 三、集缩素蛋白与拓扑异构酶Ⅱα的协同作用 | 第53页 |
| 四、染色体体外重构实验验证集缩素的功能 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 主要创新点 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 在读期间发表文章 | 第69页 |
