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SlRCHY1和SlPL在番茄果实发育及成熟过程中的功能研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词表第12-14页
1 绪论第14-29页
    1.1 番茄国内外研究进展第14-19页
        1.1.1 番茄果实的成熟与软化第14-16页
        1.1.2 脱落酸与番茄果实成熟第16-18页
        1.1.3 果胶及相关酶类与番茄果实成熟调控第18-19页
    1.2 番茄中果胶裂解酶的研究进展第19-20页
    1.3 番茄中锌指蛋白转录因子(RING-H2)家族的研究进展第20-22页
    1.4 番茄果实品质改良中转基因技术的应用第22-24页
    1.5 课题研究的目的及研究意义第24-25页
        1.5.1 研究目的第24页
        1.5.2 研究意义第24-25页
    1.6 课题的研究内容、技术路线及创新点第25-29页
        1.6.1 课题的研究内容第25-27页
        1.6.2 课题研究的技术路线第27-28页
        1.6.3 课题研究的创新点第28-29页
2 番茄SlRCHY1 基因的功能研究第29-74页
    2.1 引言第29页
    2.2 实验材料第29-31页
        2.2.1 植物材料、菌株、载体、酶及试剂第29-31页
        2.2.2 主要仪器与设备第31页
    2.3 主要培养基与溶液配置第31-33页
        2.3.1 主要培养基配置第31-33页
        2.3.2 主要溶液配置第33页
    2.4 实验方法第33-55页
        2.4.1 番茄基因组DNA的提取第33页
        2.4.2 番茄总RNA的提取与纯化第33-34页
        2.4.3 番茄c DNA的合成第34-35页
        2.4.4 SlRCHY1、ACMADS1 基因的克隆第35-39页
        2.4.5 番茄SlRCHY1 家族基因的序列分析与进化树构建第39页
        2.4.6 SlRCHY1 基因的表达模式研究第39-40页
        2.4.7 SlRCHY1 基因的过表达载体构建第40-44页
        2.4.8 PBI121-AcMADS1-SlRCHY1 载体转化农杆菌第44-45页
        2.4.9 SlRCHY1 基因过表达番茄的培育第45-46页
        2.4.10 SlRCHY1 基因过表达阳性植株的筛选第46-47页
        2.4.11 SlRCHY1 在转基因番茄中的过表达效率检测第47页
        2.4.12 SlRCHY1 基因的过表达转基因番茄果实表型及成熟时间统计第47-48页
        2.4.13 番茄果实总叶绿素含量及类胡萝卜素含量测定第48页
        2.4.14 番茄果实类胡萝卜素代谢合成基因PSY1、PDS、ZDS表达模式研究第48-49页
        2.4.15 过表达SlRCHY1 基因后番茄果实硬度和可溶性固体含量测定第49-50页
        2.4.16 SlRCHY1 基因过表达转基因番茄果实耐贮藏性检测第50-51页
        2.4.17 SlRCHY1 基因在AC++、Nr与 Rin突变体中的表达模式研究第51页
        2.4.18 转基因番茄果实成熟过程中脱落酸(ABA)生物合成及其信号转导相关基因的表达模式分析第51-52页
        2.4.19 番茄果实脱落酸的提取及含量测定第52-53页
        2.4.20 SlRCHY1 蛋白亚细胞定位第53-55页
    2.5 结果与分析第55-72页
        2.5.1 番茄SlRCHY1 与其他RING-H2 型蛋白同源比对及进化分析第55-58页
        2.5.2 SlRCHY1 基因过表达载体的构建第58-62页
        2.5.3 SlRCHY1 基因沉默转基因番茄苗系的培育与筛选第62-63页
        2.5.4 SlRCHY1 在野生型番茄组织中的表达模式分析第63-64页
        2.5.5 SlRCHY1 基因过表达转基因番茄果实表型及成熟时间统计第64-66页
        2.5.6 SlRCHY1 基因的过表达在番茄果实耐贮藏过程中的作用第66-67页
        2.5.7 SlRCHY1 基因的过表达影响了果皮的叶绿素及其相类胡萝卜素积累第67-68页
        2.5.8 SlRCHY1 基因过表达转基因番茄果实类胡萝卜素合成相关基因检测第68-69页
        2.5.9 SlRCHY1 基因过表达番茄果实脱落酸合成及其信号转导相关基因的表达模式分析第69-70页
        2.5.10 番茄果实脱落酸含量测定第70页
        2.5.11 SlRCHY1 转录因子亚细胞定位分析第70-72页
    2.6 本章讨论第72-73页
        2.6.1 SlRCHY1 锌指蛋白在番茄果实成熟中的功能第72页
        2.6.2 SlRCHY1 基因参与调控脱落酸生物合成及其信号转导第72-73页
    2.7 本章小结第73-74页
3 番茄SlPL基因的功能研究第74-104页
    3.1 引言第74页
    3.2 实验材料第74-75页
        3.2.1 植物材料、菌株、载体、酶及试剂第74页
        3.2.2 主要仪器与设备第74-75页
    3.3 主要培养基与溶液配置第75页
        3.3.1 主要培养基配置第75页
        3.3.2 主要溶液配置第75页
    3.4 实验方法第75-87页
        3.4.1 番茄总RNA的提取、纯化及c DNA的合成第75页
        3.4.2 SlPL基因的克隆第75-76页
        3.4.3 SlPL基因的沉默载体构建第76-82页
        3.4.4 PBIN19-SlPL载体转化农杆菌第82页
        3.4.5 SlPL基因沉默转基因番茄的培育第82-83页
        3.4.6 SlPL基因沉默阳性植株的筛选与沉默效率鉴定第83-84页
        3.4.7 SlPL在野生型番茄果实中的表达模式研究第84页
        3.4.8 转基因番茄表型分析及番茄成熟时间统计第84页
        3.4.9 SlPL转基因株系番茄果实酶活力检测第84-85页
        3.4.10 SlPL转基因株系番茄果实硬度和可溶性固体含量测定第85页
        3.4.11 SlPL转基因番茄果皮石蜡切片及其生理指标测定第85-86页
        3.4.12 SlPL转基因番茄果实耐贮藏性检测第86页
        3.4.13 转基因番茄果实细胞壁降解相关基因表达水平检测第86页
        3.4.14 番茄细胞壁果胶合成相关基因表达水平检测第86-87页
    3.5 结果与分析第87-102页
        3.5.1 番茄SlPL基因序列的进化树分析及表达模式预测第87页
        3.5.2 PBIN19—SlPL基因沉默载体的构建第87-91页
        3.5.3 SlPL基因沉默转基因番茄苗系的培育与筛选第91-92页
        3.5.4 SlPL基因在番茄组织中的表达模式分析第92-93页
        3.5.5 SlPL基因沉默转基因株系与野生型番茄果胶裂解酶活力分析第93-94页
        3.5.6 SlPL基因沉默转基因番茄表型分析第94-95页
        3.5.7 SlPL基因沉默后降低了转基因番茄果皮的厚度并减少了果实的可溶性糖的含量第95-97页
        3.5.8 番茄果皮石蜡切片及生理指标测定分析第97-99页
        3.5.9 沉默SlPL基因延长了番茄果实采后贮藏期第99-100页
        3.5.10 番茄果实细胞壁降解相关基因表达模式分析第100-101页
        3.5.11 SlPL基因沉默降低了细胞壁果胶合成相关基因的表达第101-102页
    3.6 本章讨论第102-103页
        3.6.1 SlPL基因在番茄果实采后贮藏中的功能第102页
        3.6.2 SlPL基因影响了细胞壁降解基因和果胶合成酶基因的表达第102-103页
    3.7 本章小结第103-104页
4 结论与展望第104-107页
    4.1 主要结论第104-105页
    4.2 展望第105-107页
参考文献第107-115页
附录第115-117页
    A、攻读硕士学位期间发表的论文及摘要目录第115页
    B、攻读硕士学位期间发明的专利第115页
    C、攻读硕士学位期间参与的科研项目第115-116页
    D、攻读硕士学位期间获得的奖励第116-117页
致谢第117页

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