| 致谢 | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| 1 课题提出 | 第16页 |
| 2 '阳光玫瑰'葡萄主要病毒病病原概述 | 第16-19页 |
| 2.1 葡萄灰比诺病毒 | 第17页 |
| 2.2 葡萄卷叶伴随3型病毒 | 第17页 |
| 2.3 葡萄斑点病毒 | 第17-18页 |
| 2.4 沙地葡萄茎痘相关病毒 | 第18页 |
| 2.5 葡萄病毒A | 第18-19页 |
| 2.6 葡萄病毒B | 第19页 |
| 2.7 葡萄病毒E | 第19页 |
| 3 植物病毒检测方法 | 第19-22页 |
| 3.1 生物学检测 | 第19-20页 |
| 3.2 血清检测 | 第20页 |
| 3.3 电子显微镜观察检测 | 第20-21页 |
| 3.4 分子生物学检测 | 第21-22页 |
| 4 植物脱毒方法 | 第22-25页 |
| 4.1 茎尖组织培养脱毒法 | 第22-23页 |
| 4.2 热处理结合茎尖组织培养脱毒法 | 第23页 |
| 4.3 化学试剂结合茎尖组织培养脱毒 | 第23-24页 |
| 4.4 超低温处理结合茎尖组织培养脱毒法 | 第24页 |
| 4.5 其他脱毒方法 | 第24-25页 |
| 5 葡萄组织培养 | 第25-26页 |
| 6 本研究的内容和目的 | 第26-27页 |
| 第二章 基于不同检测方法的'阳光玫瑰'主要病原鉴定 | 第27-39页 |
| 1 试验材料 | 第27页 |
| 2 试验方法与设计 | 第27-32页 |
| 2.1 类病毒病症状观察 | 第27-28页 |
| 2.2 RT-PCR检测与序列分析 | 第28-30页 |
| 2.2.1 植物总RNA的提取与cDNA第一链的合成 | 第28页 |
| 2.2.2 引物选择 | 第28-29页 |
| 2.2.3 PCR反应与琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| 2.2.4 PCR产物回收与测序 | 第29-30页 |
| 2.3 多重RT-PCR检测优化 | 第30-31页 |
| 2.3.1 多重RT-PCR体系优化 | 第30-31页 |
| 2.3.2 优化体系准确性验证 | 第31页 |
| 2.4 实时荧光定量(qRT-PCR)分析 | 第31-32页 |
| 2.4.1 引物设计 | 第31-32页 |
| 2.4.2 实时荧光定量分析 | 第32页 |
| 2.5 数据分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-37页 |
| 3.1 '阳光玫瑰'异常树体的观察结果 | 第32-33页 |
| 3.2 RT-PCR检测结果 | 第33-34页 |
| 3.3 多重RT-PCR检测优化 | 第34-35页 |
| 3.3.1 多重RT-PCR优化体系 | 第34-35页 |
| 3.3.2 优化体系准确性验证 | 第35页 |
| 3.4 实时荧光定量检测结果与RT-PCR检测结果比较 | 第35-37页 |
| 3.4.1 引物验证 | 第35-36页 |
| 3.4.2 实时荧光定量检测结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论与小结 | 第37-39页 |
| 第三章 '阳光玫瑰'离体快繁体系的建立 | 第39-49页 |
| 1 试验材料 | 第39页 |
| 2 试验方法与设计 | 第39-42页 |
| 2.1 试验技术路线 | 第39页 |
| 2.2 试验方法 | 第39-42页 |
| 2.2.1 初代培养 | 第40-41页 |
| 2.2.2 继代培养 | 第41页 |
| 2.2.3 生根培养和营养钵生长 | 第41-42页 |
| 2.3 数据统计分析方法 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.1 外植体消毒方案的选择 | 第42-43页 |
| 3.2 初代培养基的选择 | 第43-44页 |
| 3.3 继代培养基的选择 | 第44-45页 |
| 3.4 生根培养基的选择 | 第45-46页 |
| 4 讨论与小结 | 第46-49页 |
| 第四章 '阳光玫瑰'脱毒技术的研究 | 第49-58页 |
| 1 试验材料 | 第49页 |
| 2 试验设计与方法 | 第49-52页 |
| 2.1 试验技术路线 | 第49-50页 |
| 2.2 试验方法 | 第50-52页 |
| 2.2.1 茎尖组织培养脱毒 | 第50-51页 |
| 2.2.2 热处理 | 第51页 |
| 2.2.3 超低温处理 | 第51-52页 |
| 2.2.4 再生植株的病毒检测 | 第52页 |
| 2.3 数据统计分析方法 | 第52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-57页 |
| 3.1 茎尖组织培养体系优化 | 第52-55页 |
| 3.1.1 外植体消毒方案 | 第52-53页 |
| 3.1.2 茎尖初代培养基的选择 | 第53-54页 |
| 3.1.3 不同茎尖培养的差异 | 第54-55页 |
| 3.2 不同脱毒方法比较 | 第55-57页 |
| 4 讨论与小结 | 第57-58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 常用缓冲液与培养基配方 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69页 |
