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伏隔核调控ERK信号分子的rno-miRNA在海洛因复吸行为中的作用

引言第6-8页
1 实验材料与材料制备第8-21页
    1.1 实验动物第8页
    1.2 实验试剂及配制第8-11页
        1.2.1 主要药品与试剂第8-10页
        1.2.2 主要试剂配制方法第10-11页
    1.3 实验仪器及材料制备第11-13页
        1.3.1 主要实验仪器第11-12页
        1.3.2 主要材料及制备第12-13页
    1.4 实验方法第13-20页
        1.4.1 大鼠颈静脉插管手术第13页
        1.4.2 稳定的海洛因自身给药模型的建立第13-14页
        1.4.3 消退实验第14页
        1.4.4 海洛因线索诱导的复吸行为测试第14页
        1.4.5 脑立体定位及大鼠伏隔核脑区微注射病毒载体第14-15页
        1.4.6 大鼠灌流取脑、切片并鉴定病毒转染情况第15页
        1.4.7 蛋白提取、浓度测定及Western Blot实验第15-16页
        1.4.8 在线数据库预测及筛选ERK相关rno-miRNA第16-17页
        1.4.9 伏隔核脑区组织总RNA提取实验第17页
        1.4.10 逆转录及q RT-PCR实验第17-19页
        1.4.11 双荧光素酶报告基因实验第19-20页
    1.5 数据统计及分析第20-21页
2 实验安排第21-24页
    2.1 明确ERK蛋白在海洛因成瘾和复吸中的表达水平变化第21页
    2.2 模型大鼠腹腔注射ERK抑制剂U0126对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第21页
    2.3 预测并筛选调控ERK基因的目标rno-miRNA第21页
    2.4 分子和细胞水平验证目标rno-miRNA第21-22页
        2.4.1 q RT-PCR验证第21-22页
        2.4.2 双荧光素酶报告基因验证第22页
    2.5 模型大鼠伏隔核脑区微注射抑制rno-miR215p和过表达rno-miR-320-3p慢病毒对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第22-23页
        2.5.1 抑制rno-miR215p的影响第22页
        2.5.2 过表达rno-miR3203p的影响第22-23页
    2.6 模型大鼠伏隔核脑区过表达siRNA-ERK对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第23-24页
3 实验结果第24-41页
    3.1 明确ERK蛋白在海洛因成瘾和复吸中的表达水平变化第24-26页
        3.1.1 建立稳定自身给药模型第24页
        3.1.2 线索诱导复吸行为测试第24-25页
        3.1.3 明确海洛因自身给药戒断后线索诱导复吸大鼠ERK蛋白表达情况第25-26页
    3.2 模型大鼠腹腔注射ERK抑制剂U0126对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第26-28页
        3.2.1 腹腔注射ERK抑制剂U0126对海洛因复吸行为影响第26-27页
        3.2.2 腹腔注射ERK抑制剂U0126对ERK蛋白表达的影响第27-28页
    3.3 调控ERK基因的目标miRNA的预测和筛选第28页
        3.3.1 目标rno-miRNA的预测第28页
        3.3.2 目标rno-miRNA的筛选第28页
    3.4 分子和细胞水平验证目标miRNA第28-32页
        3.4.1 q RT-PCR验证第28-30页
        3.4.2 双荧光素酶报告基因验证第30-32页
    3.5 模型大鼠伏隔核脑区过表达或抑制目标rno-miRNA对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第32-39页
        3.5.1 大鼠灌流取脑、切片并观察病毒转染情况第32-33页
        3.5.2 抑制rno-miR215p对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第33-36页
        3.5.3 过表达rno-miR3203p对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第36-39页
    3.6 模型大鼠伏隔核脑区过表达siRNA-ERK对海洛因复吸行为及ERK蛋白表达的影响第39-41页
        3.6.1 过表达siRNA-ERK对海洛因复吸行为影响第39-40页
        3.6.2 过表达siRNA-ERK对ERK2 mRNA及蛋白表达的影响第40-41页
4 讨论第41-44页
5 结论第44-46页
参考文献第46-50页
附录A 缩写词及中英文对照表第50-51页
附录B 文献综述第51-68页
    参考文献第59-68页
在学研究成果第68-69页
致谢第69-70页
论文摘要第70-71页
Abstract第71-72页

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