| 论文摘要 | 第4-5页 |
| abstract of thesis | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-11页 |
| 第一章 小鼠IL-38 cDNA克隆及序列分析 | 第11-19页 |
| 1.1 材料 | 第11-13页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第11页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第11页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第11页 |
| 1.1.4 主要试剂配制 | 第11-12页 |
| 1.1.5 培养基 | 第12-13页 |
| 1.2 方法 | 第13-16页 |
| 1.2.1 PCR引物的合成 | 第13页 |
| 1.2.2 小鼠总RNA提取及IL-38 基因扩增 | 第13-14页 |
| 1.2.3 pcDNA3.1-IL-35 质粒提取 | 第14页 |
| 1.2.4 IL-38 的PCR产物和pcDNA3.1-IL-35 质粒的酶切 | 第14-15页 |
| 1.2.5 pcDNA3.1-IL-35 载体和PCR酶切产物的回收 | 第15页 |
| 1.2.6 酶切产物连接 | 第15页 |
| 1.2.7 制备感受态细胞 | 第15页 |
| 1.2.8 转化 | 第15页 |
| 1.2.9 重组质粒的菌落PCR鉴定 | 第15页 |
| 1.2.10 重组质粒的酶切鉴定 | 第15-16页 |
| 1.2.11 重组质粒测序分析 | 第16页 |
| 1.3 结果 | 第16-18页 |
| 1.3.1 小鼠总RNA提取及IL-38 基因的扩增 | 第16-17页 |
| 1.3.2 m IL-38 真核表达质粒构建与鉴定 | 第17-18页 |
| 1.4 小结 | 第18-19页 |
| 第二章 IL-38 在高脂饮食诱导小鼠肥胖中的作用 | 第19-32页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.3 高脂饲料 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 实验对象分组 | 第21页 |
| 2.2.2 目的质粒的提取 | 第21页 |
| 2.2.3 高脂饮食诱导肥胖小鼠模型构建 | 第21-22页 |
| 2.2.4 小鼠体重测量 | 第22页 |
| 2.2.5 腹腔糖耐量试验（IPGTT） | 第22页 |
| 2.2.6 胰岛素耐量试验（ITT） | 第22页 |
| 2.2.7 组织样本收集 | 第22页 |
| 2.2.8 细胞因子的酶联免疫吸附法测定（enzyme-linked immune sorbent assay，ELISA） | 第22页 |
| 2.2.9 脂肪组织和肝脏组织HE染色 | 第22-23页 |
| 2.2.10 肝脏组织油红O染色 | 第23页 |
| 2.2.11 肝脏甘油三酯（TG）测定 | 第23-24页 |
| 2.2.12 血清谷丙转氨酶（ALT）检测 | 第24-25页 |
| 2.2.13 PCR检测脂肪组织中细胞因子m RNA水平 | 第25-26页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-30页 |
| 2.3.1 IL-38 抑制HFD诱导的小鼠肥胖 | 第26页 |
| 2.3.2 注射IL-38 基因维持葡萄糖稳态 | 第26-27页 |
| 2.3.3 注射IL-38 防止肝脏脂肪异常堆积和肝损伤 | 第27-28页 |
| 2.3.4 注射IL-38 基因抑制脂肪细胞的肥大 | 第28-29页 |
| 2.3.5 注射IL-38 基因抑制炎症细胞因子的表达 | 第29-30页 |
| 2.3.6 ELISA检测结果 | 第30页 |
| 2.4 小结 | 第30-32页 |
| 第三章 IL-38 在 3T3-L1细胞分化中的作用 | 第32-39页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 细胞 | 第32页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第32页 |
| 3.1.4 试剂及培养基配制 | 第32-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 细胞复苏 | 第33-34页 |
| 3.2.2 细胞常规培养 | 第34页 |
| 3.2.3 细胞冻存 | 第34页 |
| 3.2.4 3T3-L1细胞诱导分化 | 第34页 |
| 3.2.5 3T3-L1细胞油红O染色 | 第34页 |
| 3.2.6 IL-38 对 3T3-L1细胞分化的影响 | 第34-35页 |
| 3.2.7 IL-38 对LPS诱导 3T3-L1细胞炎症细胞因子分泌的影响 | 第35页 |
| 3.2.8 3T3-L1细胞总RNA提取及q RT-PCR分析 | 第35页 |
| 3.2.9 统计学分析 | 第35页 |
| 3.3 结果 | 第35-38页 |
| 3.3.1 3T3-L1细胞的诱导分化 | 第35-36页 |
| 3.3.2 IL-38 对 3T3-L1细胞分化的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 IL-38 对 3T3-L1细胞合成甘油三酯的影响 | 第37页 |
| 3.3.4 IL-38 对 3T3-L1细胞基因表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.5 ELISA实验结果 | 第38页 |
| 3.4 小结 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录 A 综述 Ⅱ型固有淋巴细胞在白色脂肪棕色化中的作用 | 第46-53页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 在学研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
