| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第9-16页 |
| 1. 神经退行性疾病的年龄依赖性 | 第9-10页 |
| 1.1 AD、PD及HD的发病率呈现典型的年龄依赖性 | 第9页 |
| 1.2 AD、PD及HD的病理改变呈现共有的病理特征---脑老化 | 第9-10页 |
| 2. 老化及其研究进展 | 第10-13页 |
| 2.1 老化的研究概况 | 第10页 |
| 2.2 老化的主要特征 | 第10页 |
| 2.3 线粒体失稳在老化中的作用 | 第10-13页 |
| 3. 线粒体功能异常参与神经退行性疾病 | 第13-14页 |
| 3.1 线粒体和AD | 第13页 |
| 3.2 线粒体和PD | 第13页 |
| 3.3 以线粒体为靶点的神经退行性疾病的治疗 | 第13-14页 |
| 4. 亚精胺( Spermidine,Sper)的抗衰老作用 | 第14-15页 |
| 4.1 内源性Sper的产生、代谢及功能 | 第14页 |
| 4.2 随年龄增加Sper的含量变化 | 第14页 |
| 4.3 Sper抗衰老的主要机制 | 第14-15页 |
| 5. 关键问题及研究假说 | 第15-16页 |
| 实验材料和方法 | 第16-33页 |
| 1. 实验材料 | 第16-21页 |
| 1.1 主要试剂 | 第16-18页 |
| 1.2 实验仪器和设备 | 第18-19页 |
| 1.3 实验用细胞 | 第19页 |
| 1.4 溶液配制 | 第19-21页 |
| 2. 实验流程及技术路线 | 第21页 |
| 3. 实验方法 | 第21-32页 |
| 3.1 细胞复苏 | 第21页 |
| 3.2 细胞培养 | 第21-22页 |
| 3.3 细胞传代 | 第22页 |
| 3.4 细胞冻存 | 第22页 |
| 3.5 MTT法检测细胞存活率 | 第22-23页 |
| 3.6 实时定量荧光PCR (Quantitative Real-time PCR) | 第23-26页 |
| 3.7 PI细胞周期测定 | 第26-27页 |
| 3.8 β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老 | 第27-28页 |
| 3.9 Rhodamine 123 (Rh123)检测细胞膜电位 | 第28-29页 |
| 3.10 细胞ATP含量测定 | 第29-30页 |
| 3.11 Western blotting检测细胞中蛋白水平 | 第30-32页 |
| 4. 统计方法 | 第32-33页 |
| 结果 | 第33-52页 |
| 1. D-Gal诱导的N2a细胞老化的评价及Spermidine的抗老化效果 | 第33-40页 |
| 1.1 D-Gal诱导N2a细胞老化与Sper干预的剂量及处理时间 | 第33-34页 |
| 1.2 D-Gal及Sper处理N2a细胞对细胞周期的影响 | 第34-38页 |
| 1.3 D-Gal及Sper对N2a细胞老化评价 | 第38-40页 |
| 2. D-Gal诱导的N2a细胞线粒体异常及Spermidine的线粒体保护效应 | 第40-47页 |
| 2.1 D-Gal对mtDNA编码的13个蛋白表达水平的影响 | 第40-44页 |
| 2.2 线粒体功能的评价 | 第44-45页 |
| 2.3 能量感受的关键信号AMPK活化程度 | 第45-46页 |
| 2.4 线粒体膜电位(MMP)检测 | 第46-47页 |
| 3. 细胞内可能的调控作用 | 第47-52页 |
| 3.1 从线粒体损伤到细胞凋亡 | 第47-49页 |
| 3.2 基于Sirt3的调控 | 第49-50页 |
| 3.3 基于自噬的调控 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 1. D-Gal诱导的N2a细胞老化特征 | 第52页 |
| 2. N2a细胞老化伴随线粒体功能异常 | 第52-53页 |
| 3. 细胞周期阻滞与细胞凋亡增加参与N2a细胞老化过程 | 第53页 |
| 4. Spermidine调节线粒体功能影响N2a细胞老化进程 | 第53-55页 |
| 5. 尚未解决的问题 | 第55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 中英文缩略词表 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
