| 致谢 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-15页 |
| 1.1 沙门菌概述 | 第10-11页 |
| 1.1.1 病原学 | 第10页 |
| 1.1.2 流行病学 | 第10-11页 |
| 1.2 多重耐药 | 第11-12页 |
| 1.2.1 微生物多重耐药的概念 | 第11页 |
| 1.2.2 大量抗生素的使用使沙门菌产生多重耐药 | 第11-12页 |
| 1.2.3 沙门菌多重耐药及其调控机制研究 | 第12页 |
| 1.3 双组分信号转导系统概述 | 第12-15页 |
| 1.3.1 双组分信号转导系统 | 第12-14页 |
| 1.3.2 TCS对耐药性的调控作用 | 第14-15页 |
| 第二章 双组分信号转导系统cpxAR对鸡伤寒沙门菌MDR调控作用的确证 | 第15-28页 |
| 2.1 引言 | 第15页 |
| 2.2 材料 | 第15-18页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第15-16页 |
| 2.2.2 药品 | 第16-17页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第18页 |
| 2.3 方法 | 第18-21页 |
| 2.3.1 药品的配制 | 第18-19页 |
| 2.3.2 菌种的保存与使用 | 第19页 |
| 2.3.3 培养基的配制 | 第19-20页 |
| 2.3.4 电转化感受态细胞的制备 | 第20页 |
| 2.3.5 cpxR过表达菌株的构建 | 第20-21页 |
| 2.3.6 磷酸化位点突变对细菌生长特性的影响 | 第21页 |
| 2.3.7 12种抗菌药物对各菌株的MIC值测定 | 第21页 |
| 2.4 结果 | 第21-26页 |
| 2.4.1 cpxR过表达菌株的构建 | 第21-22页 |
| 2.4.2 磷酸化位点突变对细菌生长特性的影响 | 第22-25页 |
| 2.4.3 测试菌株MIC值测定结果 | 第25-26页 |
| 2.5 结果分析与讨论 | 第26-27页 |
| 2.6 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 荧光定量PCR方法筛选cpxAR调控基因 | 第28-47页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 材料 | 第28-29页 |
| 3.2.1 菌种 | 第28页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第29页 |
| 3.3 方法 | 第29-34页 |
| 3.3.1 主要试剂的配制 | 第29页 |
| 3.3.2 引物设计 | 第29-30页 |
| 3.3.3 各基因荧光定量标准曲线的建立 | 第30-32页 |
| 3.3.4 各实验菌株总RNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.3.4.1 实验菌株的诱导培养 | 第32页 |
| 3.3.4.2 Trizol法提取沙门菌总RNA | 第32-33页 |
| 3.3.4.3 总RNA浓度、纯度和完整性分析 | 第33页 |
| 3.3.5 各菌株cDNA第一链的合成 | 第33-34页 |
| 3.3.6 相关主动外排基因及调节基因的mRNA表达水平检测 | 第34页 |
| 3.4 结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.4.1 各待测基因标准曲线的建立 | 第34-36页 |
| 3.4.2 各菌株总RNA的提取和cDNA的合成 | 第36-37页 |
| 3.4.3 各实验菌株acrB、acrD、acrF、TolC、mdtA、marA、soxS基因mRNA表达水平 | 第37-45页 |
| 3.4.3.1 各基因荧光定量PCR溶解曲线 | 第37-40页 |
| 3.4.3.2 各基因荧光定量PCR扩增曲线 | 第40-43页 |
| 3.4.3.3 各试验菌株不同基因的mRNA表达水平 | 第43-45页 |
| 3.5 讨论 | 第45-46页 |
| 3.5.1 荧光定量PCR方法 | 第45页 |
| 3.5.2 cpxAR的靶调控基因 | 第45-46页 |
| 3.6 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| Abstract | 第52-53页 |
