| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 苹果酸脱氢酶的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 苹果酸脱氢酶的分类、酶活性的测定及酶学性质的研究 | 第11-12页 |
| 1.1.2 MDH基因的克隆、表达分析及功能的研究状况 | 第12-14页 |
| 1.2 植物花蕾败育的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 可诱导产生花蕾败育相关因素的研究 | 第14页 |
| 1.2.2 花蕾败育的细胞形态学研究 | 第14-15页 |
| 1.2.3 花蕾败育的分子生物学研究 | 第15页 |
| 1.3 基因的表达分析技术 | 第15-16页 |
| 1.4 植物基因的遗传转化技术 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的意义,研究内容及技术路线 | 第17-19页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第17页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 大白菜苹果酸脱氢酶基因的克隆及序列分析 | 第19-26页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 基因组DNA提取 | 第19页 |
| 2.2.2 总RNA提取及纯化 | 第19页 |
| 2.2.3 双链cDNA的合成 | 第19页 |
| 2.2.4 目的基因的扩增 | 第19-20页 |
| 2.2.5 目的片段的回收 | 第20页 |
| 2.2.6 目的片段的连接,转化和测序 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
| 2.3.1 大白菜BrMDH基因扩增结果 | 第21-22页 |
| 2.3.2 菌落PCR检测结果 | 第22页 |
| 2.3.3 大白菜BrMDH基因测序结果 | 第22-26页 |
| 第三章 大白菜苹果酸脱氢酶基因的表达分析 | 第26-29页 |
| 3.1 材料 | 第26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 仪器 | 第26页 |
| 3.2 方法 | 第26-27页 |
| 3.2.1 总RNA的提取 | 第26页 |
| 3.2.2 RNA的纯化及反转录 | 第26页 |
| 3.2.3 引物的合成 | 第26-27页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR检测BrMDH基因的表达 | 第27页 |
| 3.3 结果与分析 | 第27-29页 |
| 第四章 BrMDH干扰表达载体及超量表达载体的构建 | 第29-38页 |
| 4.1 干扰表达载体的构建 | 第29-32页 |
| 4.1.1 材料、试剂及仪器 | 第29页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 4.2 超量表达的构建 | 第32-34页 |
| 4.2.1 材料、试剂及仪器 | 第32页 |
| 4.2.2 方法 | 第32-34页 |
| 4.3 表达载体的检测 | 第34-36页 |
| 4.3.1 菌落PCR及测序检测 | 第34-35页 |
| 4.3.2 表达载体的酶切检测 | 第35-36页 |
| 4.4 结果与分析 | 第36-38页 |
| 4.4.1 菌落PCR检测结果 | 第36页 |
| 4.4.2 酶切检测结果 | 第36-38页 |
| 第五章 BrMDH基因对拟南芥的遗传转化 | 第38-49页 |
| 5.1 材料 | 第38页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第38页 |
| 5.1.2 菌株与质粒 | 第38页 |
| 5.1.3 试剂 | 第38页 |
| 5.1.4 仪器设备 | 第38页 |
| 5.2 方法 | 第38-41页 |
| 5.2.1 拟南芥的种植 | 第38-39页 |
| 5.2.2 农杆菌的转化及检测 | 第39页 |
| 5.2.3 转化缓冲液的配制 | 第39页 |
| 5.2.4 拟南芥的转化 | 第39-40页 |
| 5.2.5 转基因植株的筛选及检测 | 第40-41页 |
| 5.2.6 转基因拟南芥的性状观察 | 第41页 |
| 5.3 结果与分析 | 第41-49页 |
| 5.3.1 表达载体农杆菌检测 | 第41页 |
| 5.3.2 转基因植株抗性筛选及检测 | 第41-44页 |
| 5.3.3 转基因拟南芥的性状观察 | 第44-49页 |
| 第六章 讨论 | 第49-51页 |
| 第七章 结论与展望 | 第51-52页 |
| 7.1 结论 | 第51页 |
| 7.2 创新点 | 第51页 |
| 7.3 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 缩略词 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
