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脂联素对DOCA-盐联合血管紧张素Ⅱ诱导肾损伤的保护作用及其机制

摘要第4-8页
Abstract第8-13页
英文缩略语第14-21页
第一部分:可诱导型人源性全长ApN转基因小鼠模型的建立及鉴定第21-41页
    1 前言第21-22页
    2 材料和方法第22-33页
        2.1 主要试剂和仪器第22-24页
            2.1.1 主要试剂第22-23页
            2.1.2 主要仪器第23-24页
        2.2 实验方法第24-33页
            2.2.1 构建ApN肝脏组织特异性表达载体pBSskplus-cyp1a1-humanApN第24-28页
            2.2.2 建立可诱导型人源性全长ApN转基因小鼠第28页
            2.2.3 PCR法检测ApN转基因首建鼠的基因型第28-29页
            2.2.4 不同剂量I3C诱导的ApN在转基因小鼠肝脏,脂肪和血清组织中的表达第29-33页
        2.3 统计学处理第33页
    3 结果第33-38页
        3.1 ApN肝脏特异性表达载体pBSskplus-cyp1a1-humanApN构建第33-35页
        3.2 可诱导型人源性全长ApN转基因小鼠模型的建立第35页
        3.3 不同剂量I3C诱导的ApN在转基因型小鼠肝脏组织中的表达第35-36页
        3.4 不同剂量I3C诱导的ApN在转基因型小鼠脂肪中的表达第36-37页
        3.5 不同剂量I3C诱导的ApN在转基因型小鼠血清中的表达第37-38页
    4 讨论第38-40页
    5 结论第40-41页
第二部分 DOCA-盐联合AngII诱导肾损伤模型建立第41-65页
    1 前言第41-42页
    2 材料和方法第42-49页
        2.1 主要试剂、仪器和研究对象第42-43页
            2.1.1 主要试剂第42页
            2.1.2 主要仪器第42-43页
            2.1.3 研究对象第43页
        2.2 实验方法第43-49页
            2.2.1 50mgDOCA-盐联合AngII诱导小鼠肾损伤动物模型建造第43-47页
            2.2.2 25mgDOCA-盐联合AngII诱导小鼠肾损伤的动物模型建造第47-49页
        2.3 统计学处理第49页
    3 结果第49-58页
        3.1 50mgDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠的尿白蛋白表达第49-50页
        3.2 50mgDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠代谢笼实验第50-51页
        3.3 50mgDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠肾小球系膜基质沉积及蛋白管型改变第51-53页
        3.4 25mggDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠尿中白蛋白表达第53页
        3.5 25mggDOCA-盐联合AngII诱导小鼠的代谢笼实验第53-54页
        3.6 25mggDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠肾小球系膜基质沉积第54-55页
        3.7 25mggDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠肾小管间质纤维化第55-56页
        3.8 25mggDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠血清肌酐和尿素氮的情况第56-57页
        3.9 25mggDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠血清ApN的表达情况第57-58页
        3.10 ApN在25mgDOCA-盐联合AngII诱导的小鼠中肾皮质中的表达第58页
    4 讨论第58-64页
    5 结论第64-65页
第三部分:ApN缓解DOCA-盐联合AngII诱导肾损伤的机制第65-91页
    1 前言第65-66页
    2 材料和方法第66-70页
        2.1 主要试剂、仪器和研究对象第66-67页
            2.1.1 主要试剂第66-67页
            2.1.2 主要仪器第67页
            2.1.3 动物模型第67页
        2.2 实验方法第67-70页
            2.2.1 25mggDOCA-盐联合AngII诱导小鼠肾损伤的动物模型建造第67页
            2.2.2 实验动物血液、肾脏组织标本第67页
            2.2.3 免疫荧光检测FN、podocin、nephrin、WT-1、Ki-67、F4/80在肾脏中的表达第67页
            2.2.4 Westernblot法检测PAI-1,FN,α-SMA,B7-1,pNF-κb-p65,NOX2,p47~(phox),ERK1/2的蛋白表达第67页
            2.2.5 实时荧光定量RT-PCR法检测TGF-β、FN、COLI、COLIV、KIM-1、NAGL、Megalin、CubilinmRNA的表达第67-70页
            2.2.6 电镜第70页
        2.3 统计学处理第70页
    3 结果第70-81页
        3.1 ApN缓解DOCA-盐联合AngII诱导的肾小球纤维化第70-73页
            3.1.1 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾小球PAI-1,FN,α-SMA蛋白表达的影响第70-71页
            3.1.2 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾皮质TGF-β1,FN,ColI,ColIVmRNA表达的影响第71-72页
            3.1.3 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾小球FN免疫荧光表达的影响第72-73页
        3.2 ApN缓解DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏足细胞损伤第73-75页
            3.2.1 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导肾小球podocin,nephrin,WT-1表达的影响第73-74页
            3.2.2 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的足细胞形态损伤的影响第74-75页
            3.2.3 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾皮质B7-1蛋白表达的影响第75页
        3.3 ApN缓解DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏炎症指标第75-79页
            3.3.1 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏pNF-κB-p65蛋白表达的影响第75-76页
            3.3.2 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏NOX2和p47phox蛋白表达的影响第76-77页
            3.3.3 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏pERK1/2蛋白表达的影响第77-78页
            3.3.4 ApN对DOCA-盐联合AngII诱导的肾脏F4/80和Ki-67免疫荧光表达的影响第78-79页
        3.4 对DOCA-盐联合AngII诱导的肾皮质中megalin,cubilin,KIM-1及NAGLmRNA表达的影响第79-81页
    4 讨论第81-90页
    5 结论第90-91页
本研究创新性的自我评价第91-92页
参考文献第92-111页
综述第111-130页
    参考文献第119-130页
攻读学位期间取得的科研成果第130-131页
致谢第131-132页
个人简历第132页

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