| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略语 | 第10-15页 |
| 第一部分 ：肾小管上皮细胞PAX2直接诱导ADAM10的表达及转录激活机制的研究 | 第15-38页 |
| 1 前言 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-27页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第16-18页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第18页 |
| 2.2.2 PAX2过表达慢病毒载体的构建 | 第18-19页 |
| 2.2.3 PAX2-GV287(pGC-LV)载体细胞转染 | 第19页 |
| 2.2.4 免疫印迹检测 | 第19-21页 |
| 2.2.5 RNA提取及反转录反应 | 第21-22页 |
| 2.2.6 实时定量聚合酶链反应 | 第22-23页 |
| 2.2.7 细胞免疫荧光染色 | 第23页 |
| 2.2.8 PAX2结合位点的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.9 染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第24-26页 |
| 2.2.10 双荧光素酶报告基因检测 | 第26-27页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-36页 |
| 3.1 PAX2基因的合成及其载体的鉴定 | 第27-29页 |
| 3.2 PAX2过表达载体的转染效率鉴定 | 第29-31页 |
| 3.3 PAX2过表达可诱导肾小管上皮细胞出现EMT表型转化并引起ADAM10的转录和表达增加 | 第31-33页 |
| 3.4 PAX2可以和肾小管上皮细胞ADAM10启动子上的结合位点直接结合 | 第33-35页 |
| 3.5 肾小管上皮细胞PAX2可以增加ADAM10启动子的转录活性 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 第二部分 ：ADAM10介导PAX2诱导肾小管上皮细胞间充质转化的研究 | 第38-50页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-43页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第39-40页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.2.2 质粒pRK5M-ADAM10的复苏 | 第41页 |
| 2.2.3 质粒细胞转染 | 第41页 |
| 2.2.4 慢病毒细胞转染 | 第41页 |
| 2.2.5 免疫印迹检测 | 第41-42页 |
| 2.2.6 RNA提取及反转录反应 | 第42页 |
| 2.2.7 实时定量聚合酶链反应(Real-timeqPCR) | 第42页 |
| 2.2.8 细胞免疫荧光 | 第42-43页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-47页 |
| 3.1 PRK5M-ADAM10表达载体的转染效率鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2 过表达外源性ADAM10可诱导人近曲小管上皮细胞出现EMT的表型转化 | 第44-46页 |
| 3.3 ADAM10部分上介导了PAX2诱导的大鼠肾小管上皮细胞的EMT | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 第三部分 ：在体实验ADAM10参与肾间质纤维化进展的研究 | 第50-66页 |
| 1 前言 | 第50-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-56页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第51-52页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第51-52页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 2.2.1 动物模型的制备 | 第52-53页 |
| 2.2.2 标本的收集 | 第53页 |
| 2.2.3 组织形态学检测 | 第53-54页 |
| 2.2.4 免疫组织化学及免疫荧光染色 | 第54页 |
| 2.2.5 免疫印迹检测 | 第54-55页 |
| 2.2.6 RNA提取及反转录反应 | 第55页 |
| 2.2.7 实时定量聚合酶链反应(Real-timeqPCR) | 第55-56页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第56页 |
| 3 结果 | 第56-64页 |
| 3.1 肾组织形态学改变 | 第56-58页 |
| 3.2 UUO大鼠肾小管上皮细胞发生EMT改变 | 第58-59页 |
| 3.3 UUO大鼠ADAM10表达随梗阻时间延长而增加并且与PAX2的表达增加趋势相一致 | 第59-62页 |
| 3.4 ADAM10在慢性肾脏病患儿肾组织标本中呈过表达 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 综述 | 第73-83页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 个人简历 | 第85页 |
