| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第1章 植物应对低磷胁迫及磷转运基因的研究现状与进展 | 第15-23页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 低磷胁迫下植物的生理生化应对反应 | 第15-17页 |
| 1.2.1 根系形态重塑 | 第16页 |
| 1.2.2 根系分泌物增加 | 第16-17页 |
| 1.2.3 磷转运蛋白的表达 | 第17页 |
| 1.2.4 植物体内磷代谢变化 | 第17页 |
| 1.3 植物的磷转运蛋白—PHT1家族研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 PHT1家族成员及结构特征 | 第18页 |
| 1.3.2 PHT1家族磷转运子的生化特征 | 第18页 |
| 1.3.3 PHT1家族磷转运子的时空表达 | 第18页 |
| 1.3.4 PHT1家族磷转运子调控机制 | 第18-19页 |
| 1.4 植物应对低磷胁迫调控分子机制研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.1 PHO2-miR399-PHR1信号通路 | 第19页 |
| 1.4.2 低磷信号通路的转录因子和顺式作用元件 | 第19-21页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 桑树耐低磷胁迫相关性状分析 | 第23-33页 |
| 2.1 植物材料与处理方法 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 MS培养基配制 | 第23-26页 |
| 2.1.3 处理方法 | 第26页 |
| 2.2 低磷胁迫下桑树生理生化指标测定实验 | 第26-29页 |
| 2.2.1 低磷胁迫下桑树根形态变化实验 | 第26-27页 |
| 2.2.2 低磷胁迫对桑树保护酶活性测定实验 | 第27-29页 |
| 2.3 低磷胁迫对桑树根系和保护酶的影响情况分析 | 第29-31页 |
| 2.3.1 低磷胁迫下桑树根系变化 | 第29-30页 |
| 2.3.2 低磷胁迫对桑树保护酶活性的影响 | 第30-31页 |
| 2.4 小结 | 第31-33页 |
| 第3章 低磷胁迫下桑树磷转运基因表达分析 | 第33-67页 |
| 3.1 植物材料与处理方法 | 第33页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第33页 |
| 3.1.2 处理方法 | 第33页 |
| 3.2 植物总RNA的提取 | 第33-35页 |
| 3.2.1 抽提方法 | 第34页 |
| 3.2.2 RNA质量检测 | 第34-35页 |
| 3.3 反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR) | 第35页 |
| 3.4 引物设计和PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3.4.1 引物设计 | 第35页 |
| 3.4.2 目的基因PCR扩增 | 第35-36页 |
| 3.5 琼脂糖凝胶电泳及目的片段回收 | 第36-37页 |
| 3.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第36页 |
| 3.5.2 目的片段胶回收 | 第36-37页 |
| 3.6 目的基因与载体连接 | 第37-38页 |
| 3.7 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第38页 |
| 3.7.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
| 3.7.2 感受态细胞的转化 | 第38页 |
| 3.8 目的基因测序及验证 | 第38-39页 |
| 3.9 桑树PHT1基因克隆结果及分析 | 第39-40页 |
| 3.10 目的基因的生物信息学分析 | 第40-58页 |
| 3.10.1 桑树MaPHT1基因的序列分析 | 第40-44页 |
| 3.10.2 MaPHT1蛋白质的理化性质分析 | 第44-46页 |
| 3.10.3 MaPHT1蛋白质的结构预测 | 第46-48页 |
| 3.10.4 MaPHT1氨基酸序列的同源性分析 | 第48-56页 |
| 3.10.5 构建PHT1进化树 | 第56-58页 |
| 3.11 实时荧光定量PCR实验 | 第58页 |
| 3.12 桑树MaPHT1在不同磷水平下的表达模式分析 | 第58-65页 |
| 3.12.1 MaPHT1在桑树不同组织中的表达分析 | 第59页 |
| 3.12.2 MaHT1;4在不同磷水平下的表达模式分析 | 第59-62页 |
| 3.12.3 MaHT1;7在不同磷水平下的表达模式分析 | 第62-63页 |
| 3.12.4 MaHT1;9在不同磷水平下的表达模式分析 | 第63-65页 |
| 3.13 小结 | 第65-67页 |
| 第4章 桑树低磷胁迫转录组分析 | 第67-75页 |
| 4.1 样品选定与处理 | 第67页 |
| 4.2 低磷胁迫条件下的转录组数据分析 | 第67-72页 |
| 4.2.1 转录组实验数据概况 | 第67-68页 |
| 4.2.2 差异基因表达趋势分析 | 第68-69页 |
| 4.2.3 差异基因GO分类分析 | 第69页 |
| 4.2.4 差异基因KEGG富集分析 | 第69-72页 |
| 4.3 差异基因表达量的验证 | 第72-73页 |
| 4.3.1 差异基因筛选 | 第72-73页 |
| 4.3.2 差异基因验证 | 第73页 |
| 4.4 小结 | 第73-75页 |
| 结论与展望 | 第75-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及专利 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 附录 PCR引物列表 | 第91-92页 |
