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植物细胞分裂素氧化酶/脱氢酶3基因AtCKX3和2-氧戊二酸盐双加氧酶基因SAG203调控叶片衰老的功能研究

内容摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第14-34页
    1.1 叶片衰老相关信号分子第14-17页
        1.1.1 活性氧(ROS)第15页
        1.1.2 糖第15-16页
        1.1.3 一氧化氮(NO)第16-17页
    1.2 叶片衰老相关受体及信号通路第17-19页
        1.2.1 衰老信号感受器——类受体激酶(RLK)第17-18页
        1.2.2 衰老信号传递——促分裂原活化蛋白激酶级联途径(MAPK)第18-19页
    1.3 叶片衰老相关转录因子第19-23页
        1.3.1 NAC家族转录因子第19-20页
        1.3.2 WRKY家族转录因子第20-22页
        1.3.3 其他转录因子第22-23页
    1.4 叶片衰老的调控激素第23-33页
        1.4.1 细胞分裂素(CK)第24-25页
        1.4.2 水杨酸(SA)第25-26页
        1.4.3 脱落酸(ABA)第26页
        1.4.4 乙烯第26-27页
        1.4.5 茉莉酸(JA)第27-28页
        1.4.6 生长素第28-33页
    1.5 本研究目的、内容及意义第33-34页
第二章 细胞分裂素氧化酶/脱氢酶3基因ATCKX3调节衰老的功能研究第34-60页
    2.1 材料与方法第35-44页
        2.1.1 植物材料培养与处理第35页
        2.1.2 菌株与质粒第35-36页
        2.1.3 试剂及仪器第36页
        2.1.4 培养基第36页
        2.1.5 实验引物第36页
        2.1.6 植物基因组的提取第36-37页
        2.1.7 拟南芥叶片cDNA的获得第37-38页
        2.1.8 重组质粒的构建第38-39页
        2.1.9 重组质粒转化根癌农杆菌ABI第39-40页
        2.1.10 酵母单杂交第40-41页
        2.1.11 GUS组织化学定位第41页
        2.1.12 植物叶片衰老相关生理生化检测第41-42页
        2.1.13 根癌农杆菌介导的拟南芥转化法第42-43页
        2.1.14 q-PCR分析基因转录水平第43-44页
        2.1.15 LC - MS/MS法检测不同植物叶片中的IPA含量第44页
    2.2 结果与分析第44-57页
        2.2.1 AtCKX基因家族中AtCKX3在叶片衰老过程中表达显著上升第44-46页
        2.2.2 AtNAP能与AtCKX3基因的启动子区结合第46-48页
        2.2.3 AtNAP正调控AtCKX3基因的转录第48-50页
        2.2.4 AtCKX3基因的缺失造成植物叶片延迟衰老第50-53页
        2.2.5 AtCKX3基因的诱导过量表达导致植物叶片提前衰老第53-55页
        2.2.6 AtCKX3通过调节植物叶片中的细胞分裂素含量调节衰老第55-57页
    2.3 讨论第57-60页
第三章 水杨酸信号通路相关基因SAG203调节叶片衰老的功能研究第60-79页
    3.1 材料与方法第61-68页
        3.1.1 植物材料培养与处理第61页
        3.1.2 菌株与质粒第61页
        3.1.3 试剂及仪器第61-62页
        3.1.4 培养基第62页
        3.1.5 实验引物第62页
        3.1.6 实验相关质粒的构建第62-63页
        3.1.7 重组质粒转化根癌农杆菌ABI第63页
        3.1.8 酵母单杂交第63页
        3.1.9 植物叶片衰老相关生理生化检测第63页
        3.1.10 根癌农杆菌介导的拟南芥转化法第63-64页
        3.1.11 基因转录的q-PCR分析第64-65页
        3.1.12 LC - MS/MS法检测不同植物叶片中的SA含量第65页
        3.1.13 SAG203和ICS1蛋白的原核表达及体外酶活检测第65-68页
    3.2 结果与分析第68-77页
        3.2.1 SAG203是叶片衰老相关蛋白,促进植物叶片衰老第68-72页
        3.2.2 SAG202能与SAG203基因的启动子区结合第72-73页
        3.2.3 SAG203基因表达受到SAG202的正调控第73-74页
        3.2.4 SAG203可能参与水杨酸(SA)合成代谢第74-77页
    3.3 本章小结第77-79页
第四章 (附)光敏色素类组氨酸激酶PHY3通过调节细胞壁几丁质合成调控灰霉菌致病性第79-100页
    4.1 材料与方法第80-88页
        4.1.1 实验菌株和试剂第80-81页
        4.1.2 培养条件第81-82页
        4.1.3 灰霉菌总RNA的提取及cDNA的合成第82页
        4.1.4 灰霉菌光敏色素类组氨酸激酶Bcphy3的鉴定第82-83页
        4.1.5 Bcphy3基因敲除同源重组片段的构建第83页
        4.1.6 灰霉菌B05. 10原生质体的制备及转化第83-84页
        4.1.7 Bcphy3缺失突变体的鉴定第84-86页
        4.1.8 RT-PCR检测B05. 10的Bcphy3及几丁质合成相关基因表达变化第86页
        4.1.9 生长速率的测定第86页
        4.1.10 菌核的观察第86-87页
        4.1.11 灰霉菌的致病性分析第87页
        4.1.12 灰霉菌细胞壁完整程度的检测第87-88页
        4.1.13 数据分析第88页
    4.2 结果与分析第88-98页
        4.2.1 灰霉菌B05. 10的Bcphy3序列分析第88-90页
        4.2.2 Bcphy3的基因表达受到光照及生长发育的调控第90-91页
        4.2.3 灰霉菌光敏色素Bcphy3基因敲除及△Bcphy3突变体的筛选鉴定第91-93页
        4.2.4 △Bcphy3-P21的营养生长变慢,产菌核能力减弱第93页
        4.2.5 Bcphy3的基因敲除造成突变体致病性大大降低第93-95页
        4.2.6 Bcphy3影响细胞壁中的几丁质合成第95-98页
    4.3 本章小结第98-100页
全文总结及展望第100-104页
    第一部分 植物激素代谢/信号相关基因对叶片衰老的贡献第100-102页
    第二部分 光敏色素类组氨酸激酶Bcphy3对灰霉菌致病性的影响第102-104页
参考文献第104-118页
附录第118-123页
致谢第123-124页

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