内容摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第14-34页 |
1.1 叶片衰老相关信号分子 | 第14-17页 |
1.1.1 活性氧(ROS) | 第15页 |
1.1.2 糖 | 第15-16页 |
1.1.3 一氧化氮(NO) | 第16-17页 |
1.2 叶片衰老相关受体及信号通路 | 第17-19页 |
1.2.1 衰老信号感受器——类受体激酶(RLK) | 第17-18页 |
1.2.2 衰老信号传递——促分裂原活化蛋白激酶级联途径(MAPK) | 第18-19页 |
1.3 叶片衰老相关转录因子 | 第19-23页 |
1.3.1 NAC家族转录因子 | 第19-20页 |
1.3.2 WRKY家族转录因子 | 第20-22页 |
1.3.3 其他转录因子 | 第22-23页 |
1.4 叶片衰老的调控激素 | 第23-33页 |
1.4.1 细胞分裂素(CK) | 第24-25页 |
1.4.2 水杨酸(SA) | 第25-26页 |
1.4.3 脱落酸(ABA) | 第26页 |
1.4.4 乙烯 | 第26-27页 |
1.4.5 茉莉酸(JA) | 第27-28页 |
1.4.6 生长素 | 第28-33页 |
1.5 本研究目的、内容及意义 | 第33-34页 |
第二章 细胞分裂素氧化酶/脱氢酶3基因ATCKX3调节衰老的功能研究 | 第34-60页 |
2.1 材料与方法 | 第35-44页 |
2.1.1 植物材料培养与处理 | 第35页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第35-36页 |
2.1.3 试剂及仪器 | 第36页 |
2.1.4 培养基 | 第36页 |
2.1.5 实验引物 | 第36页 |
2.1.6 植物基因组的提取 | 第36-37页 |
2.1.7 拟南芥叶片cDNA的获得 | 第37-38页 |
2.1.8 重组质粒的构建 | 第38-39页 |
2.1.9 重组质粒转化根癌农杆菌ABI | 第39-40页 |
2.1.10 酵母单杂交 | 第40-41页 |
2.1.11 GUS组织化学定位 | 第41页 |
2.1.12 植物叶片衰老相关生理生化检测 | 第41-42页 |
2.1.13 根癌农杆菌介导的拟南芥转化法 | 第42-43页 |
2.1.14 q-PCR分析基因转录水平 | 第43-44页 |
2.1.15 LC - MS/MS法检测不同植物叶片中的IPA含量 | 第44页 |
2.2 结果与分析 | 第44-57页 |
2.2.1 AtCKX基因家族中AtCKX3在叶片衰老过程中表达显著上升 | 第44-46页 |
2.2.2 AtNAP能与AtCKX3基因的启动子区结合 | 第46-48页 |
2.2.3 AtNAP正调控AtCKX3基因的转录 | 第48-50页 |
2.2.4 AtCKX3基因的缺失造成植物叶片延迟衰老 | 第50-53页 |
2.2.5 AtCKX3基因的诱导过量表达导致植物叶片提前衰老 | 第53-55页 |
2.2.6 AtCKX3通过调节植物叶片中的细胞分裂素含量调节衰老 | 第55-57页 |
2.3 讨论 | 第57-60页 |
第三章 水杨酸信号通路相关基因SAG203调节叶片衰老的功能研究 | 第60-79页 |
3.1 材料与方法 | 第61-68页 |
3.1.1 植物材料培养与处理 | 第61页 |
3.1.2 菌株与质粒 | 第61页 |
3.1.3 试剂及仪器 | 第61-62页 |
3.1.4 培养基 | 第62页 |
3.1.5 实验引物 | 第62页 |
3.1.6 实验相关质粒的构建 | 第62-63页 |
3.1.7 重组质粒转化根癌农杆菌ABI | 第63页 |
3.1.8 酵母单杂交 | 第63页 |
3.1.9 植物叶片衰老相关生理生化检测 | 第63页 |
3.1.10 根癌农杆菌介导的拟南芥转化法 | 第63-64页 |
3.1.11 基因转录的q-PCR分析 | 第64-65页 |
3.1.12 LC - MS/MS法检测不同植物叶片中的SA含量 | 第65页 |
3.1.13 SAG203和ICS1蛋白的原核表达及体外酶活检测 | 第65-68页 |
3.2 结果与分析 | 第68-77页 |
3.2.1 SAG203是叶片衰老相关蛋白,促进植物叶片衰老 | 第68-72页 |
3.2.2 SAG202能与SAG203基因的启动子区结合 | 第72-73页 |
3.2.3 SAG203基因表达受到SAG202的正调控 | 第73-74页 |
3.2.4 SAG203可能参与水杨酸(SA)合成代谢 | 第74-77页 |
3.3 本章小结 | 第77-79页 |
第四章 (附)光敏色素类组氨酸激酶PHY3通过调节细胞壁几丁质合成调控灰霉菌致病性 | 第79-100页 |
4.1 材料与方法 | 第80-88页 |
4.1.1 实验菌株和试剂 | 第80-81页 |
4.1.2 培养条件 | 第81-82页 |
4.1.3 灰霉菌总RNA的提取及cDNA的合成 | 第82页 |
4.1.4 灰霉菌光敏色素类组氨酸激酶Bcphy3的鉴定 | 第82-83页 |
4.1.5 Bcphy3基因敲除同源重组片段的构建 | 第83页 |
4.1.6 灰霉菌B05. 10原生质体的制备及转化 | 第83-84页 |
4.1.7 Bcphy3缺失突变体的鉴定 | 第84-86页 |
4.1.8 RT-PCR检测B05. 10的Bcphy3及几丁质合成相关基因表达变化 | 第86页 |
4.1.9 生长速率的测定 | 第86页 |
4.1.10 菌核的观察 | 第86-87页 |
4.1.11 灰霉菌的致病性分析 | 第87页 |
4.1.12 灰霉菌细胞壁完整程度的检测 | 第87-88页 |
4.1.13 数据分析 | 第88页 |
4.2 结果与分析 | 第88-98页 |
4.2.1 灰霉菌B05. 10的Bcphy3序列分析 | 第88-90页 |
4.2.2 Bcphy3的基因表达受到光照及生长发育的调控 | 第90-91页 |
4.2.3 灰霉菌光敏色素Bcphy3基因敲除及△Bcphy3突变体的筛选鉴定 | 第91-93页 |
4.2.4 △Bcphy3-P21的营养生长变慢,产菌核能力减弱 | 第93页 |
4.2.5 Bcphy3的基因敲除造成突变体致病性大大降低 | 第93-95页 |
4.2.6 Bcphy3影响细胞壁中的几丁质合成 | 第95-98页 |
4.3 本章小结 | 第98-100页 |
全文总结及展望 | 第100-104页 |
第一部分 植物激素代谢/信号相关基因对叶片衰老的贡献 | 第100-102页 |
第二部分 光敏色素类组氨酸激酶Bcphy3对灰霉菌致病性的影响 | 第102-104页 |
参考文献 | 第104-118页 |
附录 | 第118-123页 |
致谢 | 第123-124页 |