| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1.1 猪链球菌的研究概况 | 第10-15页 |
| 1.1.1 猪链球菌的血清学分类 | 第10-11页 |
| 1.1.2 猪链球菌的血清型流行情况调查 | 第11-13页 |
| 1.1.3 毒力因子 | 第13-14页 |
| 1.1.4 致病机理的研究 | 第14-15页 |
| 1.2 2型猪链球菌疫苗的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.2.1 猪链球菌亚单位疫苗的保护性抗原 | 第15-17页 |
| 1.2.2 我国疫苗生产情况 | 第17-20页 |
| 1.3 疫苗佐剂的发展 | 第20-26页 |
| 1.3.1 佐剂的概念及发展简史 | 第20-21页 |
| 1.3.2 佐剂的作用机理和分类 | 第21页 |
| 1.3.3 LTB和FLIC的作用 | 第21-26页 |
| 第二章 湖南部分地区猪链球菌5个抗原的检测分析 | 第26-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂与仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.3 GenBank中猪链球菌全基因序列的5个抗原情况分析 | 第27页 |
| 2.1.4 5个抗原的检测引物设计 | 第27-28页 |
| 2.1.5 猪链球菌的DNA提取 | 第28页 |
| 2.1.6 PCR扩增 | 第28页 |
| 2.1.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.2.1 GenBank中猪链球菌5个抗原的阳性率和氨基酸保守性 | 第29-31页 |
| 2.2.2 5种抗原基因在临床菌株的检出情况 | 第31-34页 |
| 2.3 讨论 | 第34-35页 |
| 2.4 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 猪链球菌5种抗原基因与LTB和FLIC的融合构建及表达 | 第36-48页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-42页 |
| 3.1.1 菌株、质粒及感受态 | 第36页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.3 克隆引物设计 | 第37-38页 |
| 3.1.4 目的片段的扩增 | 第38页 |
| 3.1.5 LTB/FLIC-pET-28a(+)质粒的构建 | 第38-40页 |
| 3.1.6 猪链球菌的5个抗原与LTB/FLIC基因的融合构建 | 第40页 |
| 3.1.7 猪链球菌的融合蛋白表达情况 | 第40-41页 |
| 3.1.8 5种蛋白与猪链球菌阳性血清的免疫印迹试验 | 第41-42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.2.1 5种抗原、LTB和FLIC基因的扩增 | 第42-43页 |
| 3.2.2 重组质粒的鉴定结果 | 第43页 |
| 3.2.3 融合蛋白的表达结果 | 第43-44页 |
| 3.2.4 5个重组蛋白的免疫印迹试验结果 | 第44-45页 |
| 3.3 讨论 | 第45-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-48页 |
| 第四章 融合蛋白对小鼠的免疫保护试验 | 第48-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第48-51页 |
| 4.1.1 菌株 | 第48页 |
| 4.1.2 试验动物 | 第48页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第48页 |
| 4.1.4 亚单位疫苗疫苗的配制 | 第48-50页 |
| 4.1.5 小鼠免疫试验 | 第50页 |
| 4.1.6 间接ELISA检测免疫后小鼠血清的抗体滴度 | 第50页 |
| 4.1.7 攻毒强毒株的准备 | 第50-51页 |
| 4.2 试验结果 | 第51-58页 |
| 4.2.1 蛋白纯化结果 | 第51页 |
| 4.2.2 蛋白浓度测定及疫苗配制体积 | 第51-52页 |
| 4.2.3 间接ELISA检测小鼠的抗体滴度结果 | 第52-53页 |
| 4.2.4 2型猪链球菌对小鼠的LD_(50)测定结果 | 第53-54页 |
| 4.2.5 小鼠攻毒保护结果 | 第54-58页 |
| 4.3 讨论 | 第58-59页 |
| 4.4 小结 | 第59-60页 |
| 4.5 全文总结 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 英文缩略语表 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
