| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| ABBREVIATIONS缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-34页 |
| 1.1 RNA结合蛋白的结构与功能 | 第13-20页 |
| 1.1.1 RNA结合域 | 第13页 |
| 1.1.2 RNA结合蛋白的功能 | 第13-17页 |
| 1.1.3 CCCH锌指蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| 1.1.4 KH蛋白研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2 植物成花转变的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2.1 光周期途径 | 第21-22页 |
| 1.2.2 春化途径 | 第22页 |
| 1.2.3 赤霉素途径 | 第22-23页 |
| 1.2.4 自主途径 | 第23页 |
| 1.2.5 温度途径 | 第23-24页 |
| 1.2.6 年龄途径 | 第24页 |
| 1.2.7 各个途径的整合以及其他途径 | 第24页 |
| 1.3 RNA结合蛋白与植物的成花转变 | 第24-26页 |
| 1.3.1 FCA和FPA在调控开花中的作用 | 第25页 |
| 1.3.2 含有KH结构域的RNA结合蛋白在成花调控中的作用 | 第25-26页 |
| 1.4 植物衰老的研究进展 | 第26-33页 |
| 1.4.1 植物叶片衰老的调控 | 第27-30页 |
| 1.4.2 植物整株衰老的调控 | 第30-33页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第33-34页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第34-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 2.1.2 宿主菌 | 第34页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第34页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第34-35页 |
| 2.2 主要实验仪器 | 第35-36页 |
| 2.3 常用培养基及试剂的配制 | 第36-40页 |
| 2.3.1 常用培养基的配制 | 第36-37页 |
| 2.3.2 拟南芥原生质体转化相关溶液配制 | 第37-38页 |
| 2.3.3 GST标签蛋白原核表达纯化溶液的配制 | 第38页 |
| 2.3.4 Western Blot相关溶液的配制 | 第38-39页 |
| 2.3.5 蛋白质与RNA结合分析相关溶液配制 | 第39页 |
| 2.3.6 其他常用试剂溶液的配制 | 第39-40页 |
| 2.4 PCR引物 | 第40-43页 |
| 2.5 实验方法 | 第43-58页 |
| 2.5.1 拟南芥的培养 | 第43页 |
| 2.5.2 大肠杆菌DH5α或TOP10感受态细胞的制备 | 第43-44页 |
| 2.5.3 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| 2.5.4 PCR扩增及产物纯化回收 | 第45页 |
| 2.5.5 载体构建 | 第45-47页 |
| 2.5.6 质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第47-48页 |
| 2.5.7 花芽浸染法转染拟南芥 | 第48页 |
| 2.5.8 拟南芥转基因幼苗的筛选以及纯合株系的获得 | 第48页 |
| 2.5.9 SDS法提取拟南芥基因组DNA | 第48-49页 |
| 2.5.10 拟南芥营养组织器官总RNA的提取 | 第49页 |
| 2.5.11 mRNA的反转录 | 第49-50页 |
| 2.5.12 半定量PCR | 第50页 |
| 2.5.13 Real-time PCR | 第50-51页 |
| 2.5.14 GUS组织化学染色 | 第51页 |
| 2.5.15 拟南芥叶片叶绿素含量的测定 | 第51页 |
| 2.5.16 ABA,SA,MeJA和ACC对离体叶片的处理 | 第51页 |
| 2.5.17 开花时间的测量 | 第51-52页 |
| 2.5.18 质粒大量提取和纯化 | 第52页 |
| 2.5.19 拟南芥原生质体的制备与转化 | 第52-53页 |
| 2.5.20 转录激活活性的测定 | 第53-54页 |
| 2.5.21 GST标签蛋白原核诱导表达与纯化 | 第54-55页 |
| 2.5.22 蛋白质与RNA结合实验 | 第55页 |
| 2.5.23 聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western Blot | 第55-57页 |
| 2.5.24 FLC pre-mRNA剪接效率检测 | 第57-58页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第58-88页 |
| 3.1 KHZ1和KHZ2的氨基酸序列分析 | 第58-59页 |
| 3.2 KHZ1和KH22基因的突变体和过表达转基因株系的获得 | 第59-64页 |
| 3.2.1 单突变体khz1和khz2以及双突变体khz1 khz2的获得 | 第59-62页 |
| 3.2.2 KHZ1和KHZ2的过表达转基因株系的筛选鉴定 | 第62-63页 |
| 3.2.3 小结 | 第63-64页 |
| 3.3 KHZ1和KHZ2对拟南芥成花转变的调控 | 第64-73页 |
| 3.3.1 KHZ1和KHZ2正调控拟南芥的成花转变 | 第64-65页 |
| 3.3.2 KHZ1和KHZ2不参与拟南芥光周期,春化以及GA成花途径 | 第65-69页 |
| 3.3.3 拟南芥成花整合基因和花分生组织决定基因的表达分析 | 第69-71页 |
| 3.3.4 KHZ1和KHZ2参与了拟南芥成花自主途径 | 第71-72页 |
| 3.3.5 小结 | 第72-73页 |
| 3.4 KHZ1和KHZ2对拟南芥衰老的调控 | 第73-79页 |
| 3.4.1 KHZ1和KHZ2正调控拟南芥叶片的衰老 | 第73-76页 |
| 3.4.2 KHZ1和KHZ2促进拟南芥整株的衰老 | 第76-79页 |
| 3.4.3 小结 | 第79页 |
| 3.5 KHZ1和KHZ2的组织表达模式 | 第79-80页 |
| 3.6 KHZ1和KHZ2的亚细胞定位,转录激活活性及RNA结合活性 | 第80-88页 |
| 3.6.1 KHZ1和KHZ2的亚细胞定位 | 第80-83页 |
| 3.6.2 KHZ1和KHZ2的转录激活活性分析 | 第83-84页 |
| 3.6.3 KHZ1和KHZ2的RNA结合活性分析 | 第84-86页 |
| 3.6.4 KHZ1和KHZ2参与FLC pre-mRNA的剪接 | 第86-87页 |
| 3.6.5 小结 | 第87-88页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第88-92页 |
| 4.1 KHZ1和KHZ2是成花转变的正调控因子 | 第88-89页 |
| 4.2 KHZ1和KHZ2是拟南芥衰老的正调控因子 | 第89-91页 |
| 4.3 KHZ1和KHZ2在拟南芥各组织中广泛表达 | 第91页 |
| 4.4 KHZ1和KHZ2在转录及转录后水平发挥作用 | 第91-92页 |
| 第五章 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-110页 |
| 附录 拟南芥LARP1家族蛋白在种子萌发过程中的功能分析 | 第110-129页 |
| 1 文献综述 | 第110-115页 |
| 1.1 种子萌发的研究 | 第110-112页 |
| 1.2 LARP1家族蛋白的研究进展 | 第112-114页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第114-115页 |
| 2 材料和方法 | 第115-118页 |
| 2.1 实验材料 | 第115页 |
| 2.2 实验方法 | 第115-116页 |
| 2.2.1 拟南芥种子萌发分析 | 第115页 |
| 2.2.2 拟南芥角果和种子材料RNA的提取方法 | 第115-116页 |
| 2.2.3 叶片离子渗漏率的测定 | 第116页 |
| 2.3 PCR引物 | 第116-118页 |
| 3 结果与分析 | 第118-124页 |
| 3.1 突变体larp1c的获得 | 第118-119页 |
| 3.2 LARP1家族蛋白参与种子萌发的调控 | 第119-120页 |
| 3.3 参与种子萌发的相关基因的表达分析 | 第120-121页 |
| 3.4 LARP1基因的组织表达模式分析 | 第121-122页 |
| 3.5 LARP1家族蛋白定位于p小体 | 第122页 |
| 3.6 LARP1a过表达促进叶片的衰老 | 第122-124页 |
| 4 讨论与展望 | 第124-125页 |
| 参考文献 | 第125-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
| 作者简介 | 第130页 |
