| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 蕨类植物概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 蕨类植物的分布及功能 | 第11页 |
| 1.1.2 蕨类植物基因组及转录组相关研究进展 | 第11-12页 |
| 1.1.3 蕨类植物的各项利用价值 | 第12-13页 |
| 1.1.4 红盖鳞毛蕨 | 第13-14页 |
| 1.2 黄酮类化合物的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 黄酮类化合物的结构与功能 | 第14-16页 |
| 1.2.2 黄酮类化合物的生物合成途径 | 第16-17页 |
| 1.2.3 黄酮合成途径中的关键酶基因研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 查尔酮合成酶超家族基因研究进展 | 第18-26页 |
| 1.3.1 查尔酮合成酶超家族基因的结构 | 第18页 |
| 1.3.2 查尔酮合成酶超家族功能及其次生代谢产物 | 第18-26页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-45页 |
| 2.1 实验材料及仪器设备 | 第27-31页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第27-30页 |
| 2.1.2 实验使用设备 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 转录组测序 | 第31-33页 |
| 2.2.2 DeCHS基因的克隆 | 第33-37页 |
| 2.2.3 DeCHS超家族基因原核表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 2.2.4 红盖鳞毛蕨查尔酮合成酶超家族基因目的蛋白表达 | 第40-42页 |
| 2.2.5 重组质粒pDest37-4CL的诱导表达及体外酶活反应 | 第42-43页 |
| 2.2.6 DeCHS基因编码蛋白体外酶活检测 | 第43-45页 |
| 第三章 实验结果 | 第45-80页 |
| 3.1 红盖鳞毛蕨RNA提取及转录组测序结果分析 | 第45-47页 |
| 3.1.1 红盖鳞毛蕨RNA提取 | 第45页 |
| 3.1.2 转录组测序 | 第45-46页 |
| 3.1.3 转录组测序结果中与查尔酮合成酶超家族相关的基因 | 第46-47页 |
| 3.2 查尔酮合成酶超家族基因ORF序列的获得 | 第47-49页 |
| 3.3 红盖鳞毛蕨查尔酮合成酶DeCHS、DeCHSlike1、DeCHSlike2、DeCHSlike3基因的生物信息学分析 | 第49-63页 |
| 3.3.1 红盖鳞毛蕨DeCHS基因的ORF序列分析 | 第49-52页 |
| 3.3.2 红盖鳞毛蕨DeCHSlike1基因的ORF序列分析 | 第52-55页 |
| 3.3.3 红盖鳞毛蕨DeCHSlike2基因的ORF序列分析 | 第55-59页 |
| 3.3.4 红盖鳞毛蕨DeCHSlike3基因的ORF序列分析 | 第59-63页 |
| 3.4 构建进化树聚类分析 | 第63-66页 |
| 3.5 查尔酮合成酶超家族基因DeCHS、DeCHSlike1—DeCHSlike3原核表达载体构建 | 第66页 |
| 3.6 重组质粒pET32a-DeCHS、pET32a-DeCHSlike1、pET32a-DeCHSlike2及pET32a-DeCHSlike3的蛋白诱导表达及纯化 | 第66-70页 |
| 3.6.1 目的蛋白诱导表达 | 第66-68页 |
| 3.6.2 目的蛋白纯化 | 第68-70页 |
| 3.7 重组质粒pDest37-4CL的诱导表达 | 第70-71页 |
| 3.8 查尔酮合成酶超家族基因编码蛋白的体外酶活检测 | 第71-76页 |
| 3.8.1 以丙二酰CoA和香豆酰CoA为底物的体外酶活检测 | 第71-72页 |
| 3.8.2 以丙二酰CoA和苯乙酰CoA为底物的体外酶活检测 | 第72-73页 |
| 3.8.3 以丙二酰CoA和乙酰CoA为底物的体外酶活检测 | 第73-74页 |
| 3.8.4 以丙二酰CoA和异戊酰CoA为底物的体外酶活检测 | 第74-76页 |
| 3.9 讨论 | 第76-80页 |
| 3.9.1 DeCHS基因及其进化的探讨 | 第77页 |
| 3.9.2 查尔酮合成酶蛋白特性的探讨 | 第77-79页 |
| 3.9.3 DeCHS基因的原核表达及产物检测的探讨 | 第79-80页 |
| 第四章 总结与展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
