| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-20页 |
| 引言 | 第9页 |
| 1.1 水稻种子贮藏蛋白的种类 | 第9-14页 |
| 1.1.1 谷蛋白 | 第10-12页 |
| 1.1.2 醇溶蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.3 球蛋白 | 第13页 |
| 1.1.4 清蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2 基因组编辑技术研究进展及分子机制 | 第14-18页 |
| 1.2.1 锌指核酸酶(ZFNs) | 第14-15页 |
| 1.2.2 类转录激活因子效应物核酸酶(TALENs) | 第15-16页 |
| 1.2.3 CRISPR/Cas9系统 | 第16-18页 |
| 1.3 CRISPR/Cas9技术在水稻中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 试验用水稻品种 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种 | 第20页 |
| 2.1.3 载体 | 第20-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-34页 |
| 2.2.1 谷蛋白基因选择 | 第22页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第22-26页 |
| 2.2.3 遗传转化菌种制备及转化 | 第26-28页 |
| 2.2.4 水稻愈伤组织制备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.2.6 转基因苗的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.2.7 阳性编辑植株的PCR鉴定分析 | 第31-32页 |
| 2.2.8 qRT-PCR分析 | 第32-33页 |
| 2.2.9 突变体农艺性状调查分析 | 第33页 |
| 2.2.10 突变体材料种子中谷蛋白的提取及SDS-PAGE电泳分析 | 第33-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-43页 |
| 3.1 特异性表达验证 | 第34-36页 |
| 3.2 重组质粒验证 | 第36页 |
| 3.3 T_0代阳性转基因植株检测 | 第36-37页 |
| 3.4 基因靶位点突变类型鉴定 | 第37-40页 |
| 3.5 各突变类型RNA表达水平 | 第40-41页 |
| 3.6 各突变类型稻米中谷蛋白含量 | 第41-42页 |
| 3.7 各突变类型农艺性状 | 第42-43页 |
| 第4章 讨论与结论 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55页 |