致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第15-28页 |
1.1 透明质酸概述 | 第15-16页 |
1.1.1 透明质酸的分子结构 | 第15-16页 |
1.1.2 透明质酸的理化性质 | 第16页 |
1.2 透明质酸的制备方法 | 第16-19页 |
1.2.1 动物组织提取法 | 第16-17页 |
1.2.2 人工合成法 | 第17页 |
1.2.3 微生物发酵法 | 第17-19页 |
1.3 透明质酸的分离纯化 | 第19-23页 |
1.3.1 发酵液的预处理 | 第19-21页 |
1.3.2 发酵液中透明质酸的分离纯化 | 第21-23页 |
1.4 透明质酸的应用 | 第23-26页 |
1.4.1 临床医学 | 第23-25页 |
1.4.2 化妆品 | 第25页 |
1.4.3 医疗美容 | 第25-26页 |
1.4.4 食品保健品 | 第26页 |
1.5 立题背景及需解决的问题 | 第26页 |
1.6 实验内容 | 第26-28页 |
第二章 透明质酸种子培养工艺优化 | 第28-44页 |
2.1 前言 | 第28-29页 |
2.2 实验材料 | 第29-32页 |
2.2.1 供试菌株 | 第29页 |
2.2.2 主要物料 | 第29-30页 |
2.2.3 培养基的组成 | 第30-31页 |
2.2.4 相关溶液的配制 | 第31页 |
2.2.5 主要仪器 | 第31-32页 |
2.3 实验方法 | 第32-33页 |
2.3.1 培养基及工具灭菌方法 | 第32页 |
2.3.2 菌种保存方法 | 第32页 |
2.3.3 平板培养方法 | 第32页 |
2.3.4 斜面培养方法 | 第32-33页 |
2.3.5 种子摇瓶培养方法 | 第33页 |
2.3.6 发酵摇瓶培养方法 | 第33页 |
2.4 分析检测方法 | 第33-36页 |
2.4.1 菌体细胞浓度测量方法 | 第33页 |
2.4.2 菌体形态观察方法 | 第33页 |
2.4.3 pH测量方法 | 第33-34页 |
2.4.4 总糖含量测定方法 | 第34页 |
2.4.5 氨基氮含量测定方法 | 第34-35页 |
2.4.6 透明质酸效价快速测定方法——CTAB浊度法 | 第35-36页 |
2.5 结果与讨论 | 第36-43页 |
2.5.1 碳源对摇瓶种子生长和发酵的影响 | 第36-37页 |
2.5.2 氮源对摇瓶种子生长和发酵的影响 | 第37-39页 |
2.5.3 无机盐对摇瓶种子生长和发酵的影响 | 第39-40页 |
2.5.4 摇瓶种子生长曲线的测定 | 第40-42页 |
2.5.5 种龄对摇瓶种子生长和发酵的影响 | 第42-43页 |
本章小结 | 第43-44页 |
第三章 透明质酸摇瓶发酵培养工艺优化 | 第44-51页 |
3.1 前言 | 第44页 |
3.2 实验材料 | 第44-45页 |
3.2.1 供试菌株 | 第44页 |
3.2.2 主要原料及试剂 | 第44页 |
3.2.3 主要仪器 | 第44-45页 |
3.3 分析检测方法 | 第45页 |
3.3.1 菌体细胞浓度测量方法 | 第45页 |
3.3.2 菌体形态观察方法 | 第45页 |
3.3.3 pH测量方法 | 第45页 |
3.3.4 总糖含量测定方法 | 第45页 |
3.3.5 氨基氮含量测定方法 | 第45页 |
3.3.6 透明质酸效价快速测定方法——CTAB浊度法 | 第45页 |
3.4 结果与讨论 | 第45-50页 |
3.4.1 碳源对摇瓶发酵的影响 | 第46页 |
3.4.2 氮源对摇瓶发酵的影响 | 第46-47页 |
3.4.3 磷酸盐对透明质酸发酵的影响 | 第47-48页 |
3.4.4 摇瓶培养发酵曲线的确定 | 第48-50页 |
本章小结 | 第50-51页 |
第四章 透明质酸发酵工艺放大研究 | 第51-64页 |
4.1 前言 | 第51-52页 |
4.2 材料 | 第52-53页 |
4.2.1 主要物料 | 第52-53页 |
4.2.2 主要仪器 | 第53页 |
4.3 实验方法 | 第53-54页 |
4.3.1 培养基的配制 | 第53-54页 |
4.3.2 摇瓶种子液的培养 | 第54页 |
4.3.3 原始发酵条件 | 第54页 |
4.3.4 初糖浓度实验 | 第54页 |
4.3.5 恒速补糖实验 | 第54页 |
4.4 检测方法 | 第54-56页 |
4.4.1 菌体细胞浓度测量方法 | 第54-55页 |
4.4.2 菌体形态观察方法 | 第55页 |
4.4.3 pH测量方法 | 第55页 |
4.4.4 总糖含量测定方法 | 第55-56页 |
4.4.5 氨基氮含量测定方法 | 第56页 |
4.4.6 透明质酸效价快速测定方法——CTAB浊度法 | 第56页 |
4.5 结果与分析 | 第56-63页 |
4.5.1 发酵罐上的原始发酵曲线 | 第56-57页 |
4.5.2 初糖浓度对发酵的影响 | 第57-59页 |
4.5.3 罐上恒速补糖对发酵的影响 | 第59-63页 |
本章小结 | 第63-64页 |
第五章 透明质酸提取工艺优化 | 第64-81页 |
5.1 前言 | 第64页 |
5.2 材料 | 第64-65页 |
5.2.1 材料 | 第64-65页 |
5.2.2 主要试剂 | 第65页 |
5.2.3 主要仪器 | 第65页 |
5.3 实验方法 | 第65-68页 |
5.3.1 发酵液的预处理实验 | 第65-66页 |
5.3.2 发酵液除菌体实验 | 第66页 |
5.3.3 发酵液沉淀乙醇用量实验 | 第66页 |
5.3.4 发酵液沉淀时间实验 | 第66-67页 |
5.3.5 沉淀溶解NaCl用量实验 | 第67页 |
5.3.6 发酵液pH值实验 | 第67页 |
5.3.7 助滤剂的选择与用量实验 | 第67页 |
5.3.8 活性炭筛选与用量实验 | 第67-68页 |
5.4 分析检测方法 | 第68-70页 |
5.4.1 透明质酸澄清度的测定 | 第68页 |
5.4.2 透明质酸效价的测定 | 第68-69页 |
5.4.3 透明质酸沉淀湿重的测定 | 第69页 |
5.4.4 透明质酸蛋白质含量的测定 | 第69-70页 |
5.5 结果与分析 | 第70-80页 |
5.5.1 发酵液预处理实验的结果与分析 | 第70-73页 |
5.5.2 发酵液沉淀乙醇用量实验的结果与分析 | 第73页 |
5.5.3 除菌体实验的结果与分析 | 第73-74页 |
5.5.4 发酵液沉淀时间实验的结果与分析 | 第74页 |
5.5.5 沉淀溶解NaCl用量实验的结果与分析 | 第74-75页 |
5.5.6 助滤剂的选择与用量实验的结果与分析 | 第75-77页 |
5.5.7 解离液pH值实验的结果与分析 | 第77-78页 |
5.5.8 活性炭筛选与用量实验的结果与分析 | 第78-80页 |
5.6 下游工艺流程 | 第80-81页 |
本章小节 | 第81-82页 |
总结和展望 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
硕士期间发表的专利 | 第87页 |