摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 奶牛乳腺简介 | 第12-14页 |
1.1.1 乳蛋白合成机理及影响因素 | 第12-13页 |
1.1.2 乳脂合成机理及调控 | 第13-14页 |
1.2 重要的泌乳信号通路研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 JAK2/STAT5途径 | 第14-15页 |
1.2.2 mTOR途径 | 第15-17页 |
1.2.3 SREBP途径 | 第17-19页 |
1.3 氨基酸对泌乳的调节作用 | 第19-20页 |
1.4 SOCS3研究进展 | 第20-24页 |
1.4.1 SOCS家族简介 | 第20-21页 |
1.4.2 SOCS3的生物学功能 | 第21-22页 |
1.4.3 SOCS3在乳腺泌乳中的作用 | 第22-24页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-45页 |
2.1 仪器及主要试剂的配制 | 第25-30页 |
2.1.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第28-30页 |
2.2 方法 | 第30-44页 |
2.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第30-31页 |
2.2.2 SOCS3基因的过表达分析 | 第31-41页 |
2.2.3 SOCS3基因沉寂分析 | 第41-42页 |
2.2.4 STAT5a基因沉寂分析 | 第42-44页 |
2.2.5 蛋氨酸对SOCS3及泌乳相关基因的影响 | 第44页 |
2.3 统计分析 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-57页 |
3.1 体外培养乳腺上皮细胞及其鉴定 | 第45-46页 |
3.2 SOCS3基因过表达分析 | 第46-51页 |
3.2.1 SOCS3真核表达载体的构建 | 第46-47页 |
3.2.2 真核表达载体pGCMV-IRES-EGFP-SOCS3的瞬时转染 | 第47-51页 |
3.3 SOCS3基因沉寂分析 | 第51-54页 |
3.3.1 SOCS3的最佳干扰片段和最佳干扰时间的筛选 | 第51页 |
3.3.2 SOCS3基因沉寂 | 第51-54页 |
3.4 STAT5a基因沉寂分析 | 第54-55页 |
3.4.1 STAT5a的最佳干扰片段和最佳干扰时间的筛选 | 第54页 |
3.4.2 STAT5a基因沉寂 | 第54-55页 |
3.5 蛋氨酸对SOCS3及泌乳相关基因的影响 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-62页 |
4.1 奶牛乳腺上皮细胞的体外培养及鉴定 | 第57页 |
4.2 SOCS3对DCMECs泌乳通路JAK2/STAT5a的影响 | 第57-59页 |
4.3 SOCS3对DCMECs泌乳与增殖的影响 | 第59-61页 |
4.4 SOCS3对奶牛乳腺泌乳与增殖的研究展望 | 第61-62页 |
5 结论 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74页 |