| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第17-18页 |
| 第一章 绪言 | 第18-33页 |
| 1.1 NO_3~-胁迫是植物生长的主要限制因子 | 第19-22页 |
| 1.1.1 NO_3~-胁迫的产生及影响因素 | 第19-20页 |
| 1.1.2 NO_3~-胁迫对蔬菜生理生化的影响 | 第20-21页 |
| 1.1.3 植物适应盐胁迫的机理 | 第21-22页 |
| 1.1.3.1 调控体内离子平衡 | 第22页 |
| 1.1.3.2 渗透保护机制 | 第22页 |
| 1.1.3.3 激素调节 | 第22页 |
| 1.2 NO是植物逆境胁迫中的重要信号分子 | 第22-27页 |
| 1.2.1 植物体内NO的来源 | 第23-24页 |
| 1.2.2 外源NO在植物逆境胁迫中的作用 | 第24-27页 |
| 1.2.2.1 外源NO能缓解植物盐胁迫的伤害 | 第24-25页 |
| 1.2.2.2 外源NO能缓解干旱胁迫 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 外源NO能减少高、低温伤害 | 第26-27页 |
| 1.3 植物非共生血红蛋白的研究进展 | 第27-32页 |
| 1.3.1 植物非共生血红蛋白的结构 | 第28页 |
| 1.3.2 植物非共生血红蛋白基因及蛋白表达特性 | 第28-29页 |
| 1.3.3 植物非共生血红蛋白的生物学功能 | 第29-30页 |
| 1.3.3.1 植物非共生血红蛋白参与植物激素和信号转导 | 第29-30页 |
| 1.3.3.2 植物非共生血红蛋白能增强植物的胁迫抗性 | 第30页 |
| 1.3.4 植物非共生血红蛋白的作用机制 | 第30-32页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 NO_3~-胁迫下两种抗性不同菠菜SoHb的表达特性及NO代谢 | 第33-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-37页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34页 |
| 2.1.2 实验材料的培养 | 第34页 |
| 2.1.3 实验材料处理 | 第34-35页 |
| 2.1.3.1 不同浓度NO_3~-处理菠菜 | 第34页 |
| 2.1.3.2 外源施加SNP和CPTIO处理菠菜 | 第34页 |
| 2.1.3.3 外源施加NR抑制剂和NOS抑制剂处理菠菜 | 第34-35页 |
| 2.1.4 NO含量的测定 | 第35页 |
| 2.1.5 NR活性的测定 | 第35页 |
| 2.1.6 RNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.1.7 RT-PCR | 第36页 |
| 2.1.8 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第36页 |
| 2.1.9 NO荧光定量分析 | 第36页 |
| 2.1.10 统计分析方法 | 第36-37页 |
| 2.2 结果与分析 | 第37-47页 |
| 2.2.1 NO_3~-胁迫对两种不同抗性菠菜SoHb表达的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.1.1 不同浓度NO_3~-处理对两种菠菜SoHb表达的影响 | 第37页 |
| 2.2.1.2 160 mM NO_3~-胁迫不同时间对两种菠菜中SoHb表达的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.2 NO_3~-胁迫下两种菠菜中NO含量的影响 | 第38-40页 |
| 2.2.2.1 不同浓度NO_3~-处理对两种菠菜中NO含量的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.2.2 160 mM NO_3~-胁迫对两种菠菜中NO含量的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.3 外源添加SNP和cPTIO对NO_3~-胁迫下两种菠菜中NO含量的分析 | 第40-42页 |
| 2.2.3.1 不同浓度NO_3~-处理对两种菠菜中NR活性的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.3.2 160 mM NO_3~-胁迫不同时间对两种菠菜中NR活性的影响 | 第41-42页 |
| 2.2.4 外源添加SNP和cPTIO对N0_3~-胁迫下两种菠菜中NO含量的分析 | 第42页 |
| 2.2.5 SNP和cPTIO对NO_3~-胁迫处理下两种菠菜中SoHb表达的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.6 SNP和cPTIO对NO_3~-胁迫处理下两种菠菜中NR活性的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.7 Na_2WO_4和L-NAME处理对NO_3~-胁迫下两种菠菜根尖NO含量的分析 | 第44-45页 |
| 2.2.8 Na_2WO_4和L-NAME处理对NO_3~-胁迫下两种菠菜NR活性的影响 | 第45-46页 |
| 2.2.9 Na_2W0_4和L-NAME处理对NO_3~-胁迫下两种菠菜SoHb表达量的影响 | 第46-47页 |
| 2.3 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 硝酸盐胁迫下SoHb基因序列及功能分析 | 第50-66页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第50-51页 |
| 3.1.1 植物材料培养与处理 | 第50页 |
| 3.1.2 提取植物总RNA及反转录 | 第50页 |
| 3.1.3 PCR扩增SoHb基因 | 第50-51页 |
| 3.1.4 目的基因的TA克隆 | 第51页 |
| 3.1.5 质粒提取 | 第51页 |
| 3.2 植物表达载体构建 | 第51-53页 |
| 3.2.1 入门载体的构建 | 第52页 |
| 3.2.2 植物过表达载体和抑制表达载体构建 | 第52页 |
| 3.2.3 植物表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第52-53页 |
| 3.3 拟南芥的转化 | 第53-54页 |
| 3.3.1 野生型拟南芥的培养 | 第53页 |
| 3.3.2 花序侵染法转染拟南芥 | 第53页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥种子的筛选 | 第53-54页 |
| 3.3.4 转基因拟南芥基因组的提取(CTAB法) | 第54页 |
| 3.4 转基因拟南芥PCR、RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| 3.5 160 mM NO_3~-处理下转基因拟南芥发芽率、鲜重、根长测定 | 第55页 |
| 3.6 统计方法 | 第55页 |
| 3.7 结果与分析 | 第55-64页 |
| 3.7.1 SoHb基因的克隆 | 第55-56页 |
| 3.7.2 菠菜SoHb蛋白基因的序列分析 | 第56-57页 |
| 3.7.3 植物过表达载体和抑制表达载体的构建 | 第57-59页 |
| 3.7.4 植物表达载体转化农杆菌 | 第59页 |
| 3.7.5 转基因拟南芥的PCR、RT-PCR检测 | 第59-60页 |
| 3.7.6 转基因植株表型的分析 | 第60-61页 |
| 3.7.7 NO_3~-胁迫对过表达SoHb转基因拟南芥发芽率和幼苗生长的影响 | 第61-63页 |
| 3.7.8 NO_3~-胁迫对过表达SoHb转基因拟南芥幼苗中NO含量的影响 | 第63-64页 |
| 3.8 讨论 | 第64-66页 |
| 第四章 总结与展望 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-85页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表的论文 | 第85页 |
