| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 放线菌在微生物系统学中的地位 | 第10页 |
| 1.2 海洋放线菌 | 第10-11页 |
| 1.3 海洋放线菌次级代谢产物 | 第11-12页 |
| 1.3.1 酶抑制剂 | 第11页 |
| 1.3.2 抗肿瘤活性物质 | 第11页 |
| 1.3.3 抗菌活性物质 | 第11-12页 |
| 1.4 放线菌次生代谢特点 | 第12-13页 |
| 1.5 非核糖体肽合成酶(NRPS)简介 | 第13-18页 |
| 1.5.1 NRPS结构特点 | 第13-14页 |
| 1.5.2 NRPS作用机制 | 第14-17页 |
| 1.5.3 非核糖体肽生理功能 | 第17-18页 |
| 1.6 NRPS研究进展 | 第18-19页 |
| 1.7 本课题研究意义 | 第19-20页 |
| 第二章 海洋放线菌的筛选及鉴定 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 样品采集 | 第20页 |
| 2.1.2 抑菌活性测定用指示菌 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第22页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.2.3 海洋放线菌的分离 | 第23-24页 |
| 2.2.4 放线菌形态观察 | 第24页 |
| 2.2.5 活性菌株筛选方法 | 第24-25页 |
| 2.2.6 海洋放线菌生理生化鉴定 | 第25页 |
| 2.2.7 菌丝体基因组DNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.8 海洋放线菌16S rDNA鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-35页 |
| 2.3.1 放线菌分离 | 第26-27页 |
| 2.3.2 放线菌形态观察 | 第27-29页 |
| 2.3.3 具有抑菌活性的放线菌 | 第29页 |
| 2.3.4 生理生化特征 | 第29-31页 |
| 2.3.5 海洋放线菌16S rDNA鉴定 | 第31-35页 |
| 第三章 NRPS基因C结构域基因克隆 | 第35-50页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.1 材料 | 第35页 |
| 3.1.2 试剂盒 | 第35页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第35页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.5 试剂的配制 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-43页 |
| 3.2.1 引物的设计 | 第36-37页 |
| 3.2.2 退火温度的初步优化 | 第37-38页 |
| 3.2.3 C结构域PCR扩增 | 第38-43页 |
| 3.2.4 生物信息学分析 | 第43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 目的基因PCR结果 | 第43-45页 |
| 3.3.2 目的片段测序及序列分析 | 第45-46页 |
| 3.3.3 生物信息学分析 | 第46-49页 |
| 3.4 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 NRPS基因A结构域序列的克隆及鉴定 | 第50-64页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第50页 |
| 4.1.1 材料 | 第50页 |
| 4.1.2 试剂盒 | 第50页 |
| 4.1.3 常用试剂 | 第50页 |
| 4.1.4 主要设备 | 第50页 |
| 4.1.5 试剂的配制 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-55页 |
| 4.2.1 引物的设计 | 第50-51页 |
| 4.2.2 退火温度的初步优化 | 第51页 |
| 4.2.3 NRPS基因A结构域目的基因扩增及验证 | 第51-54页 |
| 4.2.4 生物信息学分析 | 第54-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-63页 |
| 4.3.1 NRPS基因A结构域PCR结果 | 第55-56页 |
| 4.3.2 目的片段测序及序列分析 | 第56-57页 |
| 4.3.3 生物信息学分析 | 第57-63页 |
| 4.4 小结 | 第63-64页 |
| 第五章 总结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |