摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 D-塔格糖简介 | 第11-13页 |
1.1.1 D-塔格糖的结构和性质 | 第11-12页 |
1.1.2 D-塔格糖的功能及应用 | 第12-13页 |
1.2 D-塔格糖的生产方法 | 第13-15页 |
1.2.1 化学合成法 | 第14页 |
1.2.2 生物转化法 | 第14-15页 |
1.3 D-塔格糖生产菌的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 细菌的分离筛选 | 第16页 |
1.5 细菌的分类内容 | 第16-20页 |
1.5.1 形态及生理生化特征鉴定 | 第16-17页 |
1.5.2 抗菌谱试验分类法 | 第17页 |
1.5.3 化学分类法 | 第17页 |
1.5.4 分子水平的鉴定方法 | 第17-19页 |
1.5.4.1 聚合酶链式反应(PCR)法 | 第17-18页 |
1.5.4.2 随机扩增多态性DNA法 | 第18页 |
1.5.4.3 16S RRNA序列分析法 | 第18页 |
1.5.4.4 DNA的(G+C)MOL%含量测定法 | 第18-19页 |
1.5.4.5 DNA-DNA同源性分析法 | 第19页 |
1.5.5 其他鉴定方法 | 第19-20页 |
1.6 本论文的研究意义 | 第20页 |
1.7 本论文的研究内容 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-34页 |
2.1 材料 | 第21-25页 |
2.1.1 实验样品 | 第21页 |
2.1.2 实验药品与仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 实验培养基和试剂 | 第22-24页 |
2.1.4 标准菌株 | 第24-25页 |
2.2 方法 | 第25-34页 |
2.2.1 分析方法 | 第25-26页 |
2.2.1.1 生物量的测定 | 第25页 |
2.2.1.2 D-塔格糖含量检测方法的建立 | 第25-26页 |
2.2.1.3 间苯二酚法测定D-塔格糖含量 | 第26页 |
2.2.1.4 高效液相色谱(HPLC)法测定D-塔格糖含量 | 第26页 |
2 2.2 D-塔格糖产生菌的筛选 | 第26-27页 |
2.2.2.1 D-塔格糖产生菌的初筛 | 第26-27页 |
2.2.2.2 D-塔格糖产生菌的复筛 | 第27页 |
2.2.3 D-塔格糖产生菌的初步鉴定 | 第27-28页 |
2.2.3.1 培养特征分析 | 第27页 |
2.2.3.2 形态特征分析 | 第27页 |
2.2.3.3 16S rRNA的序列分析及系统发育树构建 | 第27-28页 |
2.2.4 D-塔格糖生产菌的生理生化特征鉴定 | 第28-31页 |
2.2.4.1 生长曲线的测定 | 第28页 |
2.2.4.2 最适生长温度的确定 | 第28页 |
2.2.4.3 最适生长pH的确定 | 第28页 |
2.2.4.4 耐盐度试验 | 第28-29页 |
2.2.4.5 运动性试验 | 第29页 |
2.2.4.6 需氧性试验 | 第29页 |
2.2.4.7 过氧化氢酶接触试验 | 第29页 |
2.2.4.8 硫化氢产生试验 | 第29页 |
2.2.4.9 吲哚试验 | 第29页 |
2.2.4.10 甲基红试验 | 第29-30页 |
2.2.4.11 V-P试验 | 第30页 |
2.2.4.12 柠檬酸盐试验 | 第30页 |
2.2.4.13 明胶液化试验 | 第30页 |
2.2.4.14 硝酸盐还原试验 | 第30页 |
2.2.4.15 葡萄糖产酸试验 | 第30页 |
2.2.4.16 淀粉水解试验 | 第30-31页 |
2.2.4.17精氨酸产NH3试验 | 第31页 |
2.2.5 化学特征分析—磷酸类脂分析 | 第31-32页 |
2.2.5.1 菌体的培养收集 | 第31页 |
2.2.5.2 磷酸类脂的提取 | 第31页 |
2.2.5.3 磷脂提取物的检测 | 第31页 |
2.2.5.4 点样与层析 | 第31-32页 |
2.2.6 分子特征分析—DNA(G+C)mol%含量分析 | 第32-34页 |
2.2.6.1 细菌DN的提取 | 第32-33页 |
2.2.6.2 DNA的纯化 | 第33页 |
2.2.6.3 DNA的纯度检测 | 第33页 |
2.2.6.4 DNA的酶解 | 第33页 |
2.2.6.5 高效液相色谱分析条件 | 第33页 |
2.2.6.6 计算公式 | 第33-34页 |
第三章 结果与讨论 | 第34-52页 |
3.1 D-塔格糖检测方法的建立 | 第34-38页 |
3.1.1 测定波长 | 第34页 |
3.1.2 显色剂间苯二酚最适浓度 | 第34-35页 |
3.1.3 加热时间 | 第35-36页 |
3.1.4 冷却时间 | 第36页 |
3.1.5 标准曲线 | 第36-37页 |
3.1.6 加标回收率及精密度 | 第37页 |
3.1.7 D-半乳糖对检测方法的影响 | 第37-38页 |
3.2 D-塔格糖生产菌的筛选 | 第38-41页 |
3.2.1 D-塔格糖生产菌的初筛 | 第38-39页 |
3.2.2 D-塔格糖生产菌的复筛 | 第39-41页 |
3.3 D-塔格糖生产菌属的确定 | 第41-45页 |
3.3.1 培养特征 | 第41页 |
3.3.2 形态特征 | 第41-43页 |
3.3.2.1 革兰氏染色 | 第41-42页 |
3.3.2.2 扫描电镜结果 | 第42-43页 |
3.3.3 系统发育树构建 | 第43-45页 |
3.4 D-塔格糖生产菌种的确定 | 第45-50页 |
3.4.1 生理生化特征 | 第45-48页 |
3.4.1.1 生长曲线 | 第45页 |
3.4.1.2 生长温度范围 | 第45-46页 |
3.4.1.3 生长pH范围 | 第46-47页 |
3.4.1.4 耐盐性 | 第47页 |
3.4.1.5 生化特性鉴定结果 | 第47-48页 |
3.4.2 化学特征——磷酸类脂分析 | 第48-49页 |
3.4.3 基因特征-DNA(G+C) mol%含量分析 | 第49-50页 |
3.5 讨论 | 第50-52页 |
3.5.1 D-塔格糖检测方法的建立 | 第50页 |
3.5.2 D-塔格糖生产菌筛选工艺的确定 | 第50页 |
3.5.3 D-塔格糖生产菌的特征鉴定 | 第50页 |
3.5.4 D-塔格糖生产菌的重要意义 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
致谢 | 第57页 |