致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-14页 |
1.1 种子萌发、种子老化、种子活力定义 | 第10页 |
1.2 种子活力的影响因素 | 第10-11页 |
1.3 种子萌发及老化的生理生化研究 | 第11-14页 |
1.3.1 种子吸水规律的变化 | 第11页 |
1.3.2 储藏物的变化 | 第11-12页 |
1.3.3 能量代谢和ATP含量的变化 | 第12页 |
1.3.4 酶活性的变化 | 第12-13页 |
1.3.5 可溶性糖的变化的变化 | 第13-14页 |
2 引言 | 第14-16页 |
2.1 研究目的 | 第14页 |
2.2 研究内容 | 第14-15页 |
2.3 技术路线 | 第15-16页 |
3 材料与方法 | 第16-25页 |
3.1 材料与处理 | 第16页 |
3.2 种子发芽率的测定 | 第16页 |
3.3 种子吸水率测定 | 第16页 |
3.4 可溶性糖的提取与测定 | 第16-17页 |
3.4.1 可溶性糖的提取 | 第16-17页 |
3.4.2 可溶性糖的测定 | 第17页 |
3.5 糖代谢关键酶活性的提取与测定 | 第17-20页 |
3.5.1 己糖激酶(HXK) | 第17-18页 |
3.5.1.1 己糖激酶粗酶样品的制备 | 第17-18页 |
3.5.1.2 蛋白浓度测定 | 第18页 |
3.5.1.3 己糖激酶活性测定 | 第18页 |
3.5.2 磷酸果糖激酶(PFK) | 第18-19页 |
3.5.2.1 磷酸果糖激酶粗酶样品的制备 | 第18页 |
3.5.2.2 蛋白浓度测定 | 第18页 |
3.5.2.3 磷酸果糖激酶活性测定 | 第18-19页 |
3.5.3 丙酮酸激酶(PK) | 第19页 |
3.5.3.1 丙酮酸激酶粗酶样品的制备 | 第19页 |
3.5.3.2 蛋白浓度测定 | 第19页 |
3.5.3.3 丙酮酸激酶活性测定 | 第19页 |
3.5.4 柠檬酸合酶(CS) | 第19-20页 |
3.5.4.1 柠檬酸合酶粗酶样品的制备 | 第19页 |
3.5.4.2 蛋白浓度测定 | 第19页 |
3.5.4.3 柠檬酸合酶活性测定 | 第19-20页 |
3.5.5 葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD) | 第20页 |
3.5.5.1 葡萄糖6磷酸脱氢酶粗酶样品的制备 | 第20页 |
3.5.5.2 蛋白浓度测定 | 第20页 |
3.5.5.3 葡萄糖6磷酸脱氢酶活性测定 | 第20页 |
3.6 ATP含量的测定 | 第20-21页 |
3.6.1 ATP的提取 | 第20页 |
3.6.2 发光反应液的配置 | 第20页 |
3.6.3 ATP标准曲线的配置 | 第20-21页 |
3.6.4 样品测定 | 第21页 |
3.7 糖代谢关键酶相关基因的实时荧光定量qRT-PCR检测 | 第21-23页 |
3.7.1 RNA提取 | 第21页 |
3.7.2 RNA质量检测 | 第21-22页 |
3.7.3 cDNA第一链合成 | 第22页 |
3.7.4 qRT-PCR的引物设计 | 第22-23页 |
3.7.5 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第23页 |
3.8 糖代谢中间物质含量的测定 | 第23-24页 |
3.8.1 样品的提取 | 第23-24页 |
3.8.2 样品的测定 | 第24页 |
3.9 数据处理 | 第24-25页 |
4 结果与分析 | 第25-41页 |
4.1 人工老化处理对种子吸水率的影响 | 第25页 |
4.2 人工老化处理对种子萌发初期可溶性糖的影响 | 第25-33页 |
4.2.1 种子中可溶性糖的分布及种类 | 第25-26页 |
4.2.2 人工老化过程胚中可溶性糖含量的变化 | 第26-30页 |
4.2.2.1 人工老化过程胚中麦芽糖的变化 | 第26-27页 |
4.2.2.2 人工老化过程胚中蔗糖的变化 | 第27-28页 |
4.2.2.3 人工老化过程胚中果糖的变化 | 第28-29页 |
4.2.2.4 人工老化过程胚中葡萄糖的变化 | 第29-30页 |
4.2.3 人工老化过程胚乳中可溶性糖含量的变化 | 第30-33页 |
4.2.3.1 人工老化过程胚乳中蔗糖的变化 | 第30-31页 |
4.2.3.2 人工老化过程胚乳中果糖的变化 | 第31-32页 |
4.2.3.3 人工老化过程胚乳中葡萄糖的变化 | 第32-33页 |
4.3 人工老化处理对种子萌发初期糖代谢途径关键酶活性的影响 | 第33-37页 |
4.3.1 人工老化处理对糖酵解途径关键酶活性的影响 | 第33-35页 |
4.3.1.1 人工老化过程中己糖激酶活性的变化 | 第33-34页 |
4.3.1.2 人工老化过程中磷酸果糖激酶活性的变化 | 第34页 |
4.3.1.3 人工老化过程中丙酮酸激酶活性的变化 | 第34-35页 |
4.3.2 人工老化处理对三羧酸循环关键酶活性的影响 | 第35-36页 |
4.3.3 人工老化处理对戊糖磷酸途径关键酶活性的影响 | 第36-37页 |
4.4 人工老化对种子糖代谢中间物质的影响 | 第37-38页 |
4.5 人工老化处理对种子萌发初期种胚内ATP含量的影响 | 第38页 |
4.6 人工老化处理对种子糖代谢调控的影响 | 第38-39页 |
4.7 人工老化处理对糖代谢关键酶相关基因表达的影响 | 第39-41页 |
5 结论与讨论 | 第41-44页 |
5.1 讨论 | 第41-42页 |
5.1.1 人工老化处理使种子在萌发初期可溶性糖的动员受到阻碍 | 第41页 |
5.1.2 人工老化处理使种子在萌发初期糖代谢失调 | 第41-42页 |
5.1.3 人工老化处理使种子在萌发初期ATP产生受到抑制 | 第42页 |
5.2 结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
ABSTRACT | 第51-52页 |