| 中文摘要 | 第8-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 符号说明 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-38页 |
| 第1节 链霉菌简介 | 第17-18页 |
| 第2节 核苷类抗生素 | 第18-33页 |
| 2.1 核苷类抗生素分类 | 第18-20页 |
| 2.2 核苷类抗生素的生物合成基因簇 | 第20-33页 |
| 第3节 米多霉素研究背景与进展 | 第33-38页 |
| 3.1 米多霉素(mildiomycin)的化学结构 | 第33-34页 |
| 3.2 植物白粉病与米多霉素的应用 | 第34页 |
| 3.3 提高米多霉素产量的研究 | 第34-36页 |
| 3.4 米多霉素衍生物的生物合成 | 第36-37页 |
| 3.5 羟甲基胞嘧啶合成的初步研究 | 第37-38页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第38-65页 |
| 第1节 实验材料 | 第38-50页 |
| 1.1 菌株 | 第38-40页 |
| 1.2 质粒 | 第40-44页 |
| 1.3 培养基和化学试剂 | 第44-47页 |
| 1.4 本实验所用的 PCR 引物 | 第47-50页 |
| 第2节 实验方法 | 第50-65页 |
| 第三章 米多霉素生物合成基因簇的克隆和异源表达 | 第65-79页 |
| 第1节 米多霉素生物合成基因簇的克隆 | 第65-70页 |
| 第2节 米多霉素生物合成基因簇在变铅青链霉菌中的表达 | 第70-73页 |
| 第3节 米多霉素生物合成基因簇的序列测定和 ORF 预测 | 第73-79页 |
| 第四章 米多霉素生物合成基因簇中几个重要基因功能的研究 | 第79-108页 |
| 第1节 MilA和MilB负责羟甲基胞嘧啶和胞嘧啶的合成 | 第79-97页 |
| 1.1 链轮丝菌 ZJU5119 中 milA 和 milB 的基因置换 | 第79-82页 |
| 1.2 链轮丝菌 milA 和 milB 的基因置换突变株的米多霉素合成 | 第82-86页 |
| 1.3 MilA 和 MilB 的表达和纯化 | 第86-87页 |
| 1.4 体外分析 MilA 和 MilB 的作用 | 第87-93页 |
| 1.5 MilB 的动力学参数研究 | 第93-94页 |
| 1.6 MilA 和 MilB 功能的讨论 | 第94-97页 |
| 第2节 糖基转移酶 MilC 负责羟甲基胞嘧啶葡萄糖醛酸和胞嘧啶葡萄糖 醛酸的合成 | 第97-108页 |
| 2.1 MilC 的生物信息学分析 | 第97-99页 |
| 2.2 milC 的基因置换 | 第99-103页 |
| 2.3 MilC 的原核表达与纯化 | 第103页 |
| 2.4 体外分析 MilC 的酶活反应 | 第103-105页 |
| 2.5 MilC 对胞嘧啶和羟甲基胞嘧啶具有不同的酶动力学常数 | 第105-107页 |
| 2.6 MilC 对胞嘧啶和羟甲基胞嘧啶具有不同的酶动力学常数的意义 | 第107-108页 |
| 第五章 通过同位素喂养和基因突变分析米多霉素的生物合成 | 第108-167页 |
| 第1节 ~(13)C 标记的精氨酸喂养 | 第108-111页 |
| 第2节 通过基因突变分析米多霉素生物合成 | 第111-167页 |
| 2.1 几个基因置换中间质粒的构建 | 第111-114页 |
| 2.2 milG 的基因置换 | 第114-119页 |
| 2.3 milD 的基因置换 | 第119-124页 |
| 2.4 milM 的基因置换 | 第124-128页 |
| 2.5 milN 的基因置换 | 第128-132页 |
| 2.6 milO 的基因置换 | 第132-137页 |
| 2.7 milQ 的基因置换 | 第137-140页 |
| 2.8 milI 的基因置换 | 第140-143页 |
| 2.9 milJ 的基因置换 | 第143-146页 |
| 2.10 milP 的基因置换 | 第146-149页 |
| 2.11 milK 的基因置换 | 第149-153页 |
| 2.12 milL 的基因置换 | 第153-156页 |
| 2.13 milF 的基因置换 | 第156-159页 |
| 2.14 milE 的基因置换 | 第159-163页 |
| 2.15 milH 的基因置换 | 第163-167页 |
| 第六章 米多霉素生物合成途径的推导 | 第167-173页 |
| 第1节 米多霉素生物合成基因簇的边界的确定 | 第167页 |
| 第2节 米多霉素生物合成基因簇和杀稻瘟菌素生物合成基因簇的比较 | 第167-170页 |
| 第3节 米多霉素生物合成途径的推导 | 第170-173页 |
| 第七章 总结与展望 | 第173-177页 |
| 第1节 本研究工作总结和主要创新点 | 第173-174页 |
| 第2节 进一步工作和展望 | 第174-177页 |
| 参考文献 | 第177-190页 |
| 致谢 | 第190-192页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文和申请的专利 | 第192页 |
