| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 常用词语英文缩写 | 第10-14页 |
| 前言 | 第14页 |
| 1 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 GATA家族简介 | 第14-16页 |
| 1.2 GATA家族在内分泌组织中的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.1 下丘脑和垂体(Hypothalamus and Pituitary) | 第16页 |
| 1.2.2 胎盘(Placenta) | 第16页 |
| 1.2.3 甲状腺和甲状旁腺(Thyroid and Parathyroid) | 第16页 |
| 1.2.4 胰腺(Pancreas) | 第16-17页 |
| 1.2.5 睾丸(Testis) | 第17页 |
| 1.3 GATA家族在生殖系统中的作用 | 第17-20页 |
| 1.3.1 调控下游靶基因 | 第17-19页 |
| 1.3.2 激素负反馈调节GATA | 第19页 |
| 1.3.3 性别决定和分化的作用 | 第19-20页 |
| 1.4 卵巢GATA-4和GATA-6功能研究 | 第20-26页 |
| 1.4.1 GATA-4和GATA-6定位研究 | 第20-21页 |
| 1.4.2 GATA-4信号途径 | 第21-22页 |
| 1.4.3 GATA-4靶基因 | 第22-26页 |
| 1.5 有关GATA-6研究总结 | 第26页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第27-29页 |
| 2.1.1 样品的采集 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第28页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.1.5 应用的生物学软件 | 第29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-39页 |
| 2.2.1 总RNA提取及引物设计 | 第29-31页 |
| 2.2.2 GATA-4和GATA-6片段的克隆及序列测定 | 第31-33页 |
| 2.2.3 GATA-4真核表达载体构建及鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.4 颗粒细胞原代培养 | 第34页 |
| 2.2.5 GATA-4真核表达载体瞬时转染鹅颗粒细胞 | 第34-35页 |
| 2.2.6 25-hydroxycholesterol诱导颗粒细胞凋亡 | 第35-36页 |
| 2.2.7 细转染GATA-4抵抗25-hydroxycholesterol毒性 | 第36-37页 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-56页 |
| 3.1 鹅GATA-4和GATA-6编码区序列克隆与分析 | 第39-41页 |
| 3.1.1 卵巢RNA提取结果 | 第39-40页 |
| 3.1.2 PCR扩增结果 | 第40-41页 |
| 3.1.3 编码区序列拼接 | 第41页 |
| 3.2 鹅GATA-4和GATA-6编码区序列分析 | 第41-46页 |
| 3.2.1 GATA-4和GATA-6编码区氨基酸序列分析 | 第41-44页 |
| 3.2.2 鹅GATA-4和GATA-6蛋白结构域分析 | 第44-46页 |
| 3.3 鹅GATA-4和GATA-6表达模式 | 第46-47页 |
| 3.3.1 鹅GATA-4和GATA-6在3种类型的卵泡中表达情况 | 第46页 |
| 3.3.2 鹅GATA-4和GATA-6在不同等级卵泡中的表达情况 | 第46-47页 |
| 3.4 GATA-4真核表达载体构建 | 第47-51页 |
| 3.4.1 GATA-4载体构建 | 第48页 |
| 3.4.2 GATA-4转染颗粒细胞及表达鉴定 | 第48-49页 |
| 3.4.3 转染GATA-4对下游靶基因影响及与颗粒细胞增殖关系 | 第49-51页 |
| 3.5 25HC诱导颗粒细胞凋亡鉴定 | 第51-53页 |
| 3.5.1 普通形态学观察 | 第51页 |
| 3.5.2 TURNEL绿色荧光鉴定凋亡细胞 | 第51-52页 |
| 3.5.3 检测类固醇通路上关键基因表达 | 第52-53页 |
| 3.6 过表达GATA-4缓解25HC诱导颗粒细胞凋亡和25HC降低类固醇生成 | 第53-56页 |
| 3.6.1 25HC处理细胞过表达GATA-4基因的表达量情况 | 第53-54页 |
| 3.6.2 过表达GATA-4可以抵御25HC诱导细胞凋亡的能力 | 第54-55页 |
| 3.6.3 过表达GATA-4平衡25HC抑制类固醇合成 | 第55-56页 |
| 4、讨论 | 第56-61页 |
| 4.1 鹅GATA-4和GATA-6分子结构差异 | 第56-57页 |
| 4.2 鹅GATA-4和GATA-6表达模式分析 | 第57-58页 |
| 4.3 25HC诱导颗粒细胞凋亡、抑制类固醇合成基因表达 | 第58-59页 |
| 4.4 过表达GATA-4促进颗粒细胞增殖、上调靶基因 | 第59-60页 |
| 4.5 过表达GATA-4缓解25HC诱导凋亡和25HC抑制类固醇生成 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 硕士研究生学习期间发表的论文 | 第71页 |
