摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
1 灰霉菌的概述 | 第15-18页 |
1.1 灰霉菌的生活史 | 第15页 |
1.2 灰霉菌的致病策略 | 第15-18页 |
1.3 后基因组时代的灰霉菌 | 第18页 |
2 乙烯在植物病原真菌中的合成与感受 | 第18-25页 |
2.1 植物病原真菌的乙烯合成 | 第19-23页 |
2.1.1 ACC途径 | 第21-22页 |
2.1.2 KMBA途径 | 第22-23页 |
2.1.3 EFE途径 | 第23页 |
2.2 乙烯对植物病原真菌的生物学作用 | 第23-24页 |
2.3 病原真菌与植物互作体系中的乙烯 | 第24-25页 |
3 病原真菌的光生物学 | 第25-29页 |
3.1 真菌的蓝光受体White collar 1/2复合体 | 第26-27页 |
3.2 真菌蓝光受体对下游基因的调节 | 第27-28页 |
3.3 蓝光受体对病原真菌的调控作用 | 第28-29页 |
3.4 研究光信号对植物病原真菌调控机理的重要性 | 第29页 |
4 本论文的研究目的、内容及意义 | 第29-30页 |
第二章 灰霉菌自身合成乙烯及其对病害的警示作用 | 第30-48页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
1.1 材料 | 第31页 |
1.2 气相色谱测定灰霉菌在体外培养基中合成乙烯 | 第31-32页 |
1.3 灰霉菌与寄主果实互作体系乙烯释放的测定 | 第32-33页 |
1.4 外源乙烯对灰霉菌生长发育的影响测定 | 第33页 |
1.5 RT-PCR检查灰霉菌分泌果胶酶基因表达 | 第33页 |
1.6 外源乙烯对灰霉菌在葡萄果实上致病性影响的测定 | 第33-34页 |
2 结果与分析 | 第34-44页 |
2.1 光照和寄主营养有利于灰霉菌合成乙烯 | 第34-35页 |
2.2 灰霉菌-葡萄互作体系的乙烯释放 | 第35-37页 |
2.3 灰霉菌-草莓互作体系的乙烯释放及病害发展 | 第37-38页 |
2.4 灰霉菌-番茄果实互作体系的乙烯释放 | 第38-39页 |
2.5 外源乙烯对灰霉菌生长发育和致病因子表达的影响 | 第39-43页 |
2.6 外源乙烯对灰霉菌在葡萄上致病性的影响与光照条件有关 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-48页 |
第三章 灰霉菌合成和感受乙烯相关基因的转录组分析 | 第48-77页 |
1 材料与方法 | 第48-57页 |
1.1 材料 | 第48页 |
1.2 转录组分析的灰霉菌样品制备 | 第48-49页 |
1.3 气相色谱测定样品的乙烯浓度 | 第49页 |
1.4 灰霉菌RNA提取 | 第49-50页 |
1.5 转录组文库构建、测序及数据分析 | 第50-52页 |
1.6 转录组差异基因的实时定量PCR验证 | 第52页 |
1.7 重要候选基因的功能研究 | 第52-57页 |
2 结果与分析 | 第57-73页 |
2.1 转录组测序的质量控制 | 第57-60页 |
2.2 灰霉菌乙烯合成相关的差异表达基因分析及功能注释 | 第60-61页 |
2.3 灰霉菌乙烯感应相关的差异表达基因分析及功能注释 | 第61-63页 |
2.4 转录组差异表达基因的定量PCR验证 | 第63-64页 |
2.5 乙烯诱导表达的bcrab6基因的序列分析 | 第64-66页 |
2.6 灰霉菌乙烯合成相关基因bcast的功能分析 | 第66-73页 |
3 讨论 | 第73-77页 |
第四章 光对灰霉菌生长发育、乙烯合成及致病性的调节作用 | 第77-90页 |
1 材料与方法 | 第77-79页 |
1.1 供试菌株 | 第77页 |
1.2 光照条件对植物病原真菌生长发育和致病性的影响研究 | 第77-78页 |
1.3 光质条件对灰霉菌乙烯合成能力的影响 | 第78-79页 |
1.4 测定病原真菌的紫外(UV-C)胁迫的敏感性 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-86页 |
2.1 各种光照条件对灰霉菌体外生长速率的影响 | 第79-81页 |
2.2 不同光质对灰霉菌致病性的影响 | 第81-82页 |
2.3 不同光质对灰霉菌分生孢子产生的影响 | 第82-83页 |
2.4 光对灰霉菌抗紫外胁迫能力的诱导 | 第83-85页 |
2.5 光信号途径对灰霉菌KMBA途径合成乙烯的调节 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-90页 |
第五章 (附)新型隐球酵母蓝光受体Bwc1调节致病性的分子机制 | 第90-112页 |
1 材料与方法 | 第93-100页 |
1.1 供试菌株 | 第93页 |
1.2 培养基 | 第93-94页 |
1.3 构建新型隐球酵母光受体的点突变转化载体 | 第94-95页 |
1.4 转化子的筛选与鉴定 | 第95-96页 |
1.5 光照对新型隐球酵母紫外敏感性影响的检测 | 第96页 |
1.6 光照对新型隐球酵母有性世代菌丝发育影响的观察 | 第96-97页 |
1.7 光照对新型隐球酵母细胞融合的影响 | 第97页 |
1.8 新型隐球酵母光信号响应标记基因HEM15表达的检测 | 第97-98页 |
1.9 酵母双杂交实验测定Bwc1和Bwc2蛋白的相互作用 | 第98-99页 |
1.10 用wax moth作为寄主测定新型隐球酵母的致病性 | 第99页 |
1.11 新型隐球酵母受光受体影响的转录组差异表达分析 | 第99-100页 |
2 结果与分析 | 第100-109页 |
2.1 新型隐球酵母光受体编码基因基因BWC1定点突变菌株的鉴定 | 第100-102页 |
2.2 定点突变菌株对紫外高度敏感 | 第102-103页 |
2.3 光照不能抑制定点突变菌株的有性发育过程 | 第103-105页 |
2.4 定点突变菌株的HEM15表达对光照不敏感 | 第105-106页 |
2.5 定点突变的Bwc1能与Bwc2发生蛋白相互作用 | 第106-107页 |
2.6 定点突变菌株与野生型具有相似致病性 | 第107-108页 |
2.7 光受体缺失和定点突变引起的转录组差异表达分析 | 第108-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
第六章 全文总结与展望 | 第112-116页 |
参考文献 | 第116-131页 |
附录 | 第131-143页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第143-145页 |
致谢 | 第145-146页 |